Sources de protéines alimentaires et dyslipidémie athérogène

Visites à la clinique :

Les participants se rendront à la clinique 11 fois au total, de la sélection à la fin de l'étude. Cela comprendra des visites hebdomadaires avec le nutritionniste et 9 visites nécessitant des prises de sang (à l'écran et lors de 2 visites consécutives après chaque période diététique). À chaque visite, les participants seront pesés, le tour de taille et de hanche sera mesuré et la tension artérielle sera surveillée. La quantité totale de sang prélevé au cours de l'étude sera de 455 ml.

Visite de dépistage (SV : 1 heure) :

Les recruteurs détermineront d'abord l'admissibilité en examinant un questionnaire de sélection et un entretien téléphonique ou personnel. Si un sujet potentiel est éligible et intéressé, une trousse d'orientation sera envoyée par la poste qui comprendra des informations écrites sur les exigences de l'étude. Les personnes intéressées qui réussissent la présélection seront programmées pour une visite de prélèvement sanguin de dépistage afin de déterminer l'admissibilité finale. Lors de la visite de dépistage (SV), les participants donneront leur consentement éclairé, examineront leurs antécédents médicaux avec une infirmière autorisée et feront mesurer leur tension artérielle, leur poids, leur taille et leur tour de taille et de hanche. Trente ml de sang seront prélevés pour la mesure des triglycérides plasmatiques (TG), du C total, du LDL-C, du HDL-C, du glucose et de la thyréostimuline (TSH). Les femmes en âge de procréer recevront un test de grossesse urinaire à la bêta-gonadotrophine chorionique humaine (b-hCG). Les participants seront contactés dans les 2 semaines pour les informer de leur éligibilité.

Visites d'un nutritionniste (initiale : 1 heure) :

Les participants rencontreront chaque semaine un nutritionniste pour recevoir des conseils, notamment sur la gestion du poids et l'examen du régime alimentaire. Lors de ces réunions, les participants recevront une semaine d'entrées surgelées et d'aliments à l'étude, ainsi que des menus standardisés avec des listes de contrôle. Pendant la période de sevrage (semaines 6 à 8 ; semaines 12 à 14), les sujets continueront à s'abstenir de consommer de l'alcool mais consommeront leur régime alimentaire habituel pendant 14 jours.

Visites post-diète nécessitant des prises de sang (visites A : 1,5 heure, visites B : 2,5 heures) :

Les participants se rendront à la clinique deux jours différents après la fin de chaque régime pour fournir des échantillons de sang. L'échantillonnage en double réduit la variabilité biologique et améliore donc la puissance de l'étude pour détecter des changements significatifs induits par le régime alimentaire dans la mesure. L'avant-dernier jour de chaque régime (visites 1A, 2A, 3A, 4A) une prise de sang à jeun (45 ml) sera effectuée pour les dosages plasmatiques (TG, C total, C-LDL, C-HDL, sous-fractions lipoprotéiques, glycémie , insuline, apolipoprotéines AI, AII, B et CIII et marqueurs inflammatoires). Le dernier jour de chaque période diététique (visites 1B, 2B, 3B, 4B), les participants fourniront un deuxième échantillon de sang à jeun (pour les lipides et les lipoprotéines comme ci-dessus). Les activités de la lipoprotéine lipase et de la lipase hépatique seront également mesurées dans le plasma (20 ml) prélevé 15 minutes après l'héparine intraveineuse (75 unités/kg).

Procédures cliniques :

Mesures cliniques : La tension artérielle sera mesurée 3 fois en position assise et les 2 dernières valeurs seront moyennées. Les mesures anthropométriques comprennent la taille, le poids, le tour de taille et de hanches et le pourcentage de graisse corporelle par bioimpédance (échelle de Tanita). Le tour de taille est mesuré deux fois au niveau de la crête iliaque et le tour de hanche est mesuré au point le plus large des hanches.

Prélèvement sanguin standard : en utilisant les procédures de prélèvement sanguin standard, des échantillons de sang seront prélevés sur les participants après un jeûne de 12 à 14 heures. Le sang sera recueilli dans des tubes contenant la solution de conservation suivante : 3,0 g d'EDTA (dipotassium), 1,7 mg de P-Pack, 0,15 g de sulfate de gentamycine, 0,15 g de chloramphénicol, 5,96 ml d'aprotinine (Sigma A-6279) et 0,30 g d'azoture de sodium. qui sont tous dilués à 20 ml avec de l'eau doublement déminéralisée. Le plasma est séparé par centrifugation immédiate à 4°C. Des mesures de lipides et de lipoprotéines sont effectuées et des aliquotes de plasma sont congelées pour de futures analyses.

Prélèvement sanguin post-héparine : un échantillon de sang (20 ml) sera prélevé 15 minutes après l'administration intraveineuse d'un bolus d'héparine (75 U/kg, voir la section Risques pour la justification) pour l'analyse de l'activité de la lipase plasmatique. Avant l'administration, les participants seront interrogés sur les antécédents familiaux de troubles de la coagulation ou de contre-indications personnelles, y compris l'utilisation d'anticoagulants, des antécédents de saignements ou d'ecchymoses anormales ou d'autres maladies, des allergies ou des travaux dentaires récents. Après l'administration, les participants resteront à la clinique pendant 2 heures sous observation. Ils recevront également une fiche d'information concernant l'héparine et la procédure.

Mesure de la fonction endothéliale : la fonction endothéliale sera évaluée à jeun par tonométrie artérielle périphérique à hyperémie réactive au doigt (RH-PAT, Endo-Pat2000, Itamar Medical, Israël) et exprimée sous forme d'indice RH-PAT. Les participants se reposeront en position couchée dans une pièce calme à température contrôlée pendant 30 min. avant les mesures PAT et s'abstiendra de caféine pendant 6 heures et d'eau pendant 2 heures avant le test, conformément aux directives du fabricant.