Apnea ostruttiva del sonno (OSA), ipertensione, subunità β1 del canale Maxi-k+ e rischio cardiovascolare (OSAS)

Sfondo: Diversi studi epidemiologici hanno dimostrato che l'OSA non trattata con pressione positiva continua delle vie aeree è correlata ad alti tassi di morbilità e mortalità cardiovascolare, essendo l'HTA la più importante morbilità cardiovascolare associata all'OSA. Questa relazione è stata studiata a tre livelli: clinico, subclinico e di ricerca di base o livello molecolare. La maggior parte dei pazienti con diagnosi di OSA ha sviluppato ipertensione clinica e, a causa dell'elevata prevalenza di ipertensione notturna nell'OSA, sarebbe fondamentale monitorare la pressione arteriosa durante il sonno, utilizzando questo dispositivo di monitoraggio ambulatoriale della pressione arteriosa (ABPM). Per quanto riguarda la disfunzione endoteliale, che può esistere prima che si verifichino cambiamenti vascolari irreversibili nella parete arteriosa (livello subclinico), è stato riportato che i pazienti con OSA hanno un flusso sanguigno inferiore (misurato mediante flussimetria arteriosa) e dopo il trattamento con CPAP, vi è un miglioramento della funzione endoteliale. A livello di ricerca di base, in studi precedenti è stato osservato che l'ipossia down regola l'espressione della subunità B1 del canale Maxi-K+ nelle cellule muscolari lisce e anche nei leucociti periferici. Questo canale è coinvolto nella regolazione della vasodilatazione arteriosa, essendo la subunità β1 responsabile della regolazione del tono vascolare. Studi di ricerca di base hanno dimostrato la relazione tra ipertensione e subunità ß1, descrivendo che l'espressione di tale unità diminuisce nei modelli animali ipertesi. In uno studio pilota su pazienti con OSA è stato suggerito che il canale della subunità ß1 Maxi-K+ potrebbe svolgere un ruolo importante nella disregolazione vascolare di questi pazienti. È stata anche descritta una correlazione tra il livello della subunità ß1 nelle cellule muscolari lisce vascolari e il suo livello nei leucociti.

Obiettivo: Descrivere la relazione tra OSAS e ipertensione da un punto di vista clinico (eseguendo ABPM), la sua relazione con la disfunzione endoteliale (eseguendo una flussimetria) e il livello di ricerca di base (mediante la determinazione della subunità β1 del canale maxi-K +). Questa relazione tra ipertensione e OSA è stata valutata in condizioni basali in un gruppo di pazienti con OSA e in un gruppo di controllo senza OSA, e dopo aver modificato il ruolo fisiopatologico del trattamento dell'OSA con il trattamento delle vie aeree a pressione positiva continua (CPAP) nel gruppo di pazienti con OSA.

Pazienti: studio prospettico in cui:

1. - Abbiamo confrontato 61 pazienti con sindrome da apnea-ipopnea notturna e 19 soggetti di controllo senza OSA.
2. - Nel gruppo di 61 pazienti con OSA: abbiamo confrontato i risultati prima e dopo tre mesi di trattamento corretto con CPAP.

Misure:

1. - Poligrafia respiratoria
2. - Monitoraggio ambulatoriale della pressione arteriosa
3. - Disfunzione endoteliale, mediante determinazione della risposta iperemica all'ischemia mediante flussimetro Laser-Doppler.
4. - Espressione della subunità ß1en nei leucociti del sangue periferico.

Queste procedure sono descritte di seguito:

1. - Poligrafia respiratoria:

   -La poligrafia cardiorespiratoria notturna è stata eseguita presso il "Laboratorio del sonno dell'Unità Medico-Chirurgica di Malattie Respiratorie". Ha utilizzato un poligrafo respiratorio "Sibelhome plus" (nome commerciale).

   Abbiamo misurato le seguenti variabili:

   • Flusso oronasale.
   • Russare: utilizzando il microfono laringotracheale.
   • Toracoaddominale-Sforzo: mediante due fasce sensori di sforzo poste a livello del torace e dell'addome.
   • Saturazione arteriosa dell'ossigeno (SaO2): pulsossimetro digitale flessibile.
   • Sensore di posizione del corpo.

   Le registrazioni sono conservate in un apposito database e l'analisi è stata effettuata manualmente. Gli eventi sono definiti

   • Apnea: assenza di flusso d'aria oronasale per ≥ 10 sec.
   • Ipopnea: diminuzione del flusso oronasale ≥ 50% rispetto al basale per ≥ 10 secondi, accompagnata da desaturazione.

   Abbiamo calcolato i seguenti parametri:

   • AHI: numero totale di apnea + ipopnea/ora di controllo. Quando l'AHI è <5 è stato considerato negativo per OSA e quando l'AHI era ≥ 15, è stata fatta la diagnosi di OSA.
   • Indice di desaturazione (DI): numero totale di desaturazioni/controllo orario.
   • Basale e minimo-saturazione: analisi automatica ottenuta ossimetria durante l'intero record.
   • Percentuale di tempo di registrazione con SaO2 <90% (CT90): analisi automatica ottenuta ossimetria durante l'intero record.

2. - Monitoraggio ambulatoriale della pressione sanguigna: il dispositivo misura automaticamente la pressione sanguigna ogni 20 minuti per 24 ore. Le registrazioni sono state ottenute in un giorno feriale e quando il paziente lavorava a turni, è stato fatto quando i pazienti non lavoravano di notte.

   Abbiamo raccolto le seguenti variabili:

   • Pressione arteriosa sistolica e diastolica nelle 24 ore.
   • Pressione sanguigna media di giorno e di notte.
   • Deviazione standard della pressione arteriosa diurna e notturna.
   • Percentuale di alta misurata per 24 ore e durante i periodi di attività e riposo.
   • Variabilità della PA (deviazione standard della media).
   • Frequenza cardiaca media nelle 24 ore.
   • Frequenza cardiaca media durante il giorno.
   • Frequenza cardiaca media notturna.

3. - Disfunzione endoteliale, determinando la risposta iperemica all'ischemia utilizzando un flussometro Laser-Doppler: Il soggetto giaceva sul letto e rimaneva tranquillo 15-20 minuti. Una misurazione della pressione sanguigna del bracciale (non gonfiata) è stata posizionata sul braccio e un dispositivo laser-Doppler nell'avambraccio. Durante 15 minuti il ​​sistema ha misurato la situazione basale e successivamente il bracciale si è gonfiato rapidamente oltre i 20 mmHg della pressione arteriosa sistolica per 4 minuti. Durante questo periodo il monitor del sistema ha mostrato le unità di perfusione e alla fine di questo periodo il bracciale è stato improvvisamente sgonfiato e il monitor ha rivelato un aumento al di sopra della pre-ischemia nelle unità di perfusione.

   Il software ha eseguito due tipi di analisi:

   • Analisi generale: dove riportato il valore iniziale, il valore massimo, la variazione percentuale dal primo all'ultimo valore o pendenza massima della curva o pendenza e area sotto la curva.
   • Analisi aggiustata: è stato stimato lo zero biologico, il picco di flusso, l'area di iperemia, il tempo al massimo dell'iperemia, il tempo per raggiungere l'iperemia semimassimale e la latenza.
4. - Espressione della subunità ß1 nei leucociti del sangue periferico: Esecuzione del livello della subunità β1 dell'espressione del canale Maxi-K + nei leucociti del sangue periferico. Estrazione dell'RNA totale dai leucociti seguendo le istruzioni QIAamp RNA Blood Mini kit.

Da queste cellule è stato eseguito il livello di espressione della subunità β1 mediante tecnica RT-PCR quantitativa. Per la trascrizione inversa dell'RNA utilizzando il sistema di sintesi Starnd Superscript III First-kit (nome commerciale). Per la PCR quantitativa abbiamo utilizzato l'apparecchiatura ABI PRISM 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems), utilizzando i reagenti Sybr Green PCR Master Mix o le sonde TaqMan, seguendo i protocolli indicati dal produttore.