Fonti proteiche dietetiche e dislipidemia aterogenica

Visite Cliniche:

I partecipanti visiteranno la clinica per un totale di 11 volte dallo schermo al completamento dello studio. Ciò includerà visite settimanali con il nutrizionista e 9 visite che richiedono prelievi di sangue (allo schermo e in 2 visite consecutive dopo ogni periodo dietetico). Ad ogni visita, i partecipanti verranno pesati, verrà misurata la circonferenza della vita e dell'anca e verrà monitorata la pressione sanguigna. La quantità totale di sangue raccolto durante il corso dello studio sarà di 455 ml.

Visita di screening (SV: 1 ora):

I reclutatori determineranno inizialmente l'idoneità attraverso la revisione di un questionario di screening e un colloquio telefonico o personale. Se un potenziale soggetto è idoneo e interessato, verrà inviato un pacchetto di orientamento che includerà informazioni scritte sui requisiti di studio. Le persone interessate che superano il pre-screening saranno programmate per una visita di screening del prelievo di sangue per determinare l'idoneità finale. Alla visita di screening (SV), i partecipanti daranno il consenso informato, esamineranno la loro storia medica con un'infermiera registrata e si faranno misurare la pressione sanguigna, il peso, l'altezza e la circonferenza della vita e dell'anca. Saranno prelevati 30 ml di sangue per la misurazione dei trigliceridi plasmatici (TG), C-totale, LDL-C, HDL-C, glucosio e ormone stimolante la tiroide (TSH). Alle donne in età fertile verrà somministrato un test di gravidanza sulle urine con beta-gonadotropina corionica umana (b-hCG). I partecipanti saranno contattati entro 2 settimane per informarli della loro idoneità.

Visite nutrizioniste (iniziale: 1 ora):

I partecipanti si incontreranno settimanalmente con un nutrizionista per ricevere consulenza, compresa la gestione del peso e la revisione della dieta. A questi incontri, i partecipanti riceveranno una settimana di antipasti surgelati e cibi studiati, oltre a menu standardizzati con liste di controllo. Durante il periodo di washout (settimane 6-8; settimane 12-14), i soggetti continueranno ad astenersi dall'alcol ma consumeranno la loro solita dieta casalinga per 14 giorni.

Visite post-dieta che richiedono prelievi di sangue (visite A: 1,5 ore, visite B: 2,5 ore):

I partecipanti visiteranno la clinica in due giorni separati dopo il completamento di ciascuna dieta per fornire campioni di sangue. Il campionamento duplicato riduce la variabilità biologica e quindi migliora la capacità dello studio di rilevare cambiamenti significativi nella misurazione indotti dalla dieta. Il penultimo giorno di ogni dieta (visite 1A, 2A, 3A, 4A) verrà effettuato un prelievo di sangue a digiuno (45 mL) per le misurazioni del plasma (TG, C-totale, LDL-C, HDL-C, sottofrazioni lipoproteiche, glucosio , insulina, apolipoproteine ​​AI, AII, B e CIII e marcatori infiammatori). L'ultimo giorno di ogni periodo dietetico (visite 1B, 2B, 3B, 4B) i partecipanti forniranno un secondo campione di sangue a digiuno (per lipidi e lipoproteine ​​come sopra). L'attività della lipoproteina lipasi e della lipasi epatica sarà misurata anche nel plasma (20 ml) raccolto 15 minuti dopo l'eparina endovenosa (75 unità/kg).

Procedure cliniche:

Misurazioni cliniche: La pressione sanguigna verrà misurata 3 volte in posizione seduta e gli ultimi 2 valori saranno mediati. Le misurazioni antropometriche includono altezza, peso, circonferenza della vita e dei fianchi e % di grasso corporeo per bioimpedenza (scala Tanita). La circonferenza della vita viene misurata due volte sulla cresta iliaca e la circonferenza dell'anca viene misurata nel punto più largo dei fianchi.

Prelievo di sangue standard: utilizzando le procedure standard di raccolta del sangue, i campioni di sangue verranno raccolti dai partecipanti dopo un digiuno di 12-14 ore. Il sangue verrà raccolto in provette contenenti la seguente soluzione conservante: 3,0 g di EDTA (dipotassio), 1,7 mg di P-Pack, 0,15 g di gentamicina solfato, 0,15 g di cloramfenicolo, 5,96 ml di aprotinina (Sigma A-6279) e 0,30 g di sodio azide il tutto diluito a 20 ml con acqua doppiamente deionizzata. Il plasma viene separato mediante centrifugazione immediata a 4°C. Vengono eseguite le misurazioni dei lipidi e delle lipoproteine ​​e le aliquote di plasma vengono congelate per analisi future.

Prelievo di sangue post-eparina: un campione di sangue (20 ml) verrà prelevato 15 minuti dopo la somministrazione endovenosa di un bolo di eparina (75 U/kg, vedere la sezione Rischio per la giustificazione) per l'analisi dell'attività della lipasi plasmatica. Prima della somministrazione, i partecipanti saranno intervistati per la storia familiare di disturbi della coagulazione o controindicazioni personali compreso l'uso di anticoagulanti, storia di anomalie di sanguinamento o lividi o altre malattie, allergie o recenti interventi dentistici. Dopo la somministrazione, i partecipanti rimarranno in clinica per 2 ore sotto osservazione. Verrà inoltre fornito un foglio informativo relativo all'eparina e alla procedura.

Misurazione della funzione endoteliale: La funzione endoteliale sarà valutata a digiuno mediante tonometria arteriosa periferica con iperemia reattiva delle dita (RH-PAT, Endo-Pat2000, Itamar Medical, Israele) ed espressa come indice RH-PAT. I partecipanti riposeranno in posizione supina in una stanza tranquilla a temperatura controllata per 30 min. prima delle misurazioni PAT e si asterrà dalla caffeina per 6 ore e dall'acqua per 2 ore prima del test, secondo le linee guida del produttore.