Dietetyczne źródła białka i aterogenna dyslipidemia

Wizyty w klinice:

Uczestnicy odwiedzą klinikę łącznie 11 razy od ekranu do zakończenia badania. Obejmuje to cotygodniowe wizyty u dietetyka oraz 9 wizyt wymagających pobrania krwi (przy badaniu przesiewowym i 2 kolejne wizyty po każdym okresie diety). Na każdej wizycie uczestnicy będą ważeni, mierzone będą obwód talii i bioder oraz monitorowane będzie ciśnienie krwi. Łączna ilość krwi pobranej w trakcie badania wyniesie 455 ml.

Wizyta przesiewowa (SV: 1 godzina):

Osoby rekrutujące początkowo określą kwalifikowalność poprzez przegląd kwestionariusza przesiewowego oraz rozmowę telefoniczną lub osobistą. Jeśli potencjalny przedmiot kwalifikuje się i jest zainteresowany, zostanie wysłany pakiet orientacyjny, który będzie zawierał pisemne informacje o wymaganiach dotyczących badania. Zainteresowane osoby, które pomyślnie przejdą kontrolę wstępną, zostaną zaplanowane na wizytę przesiewową w celu pobrania krwi w celu ustalenia ostatecznego uprawnienia. Podczas wizyty przesiewowej (SV) uczestnicy wyrażą świadomą zgodę, przejrzą historię choroby z dyplomowaną pielęgniarką i zmierzą ciśnienie krwi, wagę, wzrost oraz obwód talii i bioder. Trzydzieści ml krwi zostanie pobrane do pomiaru trójglicerydów w osoczu (TG), całkowitego C, LDL-C, HDL-C, glukozy i hormonu tyreotropowego (TSH). Kobiety w wieku rozrodczym otrzymają test ciążowy na obecność beta-ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej (b-hCG) w moczu. W ciągu 2 tygodni skontaktujemy się z uczestnikami, aby powiadomić ich o zakwalifikowaniu się.

Wizyty dietetyka (początkowe: 1 godz.):

Uczestnicy będą spotykać się co tydzień z dietetykiem, aby uzyskać poradę, w tym kontrolę wagi i przegląd diety. Na tych spotkaniach uczestnicy otrzymają tygodniowe mrożone przystawki i potrawy do nauki, a także standardowe menu z listami kontrolnymi. Podczas okresu wymywania (tygodnie 6-8; tygodnie 12-14) badani będą nadal powstrzymywać się od alkoholu, ale będą spożywać swoją zwykłą domową dietę przez 14 dni.

Wizyty po diecie wymagające pobrania krwi (wizyty A: 1,5 godz., wizyty B: 2,5 godz.):

Uczestnicy odwiedzą klinikę w dwa oddzielne dni po zakończeniu każdej diety w celu pobrania próbek krwi. Podwójne pobieranie próbek zmniejsza zmienność biologiczną, a tym samym poprawia moc badania w celu wykrycia istotnych zmian w pomiarach wywołanych dietą. W przedostatnim dniu każdej diety (wizyty 1A, 2A, 3A, 4A) zostanie pobrana krew na czczo (45 ml) w celu oznaczenia osocza (TG, C calkowite, LDL-C, HDL-C, podfrakcje lipoprotein, glukoza , insulina, apolipoproteiny AI, AII, B i CIII oraz markery stanu zapalnego). W ostatnim dniu każdego okresu dietetycznego (wizyty 1B, 2B, 3B, 4B) uczestnicy otrzymają drugą próbkę krwi na czczo (dla lipidów i lipoprotein jw.). Aktywność lipazy lipoproteinowej i lipazy wątrobowej będzie również mierzona w osoczu (20 ml) pobranym 15 minut po dożylnym podaniu heparyny (75 jednostek/kg).

Procedury kliniczne:

Pomiary kliniczne: Ciśnienie krwi zostanie zmierzone 3 razy w pozycji siedzącej, a ostatnie 2 wartości zostaną uśrednione. Pomiary antropometryczne obejmują wzrost, wagę, obwód talii i bioder oraz procent tkanki tłuszczowej na podstawie bioimpedancji (skala Tanita). Obwód talii mierzy się dwukrotnie na wysokości grzebienia biodrowego, a obwód bioder mierzy się w najszerszym miejscu bioder.

Standardowe pobieranie krwi: Stosując standardowe procedury pobierania krwi, próbki krwi będą pobierane od uczestników po 12-14 godzinach postu. Krew zostanie pobrana do probówek zawierających następujący roztwór konserwujący: 3,0 g EDTA (dipotas), 1,7 mg P-Pack, 0,15 g siarczanu gentamycyny, 0,15 g chloramfenikolu, 5,96 ml aprotyniny (Sigma A-6279) i 0,30 g azydku sodu z których wszystkie są rozcieńczane do 20 ml wodą podwójnie dejonizowaną. Osocze oddziela się przez natychmiastowe odwirowanie w temperaturze 4°C. Wykonuje się pomiary lipidów i lipoprotein, a porcje osocza zamraża się do przyszłych analiz.

Pobieranie krwi po podaniu heparyny: Próbka krwi (20 ml) zostanie pobrana 15 minut po dożylnym podaniu bolusa heparyny (75 j./kg, patrz uzasadnienie w części dotyczącej ryzyka) w celu analizy aktywności lipazy w osoczu. Przed podaniem, uczestnicy zostaną przesłuchani pod kątem historii zaburzeń krzepnięcia w rodzinie lub osobistych przeciwwskazań, w tym stosowania antykoagulantów, historii krwawień lub nieprawidłowych siniaków lub innych chorób, alergii lub niedawnych zabiegów dentystycznych. Po podaniu uczestnicy pozostaną w klinice przez 2 godziny pod obserwacją. Otrzymają również ulotkę informacyjną dotyczącą heparyny i procedury.

Pomiar funkcji śródbłonka: Czynność śródbłonka będzie oceniana na czczo za pomocą tonometrii tętnic obwodowych z reaktywnym przekrwieniem palca (RH-PAT, Endo-Pat2000, Itamar Medical, Izrael) i wyrażana jako wskaźnik RH-PAT. Uczestnicy będą odpoczywać w pozycji leżącej w cichym pomieszczeniu z kontrolowaną temperaturą przez 30 min. przed pomiarami PAT i powstrzyma się od kofeiny przez 6 godzin i od wody przez 2 godziny przed badaniem, zgodnie z wytycznymi producenta.