Obstrukční spánková apnoe (OSA), hypertenze, β1 podjednotka kanálu Maxi-k+ a kardiovaskulární riziko (OSAS)

Východiska: Několik epidemiologických studií prokázalo, že neléčená OSA s kontinuálním pozitivním tlakem v dýchacích cestách souvisí s vysokou kardiovaskulární morbiditou a mortalitou, protože HTA je nejdůležitější kardiovaskulární morbiditou spojenou s OSA. Tento vztah byl studován na třech úrovních: klinické, subklinické a základní výzkumné nebo molekulární úrovni. U většiny pacientů s diagnózou OSA se vyvinula klinická hypertenze a vzhledem k vysoké prevalenci noční hypertenze u OSA by bylo nezbytné monitorovat krevní tlak během spánku pomocí tohoto zařízení ambulantního monitorování krevního tlaku (ABPM). Pokud jde o endoteliální dysfunkci, která může existovat předtím, než dojde k ireverzibilním vaskulárním změnám v arteriální stěně (subklinická úroveň), bylo hlášeno, že pacienti s OSA mají nižší průtok krve (měřeno arteriální flowmetrií) a po léčbě CPAP dochází ke zlepšení endoteliální funkce. Na úrovni základního výzkumu bylo v předchozích studiích pozorováno, že hypoxie downreguluje expresi podjednotky Maxi-K+ kanálu B1 v buňkách hladkého svalstva a také v periferních leukocytech. Tento kanál se podílí na regulaci arteriální vazodilatace a je podjednotkou β1 odpovědnou za regulaci vaskulárního tonu. Základní výzkumné studie prokázaly vztah mezi hypertenzí a ß1 podjednotkou, popisující, že exprese této jednotky u hypertenzních zvířecích modelů klesá. V pilotní studii u pacientů s OSA bylo navrženo, že kanál ß1 podjednotky Maxi-K+ by mohl hrát důležitou roli při vaskulární dysregulaci těchto pacientů. Byla také popsána korelace mezi hladinou ß1 podjednotky v buňkách hladkého svalstva cév a její hladinou v leukocytech.

Cíl: Popsat vztah mezi OSA a hypertenzí z klinického hlediska (provedením ABPM), jeho vztah k endoteliální dysfunkci (provedením flowmetrie) a na úrovni základního výzkumu (stanovením β1 podjednotky maxi-K kanálu +). Tento vztah mezi hypertenzí a OSA byl hodnocen ve výchozím stavu ve skupině pacientů s OSA a kontrolní skupině bez OSA a po změně patofyziologické role léčby OSA pomocí kontinuálního přetlaku dýchacích cest (CPAP) ve skupině pacientů s OSA.

Pacienti: Prospektivní studie, ve které:

1. - Porovnali jsme 61 pacientů se syndromem spánkové apnoe-hypopnoe a 19 kontrolních subjektů bez OSA.
2. - V souboru 61 pacientů s OSA jsme porovnávali výsledky před a po třech měsících správné léčby CPAP.

Měření:

1. - Respirační polygrafie
2. - Ambulantní monitorování krevního tlaku
3. - Endoteliální dysfunkce stanovením hyperemické odpovědi na ischemii pomocí laserového-Dopplerova průtokoměru.
4. - Exprese podjednotky ß1en v leukocytech periferní krve.

Tyto postupy jsou popsány níže:

1. - Respirační polygrafie:

   -Noční kardiorespirační polygrafie byla provedena ve "spánkové laboratoři Léčebně-chirurgické jednotky respiračních nemocí". Použil dýchací polygraf "Sibelhome plus" (obchodní název).

   Měřili jsme následující proměnné:

   • Oronasální tok.
   • Chrápání: pomocí laryngotracheálního mikrofonu.
   • Thoracoabdominal-Effort: pomocí dvou pásových senzorů síly umístěných na úrovni hrudníku a břicha.
   • Arteriální saturace kyslíkem (SaO2): Flexibilní digitální pulzní oxymetr.
   • Snímač polohy těla.

   Záznamy jsou uloženy ve specifické databázi a analýza byla provedena ručně. Události jsou definovány

   • Apnoe: nepřítomnost oronazálního proudění vzduchu po dobu ≥ 10 sekund.
   • Hypopnoe: pokles oronazálního průtoku ≥ 50 % od výchozí hodnoty po dobu ≥ 10 sekund, doprovázený desaturací.

   Vypočítali jsme následující parametry:

   • AHI: celkový počet apnoe + hypopnoe / hodinová kontrola. Když je AHI < 5, byla považována za negativní na OSA a když AHI BYLA ≥ 15, byla stanovena diagnóza OSA.
   • Desaturační index (DI): celkový počet desaturací / hodinová kontrola.
   • Bazální a minimální saturace: automatická analýza získaná oxymetrií v celém záznamu.
   • Procento doby záznamu se SaO2 <90 % (CT90): automatická analýza získaná oxymetrií v celém záznamu.

2. - Ambulantní monitorování krevního tlaku: Přístroj měří krevní tlak automaticky každých 20 minut po dobu 24 hodin. Záznamy byly pořizovány ve všední den a pokud pacient pracoval na směny, byly pořizovány v době, kdy pacienti nepracovali v noci.

   Shromáždili jsme následující proměnné:

   • 24hodinový systolický a diastolický krevní tlak.
   • Střední krevní tlak ve dne i v noci.
   • Standardní odchylka denního a nočního krevního tlaku.
   • Procento vysoké měřené po dobu 24 hodin a během období aktivity a odpočinku.
   • Variabilita TK (směrodatná odchylka průměru).
   • 24hodinová střední tepová frekvence.
   • Průměrná srdeční frekvence ve dne.
   • Noc Průměrná tepová frekvence.

3. - Endoteliální dysfunkce stanovením hyperemické odpovědi na ischemii za použití laserového-Dopplerova průtokoměru: Subjekt ležel na lůžku a zůstal v klidu 15-20 minut. Na paži bylo umístěno měření krevního tlaku manžety (nenafouknuté) a laserový dopplerovský přístroj na předloktí. Během 15 minut systém změřil bazální situaci a poté manžeta během 4 minut rychle nabobtnala nad 20 mmHg systolického krevního tlaku. Během tohoto období monitor systému ukazoval perfuzní jednotky a na konci tohoto období byla manžeta náhle vypuštěna a monitor odhalil vzestup nad preischemii v perfuzních jednotkách.

   Software provedl dva typy analýz:

   • Obecná analýza: kde je uvedena počáteční hodnota, maximální hodnota, procentuální změna od první k poslední hodnotě nebo maximální sklon křivky nebo sklon a plocha pod křivkou.
   • Upravená analýza: Byla odhadnuta biologická nula, maximální průtok, plocha hyperémie, doba do maximální hyperémie, doba do dosažení poloviny maximální hyperémie a latence.
4. - Exprese ß1 podjednotky v leukocytech periferní krve: Provedení úrovně exprese β1 podjednotky Maxi-K + kanálu v leukocytech periferní krve. Extrakce celkové RNA z leukocytů podle instrukcí QIAamp RNA Blood Mini kit.

Z těchto buněk byla stanovena hladina exprese podjednotky p1 kvantitativní RT-PCR technikou. Pro reverzní transkripci RNA pomocí Superscript III First-kit Starnd Synthesis System (obchodní název). Pro kvantitativní PCR jsme použili zařízení ABI PRISM 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems), s použitím reagencií Sybr Green PCR Master Mix nebo TaqMan, podle protokolů uvedených výrobcem.