Apnea Obstructiva del Sueño (AOS), Hipertensión, Subunidad β1 del Canal Maxi-k+ y Riesgo Cardiovascular (OSAS)

Antecedentes: Varios estudios epidemiológicos han demostrado que la AOS no tratada con presión positiva continua en las vías respiratorias está relacionada con altas tasas de morbilidad y mortalidad cardiovascular, siendo la HTA la morbilidad cardiovascular más importante asociada con la AOS. Esta relación ha sido estudiada a tres niveles: clínico, subclínico y de investigación básica o molecular. La mayoría de los pacientes con diagnóstico de AOS han desarrollado hipertensión clínica y, dada la alta prevalencia de hipertensión nocturna en AOS, sería fundamental la monitorización de la presión arterial durante el sueño, utilizando este dispositivo de monitorización ambulatoria de la presión arterial (MAPA). Con respecto a la disfunción endotelial, que puede existir antes de que se hayan producido cambios vasculares irreversibles en la pared arterial (nivel subclínico), se ha informado que los pacientes con AOS tienen un flujo sanguíneo más bajo (medido por flujometría arterial) y después del tratamiento con CPAP, hay una mejoría en función endotelial. A nivel de investigación básica, en estudios previos se ha observado que la hipoxia regula a la baja la expresión de la subunidad B1 del canal Maxi-K+ en las células del músculo liso y también en los leucocitos periféricos. Este canal está involucrado en la regulación de la vasodilatación arterial, siendo la subunidad β1 la responsable de la regulación del tono vascular. Estudios de investigación básica han demostrado la relación entre la hipertensión y la subunidad ß1, describiendo que la expresión de esa unidad disminuye en modelos animales hipertensos. En un estudio piloto en pacientes con AOS se sugirió que la subunidad ß1 del canal Maxi-K+ podría desempeñar un papel importante en la desregulación vascular de estos pacientes. También se ha descrito una correlación entre el nivel de la subunidad ß1 en las células del músculo liso vascular y su nivel en los leucocitos.

Objetivo: Describir la relación entre AOS e hipertensión desde el punto de vista clínico (mediante la realización de MAPA), su relación con la disfunción endotelial (mediante la realización de una flujometría) y nivel de investigación básica (mediante la determinación de la subunidad β1 del canal maxi-K +). Esta relación entre la hipertensión y la AOS se evaluó en condiciones basales en un grupo de pacientes con AOS y un grupo de control sin AOS, y después de cambiar el papel fisiopatológico del tratamiento de la AOS con presión positiva continua (CPAP) en el grupo de pacientes con AOS.

Pacientes: Estudio prospectivo en el que:

1. - Comparamos 61 pacientes con síndrome de apnea-hipopnea del sueño y 19 sujetos control sin AOS.
2. - En el grupo de 61 pacientes con AOS: comparamos los resultados antes y después de tres meses de tratamiento correcto con CPAP.

Mediciones:

1. - Poligrafía Respiratoria
2. - Monitoreo ambulatorio de la presión arterial
3. - Disfunción endotelial, mediante la determinación de la respuesta hiperémica a la isquemia mediante un flujómetro Láser-Doppler.
4. - Expresión de la subunidad ß1en en leucocitos de sangre periférica.

Estos procedimientos se describen a continuación:

1. - Poligrafía Respiratoria:

   -Se realizó poligrafía cardiorrespiratoria nocturna en el “laboratorio del sueño de la Unidad Médico-Quirúrgica de Enfermedades Respiratorias”. Se ha utilizado un polígrafo respiratorio “Sibelhome plus” (nombre comercial).

   Medimos las siguientes variables:

   • Flujo Oronasal.
   • Ronquido: mediante micrófono laringotraqueal.
   • Toracoabdominal-Esfuerzo: mediante dos bandas sensores de esfuerzo colocadas a nivel del tórax y abdomen.
   • Saturación arterial de oxígeno (SaO2): Oxímetro de pulso digital flexible.
   • Sensor de posición del cuerpo.

   Los registros se almacenan en una base de datos específica y el análisis se realizó manualmente. Los eventos se definen

   • Apnea: ausencia de flujo aéreo oronasal durante ≥ 10 seg.
   • Hipopnea: disminución del flujo oronasal ≥ 50 % desde el inicio durante ≥ 10 segundos, acompañada de desaturación.

   Calculamos los siguientes parámetros:

   • IAH: número total de apneas + hipopneas/hora de control. Cuando el AHI es < 5 se consideró negativo para AOS y cuando el AHI FUE ≥ 15, se hizo el diagnóstico de AOS.
   • Índice de desaturación (DI): número total de desaturaciones/hora de control.
   • Basal y mínima-Saturación: análisis automático de la oximetría obtenida a lo largo de todo el registro.
   • Porcentaje de tiempo de registro con SaO2 < 90% (CT90): análisis automático obtenido por oximetría a lo largo de todo el registro.

2. - Monitoreo Ambulatorio de Presión Arterial: El dispositivo mide la presión arterial automáticamente cada 20 minutos durante 24 horas. Los registros se obtuvieron en un día laborable y cuando el paciente trabajaba por turnos, se hacía cuando los pacientes no trabajaban de noche.

   Recolectamos las siguientes variables:

   • Presión arterial sistólica y diastólica de 24 horas.
   • Presión arterial media de día y de noche.
   • Desviación estándar de la presión arterial diurna y nocturna.
   • Porcentaje de alta medido durante 24 horas, y durante periodos de actividad y descanso.
   • Variabilidad de la PA (desviación estándar de la media).
   • Frecuencia cardíaca media de 24 horas.
   • Frecuencia cardíaca media durante el día.
   • Frecuencia cardíaca media nocturna.

3. - Disfunción endotelial, mediante la determinación de la respuesta hiperémica a la isquemia mediante un flujómetro Láser-Doppler: El sujeto se tumbó en la cama y se mantuvo quieto 15-20 minutos. Se colocó un manguito para medir la presión arterial (sin inflar) en el brazo y un dispositivo láser-Doppler en el antebrazo. Durante 15 minutos, el sistema midió la situación basal y luego el manguito se hinchó rápidamente a más de 20 mmHg de la presión arterial sistólica durante 4 minutos. Durante este período, el monitor del sistema mostró unidades de perfusión y, al final de este período, el manguito se desinfló repentinamente y el monitor reveló un aumento por encima de la preisquemia en las unidades de perfusión.

   El software realizó dos tipos de análisis:

   • Análisis general: donde se reporta el valor inicial, valor máximo, cambio porcentual del primer al último valor o pendiente máxima de la curva o pendiente y área bajo la curva.
   • Análisis Ajustado: Se estimó cero biológico, pico de flujo, área de hiperemia, tiempo hasta la hiperemia máxima, tiempo hasta la mitad de la hiperemia máxima y latencia.
4. - Expresión de la subunidad ß1 en leucocitos de sangre periférica: Realización del nivel de expresión de la subunidad β1 del canal Maxi-K+ en leucocitos de sangre periférica. Extracción de ARN total de leucocitos siguiendo las instrucciones del kit QIAamp RNA Blood Mini.

A partir de estas células se realizó el nivel de expresión de la subunidad β1 mediante la técnica de RT-PCR cuantitativa. Para la transcripción inversa de ARN usando el Superscript III First-kit Starnd Synthesis System (nombre comercial). Para la PCR cuantitativa se utilizó el equipo ABI PRISM 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems), utilizando los reactivos Sybr Green PCR Master Mix o sondas TaqMan, siguiendo los protocolos indicados por el fabricante.