Apneia Obstrutiva do Sono (AOS), Hipertensão, Subunidade β1 do Canal Maxi-k+ e Risco Cardiovascular (OSAS)

Introdução: Vários estudos epidemiológicos demonstraram que a AOS não tratada com pressão positiva contínua nas vias aéreas está relacionada a altas taxas de morbidade e mortalidade cardiovascular, sendo a HTA a morbidade cardiovascular mais importante associada à AOS. Esta relação tem sido estudada em três níveis: clínico, subclínico e a pesquisa básica ou nível molecular. A maioria dos pacientes com diagnóstico de AOS desenvolveu hipertensão clínica e, devido à alta prevalência de hipertensão noturna na AOS, seria essencial monitorar a pressão arterial durante o sono, usando este dispositivo de monitoramento ambulatorial da pressão arterial (MAPA). Em relação à disfunção endotelial, que pode existir antes que ocorram alterações vasculares irreversíveis na parede arterial (nível subclínico), foi relatado que pacientes com AOS apresentam menor fluxo sanguíneo (medido por fluxometria arterial) e após o tratamento com CPAP, há melhora no função endotelial. No nível de pesquisa básica, em estudos anteriores, observou-se que a hipóxia regula negativamente a expressão da subunidade B1 do Canal Maxi-K+ em células musculares lisas e também em leucócitos periféricos. Este canal está envolvido na regulação da vasodilatação arterial, sendo a subunidade β1 responsável pela regulação do tônus ​​vascular. Estudos de pesquisa básica têm mostrado a relação entre hipertensão e subunidade ß1, descrevendo que a expressão dessa unidade diminui em modelos animais hipertensos. Em um estudo piloto em pacientes com AOS, foi sugerido que o canal da subunidade ß1 Maxi-K + poderia desempenhar um papel importante na desregulação vascular desses pacientes. Também foi descrita uma correlação entre o nível da subunidade ß1 em células musculares lisas vasculares e seu nível em leucócitos.

Objetivo: Descrever a relação entre AOS e hipertensão do ponto de vista clínico (pela realização da MAPA), sua relação com a disfunção endotelial (pela fluxometria) e nível de pesquisa básica (pela determinação da subunidade β1 do canal maxi-K +). Esta relação entre hipertensão e AOS foi avaliada na condição basal em um grupo de pacientes com AOS e um grupo controle sem AOS, e após a mudança do papel fisiopatológico da AOS tratando com pressão positiva contínua nas vias aéreas (CPAP) no grupo de pacientes com AOS.

Pacientes: Estudo prospectivo em que:

1. - Comparamos 61 pacientes com síndrome de apnéia-hipopnéia do sono e 19 controles sem AOS.
2. - No grupo de 61 pacientes com AOS: comparamos os resultados antes e após três meses de tratamento correto com CPAP.

Medidas:

1. - Poligrafia Respiratória
2. - Monitorização Ambulatorial da Pressão Arterial
3. - Disfunção endotelial, determinando a resposta hiperêmica à isquemia usando um medidor de fluxo Laser-Doppler.
4. - Expressão da subunidade ß1en em leucócitos do sangue periférico.

Esses procedimentos são descritos a seguir:

1. - Poligrafia Respiratória:

   - A poligrafia cardiorrespiratória noturna foi realizada no "laboratório do sono da Unidade Médico-Cirúrgica de Doenças Respiratórias". Foi utilizado um polígrafo respiratório "Sibelhome plus" (nome comercial).

   Medimos as seguintes variáveis:

   • Fluxo oronasal.
   • Ronco: usando microfone laringotraqueal.
   • Toracoabdominal-Esforço: por duas bandas sensores de esforço colocados ao nível do tórax e abdome.
   • Saturação arterial de oxigênio (SaO2): Oxímetro de pulso digital flexível.
   • Sensor de posição do corpo.

   Os registros são armazenados em um banco de dados específico e a análise foi realizada manualmente. Os eventos são definidos

   • Apnéia: ausência de fluxo aéreo oronasal por ≥ 10 seg.
   • Hipopneia: diminuição do fluxo oronasal ≥ 50% da linha de base por ≥ 10 segundos, acompanhada de dessaturação.

   Calculamos os seguintes parâmetros:

   • IAH: número total de apnéias + hipopnéias/hora de checagem. Quando IAH < 5 foi considerado negativo para AOS e quando IAH ≥ 15, o diagnóstico de AOS foi feito.
   • Índice de dessaturação (DI): número total de dessaturações/hora de verificação.
   • Saturação basal e mínima: análise automática obtida da oximetria ao longo de todo o registro.
   • Porcentagem do tempo de registro com SaO2 <90% (CT90): análise automática obtida da oximetria durante todo o registro.

2. - Monitorização Ambulatorial da Pressão Arterial: O dispositivo mede a pressão arterial automaticamente a cada 20 minutos durante 24 horas. Os registros foram obtidos em um dia de semana e quando o paciente trabalhava em turnos, era feito quando os pacientes não trabalhavam à noite.

   Coletamos as seguintes variáveis:

   • Pressão arterial sistólica e diastólica de 24 horas.
   • Pressão arterial média durante o dia e a noite.
   • Desvio padrão da pressão arterial diurna e noturna.
   • Porcentagem de alta medida por 24 horas, e durante os períodos de atividade e descanso.
   • Variabilidade da PA (desvio padrão da média).
   • Frequência cardíaca média de 24 horas.
   • Frequência cardíaca média diurna.
   • Frequência cardíaca média noturna.

3. - Disfunção endotelial, determinando a resposta hiperêmica à isquemia usando um medidor de fluxo Laser-Doppler: O sujeito deitou na cama e ficou quieto por 15-20 minutos. Um manguito de pressão arterial (não inflado) foi colocado no braço e um aparelho de laser-Doppler no antebraço. Durante 15 minutos o sistema mediu a situação basal e após isso o manguito inchou rapidamente acima de 20mmHg da pressão arterial sistólica durante 4 minutos. Durante esse período, o monitor do sistema mostrou unidades de perfusão e, ao final desse período, o manguito foi repentinamente desinsuflado e o monitor revelou uma elevação acima da pré-isquemia em unidades de perfusão.

   O software realizou dois tipos de análise:

   • Análise geral: onde informado o valor inicial, valor máximo, variação percentual do primeiro ao último valor ou inclinação máxima da curva ou inclinação e área sob a curva.
   • Análise Ajustada: Foram estimados zero biológico, pico de fluxo, área de hiperemia, tempo para hiperemia máxima, tempo para atingir a metade da hiperemia máxima e latência.
4. - Expressão da subunidade ß1 em leucócitos de sangue periférico: Realizando o nível de expressão da subunidade β1 do canal Maxi-K+ em leucócitos de sangue periférico. Extração de RNA total de leucócitos seguindo as instruções QIAamp RNA Blood Mini kit.

A partir dessas células foi realizado o nível de expressão da subunidade β1 pela técnica quantitativa de RT-PCR. Para transcrição reversa de RNA usando o Sistema de Síntese Starnd Superscript III First-kit (nome comercial). Para PCR quantitativo foi utilizado o equipamento ABI PRISM 7500 Sequence Detection System (Applied Biosystems), utilizando os reagentes Sybr Green PCR Master Mix ou sondas TaqMan, seguindo os protocolos indicados pelo fabricante.