Fontes de proteína dietética e dislipidemia aterogênica

Visitas clínicas:

Os participantes visitarão a clínica um total de 11 vezes, desde a triagem até a conclusão do estudo. Isso incluirá visitas semanais com o nutricionista e 9 visitas que requerem coleta de sangue (na triagem e em 2 visitas consecutivas após cada período de dieta). Em cada visita, os participantes serão pesados, as circunferências da cintura e do quadril serão medidas e a pressão arterial será monitorada. A quantidade total de sangue coletado durante o estudo será de 455 mL.

Visita de triagem (SV: 1 hora):

Os recrutadores determinarão inicialmente a elegibilidade por meio da análise de um questionário de triagem e de uma entrevista por telefone ou pessoal. Se um assunto em potencial for elegível e estiver interessado, um pacote de orientação será enviado pelo correio, incluindo informações por escrito sobre os requisitos do estudo. Os indivíduos interessados ​​que passarem na pré-triagem serão agendados para uma visita de coleta de sangue para determinar a elegibilidade final. Na visita de triagem (SV), os participantes darão consentimento informado, revisarão seu histórico médico com uma enfermeira registrada e medirão sua pressão arterial, peso, altura e circunferência da cintura e do quadril. Trinta ml de sangue serão colhidos para dosagem de triglicerídeos (TG) plasmáticos, C-total, LDL-C, HDL-C, glicose e hormônio estimulante da tireoide (TSH). As mulheres com potencial para engravidar farão um teste de gravidez na urina com beta-Gonadotrofina Coriônica Humana (b-hCG). Os participantes serão contatados dentro de 2 semanas para notificá-los de sua elegibilidade.

Visitas ao Nutricionista (Inicial: 1 hora):

Os participantes se encontrarão semanalmente com um nutricionista para receber aconselhamento, incluindo controle de peso e revisão da dieta. Nessas reuniões, os participantes receberão uma semana de entradas congeladas e alimentos de estudo, bem como cardápios padronizados com listas de verificação. Durante o período de washout (semanas 6-8; semanas 12-14), os indivíduos continuarão a se abster de álcool, mas consumirão sua dieta caseira habitual por 14 dias.

Visitas pós-dieta que requerem coleta de sangue (visitas A: 1,5 h, visitas B: 2,5 h):

Os participantes visitarão a clínica em dois dias separados após a conclusão de cada dieta para fornecer amostras de sangue. A amostragem duplicada reduz a variabilidade biológica e, portanto, melhora o poder do estudo para detectar mudanças significativas induzidas pela dieta na medição. No penúltimo dia de cada dieta (visitas 1A, 2A, 3A, 4A) será feita uma coleta de sangue em jejum (45 mL) para dosagens plasmáticas (TG, C total, LDL-C, HDL-C, subfrações de lipoproteínas, glicose , insulina, apolipoproteínas AI, AII, B e CIII e marcadores inflamatórios). No último dia de cada período dietético (visitas 1B, 2B, 3B, 4B), os participantes fornecerão uma segunda amostra de sangue em jejum (para lipídios e lipoproteínas como acima). As atividades da lipoproteína lipase e da lipase hepática também serão medidas no plasma (20mL) coletado 15 minutos após heparina intravenosa (75 unidades/kg).

Procedimentos Clínicos:

Medições clínicas: A pressão arterial será medida 3 vezes na posição sentada e os últimos 2 valores serão calculados. As medidas antropométricas incluem altura, peso, circunferência da cintura e do quadril e % de gordura corporal por bioimpedância (escala Tanita). A circunferência da cintura é medida duas vezes na crista ilíaca e a circunferência do quadril é medida no ponto mais largo dos quadris.

Amostragem de sangue padrão: Usando procedimentos de coleta de sangue padrão, as amostras de sangue serão coletadas dos participantes após um jejum de 12 a 14 horas. O sangue será coletado em tubos contendo a seguinte solução conservante: 3,0 gms EDTA (dipotássio), 1,7 mg P-Pack, 0,15 gms sulfato de gentamicina, 0,15 gms cloranfenicol, 5,96 mls aprotinina (Sigma A-6279) e 0,30 gms azida sódica todos os quais são diluídos para 20mls com água duplamente deionizada. O plasma é separado por centrifugação imediata a 4°C. Medições de lipídios e lipoproteínas são realizadas e alíquotas de plasma são congeladas para análises futuras.

Amostra de sangue pós-heparina: Uma amostra de sangue (20ml) será coletada 15 minutos após a administração intravenosa de um bolus de heparina (75 U/kg, veja a seção de Risco para justificativa) para a análise da atividade da lipase plasmática. Antes da administração, os participantes serão entrevistados quanto ao histórico familiar de distúrbios de coagulação ou contra-indicações pessoais, incluindo uso de anticoagulantes, histórico de sangramento ou hematomas anormalidades ou outras doenças, alergias ou tratamento dentário recente. Após a administração, os participantes permanecerão na clínica por 2 horas sob observação. Eles também receberão uma folha de informações sobre a heparina e o procedimento.

Medição da função endotelial: A função endotelial será avaliada em jejum por tonometria arterial periférica de hiperemia reativa digital (RH-PAT, Endo-Pat2000, Itamar Medical, Israel) e expressa como índice RH-PAT. Os participantes descansarão em decúbito dorsal em uma sala silenciosa e com temperatura controlada por 30 minutos. antes das medições PAT e se absterá de cafeína por 6 horas e de água por 2 horas antes do teste, de acordo com as diretrizes do fabricante.