Zdroje bílkovin ve stravě a aterogenní dyslipidémie

Návštěvy kliniky:

Účastníci navštíví kliniku celkem 11krát od screeningu do ukončení studie. To bude zahrnovat týdenní návštěvy u odborníka na výživu a 9 návštěv vyžadujících odběry krve (na obrazovce a při 2 po sobě jdoucích návštěvách po každém dietním období). Při každé návštěvě budou účastníci zváženi, bude jim změřen obvod pasu a boků a bude monitorován krevní tlak. Celkové množství krve odebrané v průběhu studie bude 455 ml.

Prohlídka (SV: 1 hodina):

Náboroví pracovníci nejprve určí způsobilost prostřednictvím přezkoumání screeningového dotazníku a telefonického nebo osobního pohovoru. Pokud je potenciální subjekt způsobilý a má zájem, bude mu zaslán orientační balíček, který bude obsahovat písemné informace o požadavcích studia. Zájemci, kteří projdou předběžným vyšetřením, budou naplánováni na odběr krve, aby se určila konečná způsobilost. Při screeningové návštěvě (SV) účastníci poskytnou informovaný souhlas, zkontrolují svou anamnézu s registrovanou sestrou a nechají si změřit krevní tlak, váhu, výšku a obvod pasu a boků. Bude odebráno 30 ml krve pro měření plazmatických triglyceridů (TG), celkového cholesterolu, LDL-C, HDL-C, glukózy a hormonu stimulujícího štítnou žlázu (TSH). Ženám ve fertilním věku bude proveden těhotenský test z moči na beta-lidský choriový gonadotropin (b-hCG). Účastníci budou do 2 týdnů kontaktováni, aby je informovali o své způsobilosti.

Návštěvy odborníka na výživu (počáteční: 1 hodina):

Účastníci se budou každý týden setkávat s odborníkem na výživu, aby jim bylo poskytnuto poradenství včetně řízení hmotnosti a revize stravy. Na těchto setkáních účastníci dostanou týdenní mražené předkrmy a studijní jídla, stejně jako standardizované menu s kontrolními seznamy. Během vymývacího období (týdny 6-8; týdny 12-14) se subjekty budou i nadále zdržovat alkoholu, ale budou konzumovat svou obvyklou domácí stravu po dobu 14 dnů.

Návštěvy po dietě vyžadující odběry krve (návštěvy: 1,5 hodiny, návštěvy B: 2,5 hodiny):

Účastníci navštíví kliniku dva oddělené dny po ukončení každé diety, aby poskytli vzorky krve. Duplicitní odběr vzorků snižuje biologickou variabilitu, a tím zlepšuje schopnost studie detekovat významné změny v měření způsobené stravou. Předposlední den každé diety (návštěvy 1A, 2A, 3A, 4A) bude nalačno odebrán odběr krve (45 ml) pro měření plazmy (TG, celkový-C, LDL-C, HDL-C, lipoproteinové subfrakce, glukóza inzulín, apolipoproteiny AI, AII, B a CIII a zánětlivé markery). Poslední den každého dietního období (návštěvy 1B, 2B, 3B, 4B) účastníci poskytnou druhý vzorek krve nalačno (pro lipidy a lipoproteiny, jak je uvedeno výše). Aktivity lipoproteinové lipázy a jaterní lipázy budou také měřeny v plazmě (20 ml) odebrané 15 minut po intravenózním podání heparinu (75 jednotek/kg).

Klinické postupy:

Klinická měření: Krevní tlak bude měřen 3x v sedě a poslední 2 hodnoty zprůměrovány. Antropometrická měření zahrnují výšku, váhu, obvod pasu a boků a % tělesného tuku pomocí bioimpedance (Tanitova stupnice). Obvod pasu se měří dvakrát u hřebene kyčelního kloubu a obvod kyčle se měří v nejširším místě boků.

Standardní odběry krve: Při použití standardních postupů odběru krve budou vzorky odebírány účastníkům po 12-14 hodinovém půstu. Krev bude odebírána do zkumavek obsahujících následující konzervační roztok: 3,0 g EDTA (draslík), 1,7 mg P-Pack, 0,15 g gentamycin sulfátu, 0,15 g chloramfenikolu, 5,96 ml aprotininu (Sigma A-6230 gs azid.0 gs sodný). všechny se zředí na 20 ml dvakrát deionizovanou vodou. Plazma se oddělí okamžitou centrifugací při 4 °C. Provedou se měření lipidů a lipoproteinů a alikvoty plazmy se zmrazí pro budoucí analýzy.

Odběr vzorků krve po heparinu: Vzorek krve (20 ml) bude odebrán 15 minut po intravenózním podání bolusu heparinu (75 U/kg, odůvodnění viz část Riziko) pro analýzu aktivity plazmatické lipázy. Před podáním budou účastníci dotazováni na rodinnou anamnézu poruch srážlivosti nebo osobní kontraindikace včetně použití antikoagulancií, anamnézu abnormalit krvácení nebo modřin nebo jiných onemocnění, alergií nebo nedávné zubní práce. Po podání zůstanou účastníci na klinice 2 hodiny na pozorování. Obdrží také informační list týkající se heparinu a postupu.

Měření endoteliální funkce: Endoteliální funkce bude hodnocena nalačno pomocí prstové reaktivní hyperémie periferní arteriální tonometrie (RH-PAT, Endo-Pat2000, Itamar Medical, Izrael) a vyjádřena jako RH-PAT index. Účastníci budou odpočívat v poloze na zádech v tiché místnosti s kontrolovanou teplotou po dobu 30 minut. před měřením PAT a zdrží se kofeinu po dobu 6 hodin a vody po dobu 2 hodin před testem, podle pokynů výrobce.