Fuentes de proteínas dietéticas y dislipidemia aterogénica

Visitas a la Clínica:

Los participantes visitarán la clínica un total de 11 veces desde la pantalla hasta la finalización del estudio. Esto incluirá visitas semanales con el nutricionista y 9 visitas que requieren extracciones de sangre (en el examen y en 2 visitas consecutivas después de cada período dietético). En cada visita, se pesará a los participantes, se medirá la circunferencia de la cintura y la cadera y se controlará la presión arterial. La cantidad total de sangre recolectada durante el transcurso del estudio será de 455 ml.

Visita de selección (SV: 1 hora):

Los reclutadores determinarán inicialmente la elegibilidad mediante la revisión de un cuestionario de selección y una entrevista telefónica o personal. Si un sujeto potencial es elegible e interesado, se le enviará por correo un paquete de orientación que incluirá información escrita sobre los requisitos del estudio. A las personas interesadas que pasen la preselección se les programará una visita de extracción de sangre para determinar la elegibilidad final. En la visita de selección (SV), los participantes darán su consentimiento informado, revisarán su historial médico con una enfermera registrada y se les medirá la presión arterial, el peso, la altura y la circunferencia de la cintura y la cadera. Se extraerán 30 ml de sangre para la medición de triglicéridos plasmáticos (TG), C-total, LDL-C, HDL-C, glucosa y hormona estimulante de la tiroides (TSH). A las mujeres en edad fértil se les realizará una prueba de embarazo en orina con gonadotropina coriónica humana beta (b-hCG). Los participantes serán contactados dentro de 2 semanas para notificarles su elegibilidad.

Visitas Nutricionista (Inicial: 1 hr):

Los participantes se reunirán semanalmente con un nutricionista para recibir asesoramiento, incluido el control del peso y la revisión de la dieta. En estas reuniones, los participantes recibirán una semana de platos principales congelados y alimentos de estudio, así como menús estandarizados con listas de control. Durante el período de lavado (semanas 6 a 8; semanas 12 a 14), los sujetos seguirán absteniéndose del alcohol, pero seguirán con su dieta casera habitual durante 14 días.

Visitas posteriores a la dieta que requieren extracciones de sangre (visitas A: 1,5 horas, visitas B: 2,5 horas):

Los participantes visitarán la clínica en dos días separados después de completar cada dieta para proporcionar muestras de sangre. El muestreo duplicado reduce la variabilidad biológica y, por lo tanto, mejora el poder del estudio para detectar cambios significativos en la medición inducidos por la dieta. El penúltimo día de cada dieta (visitas 1A, 2A, 3A, 4A) se realizará una extracción de sangre en ayunas (45 mL) para determinaciones plasmáticas (TG, C-total, C-LDL, C-HDL, subfracciones de lipoproteínas, glucosa , insulina, apolipoproteínas AI, AII, B y CIII, y marcadores inflamatorios). El último día de cada período dietético (visitas 1B, 2B, 3B, 4B), los participantes proporcionarán una segunda muestra de sangre en ayunas (para lípidos y lipoproteínas como se indicó anteriormente). Las actividades de lipoproteína lipasa y lipasa hepática también se medirán en plasma (20 ml) recolectado 15 minutos después de la administración de heparina intravenosa (75 unidades/kg).

Procedimientos Clínicos:

Mediciones clínicas: la presión arterial se medirá 3 veces en una posición sentada y los últimos 2 valores se promediarán. Las medidas antropométricas incluyen altura, peso, circunferencia de cintura y cadera y % de grasa corporal por bioimpedancia (escala Tanita). La circunferencia de la cintura se mide dos veces en la cresta ilíaca y la circunferencia de la cadera se mide en el punto más ancho de las caderas.

Muestreo de sangre estándar: utilizando procedimientos estándar de recolección de sangre, se recolectarán muestras de sangre de los participantes después de un ayuno de 12 a 14 horas. La sangre se recogerá en tubos que contengan la siguiente solución conservante: 3,0 g de EDTA (dipotásico), 1,7 mg de P-Pack, 0,15 g de sulfato de gentamicina, 0,15 g de cloranfenicol, 5,96 ml de aprotinina (Sigma A-6279) y 0,30 g de azida sódica. todos los cuales se diluyen a 20 ml con agua doblemente desionizada. El plasma se separa por centrifugación inmediata a 4°C. Se realizan mediciones de lípidos y lipoproteínas y se congelan alícuotas de plasma para futuros análisis.

Muestreo de sangre posterior a la heparina: se extraerá una muestra de sangre (20 ml) 15 minutos después de la administración intravenosa de un bolo de heparina (75 U/kg, consulte la sección Riesgo para obtener la justificación) para el análisis de la actividad de la lipasa plasmática. Antes de la administración, se entrevistará a los participantes en busca de antecedentes familiares de trastornos de la coagulación o contraindicaciones personales, incluido el uso de anticoagulantes, antecedentes de sangrado o hematomas anormales u otras enfermedades, alergias o trabajo dental reciente. Después de la administración, los participantes permanecerán en la clínica durante 2 horas bajo observación. También se les proporcionará una hoja informativa sobre la heparina y el procedimiento.

Medición de la función endotelial: La función endotelial se evaluará en ayunas mediante tonometría arterial periférica con hiperemia reactiva digital (RH-PAT, Endo-Pat2000, Itamar Medical, Israel) y se expresará como índice RH-PAT. Los participantes descansarán en posición supina en una habitación tranquila con temperatura controlada durante 30 minutos. antes de las mediciones de PAT y se abstendrá de cafeína durante 6 horas y de agua durante 2 horas antes de la prueba, según las pautas del fabricante.