Role nezralých myeloidních buněk, monocytů, dentritických buněk a neutrofilů v lidských těhotenstvích jako markery zralého těhotenství a spontánního porodu

Hromadné důkazy naznačují, že mechanismy proliferativní, invazivní a imunitní tolerance, které zhoubné nádory používají k zajištění zásobování živinami a vyhýbání se nebo úpravě imunitní odpovědi hostitele, jsou podobné těm, které používá vyvíjející se placenta během normálního těhotenství. Kromě sdílené kapacity pro invazi přes normální tkáně vytvářejí jak rakovinné buňky, tak buňky vyvíjející se placenty mikroprostředí podporující jak imunologické privilegium, tak angiogenezi.

Buňky CD11b+Gr1+ jsou heterogenní populací buněk derivovaných z kostní dřeně (BMDC), které se skládají z nezralých myeloidních buněk (IMC), a byly poprvé popsány jako supresorové buňky derivované z myeloidů. U zdravých jedinců se IMC, které se tvoří v kostní dřeni, diferencují na zralé granulocyty, makrofágy nebo dendritické buňky (DC). Ukázalo se, že tyto buňky hrají zásadní roli při zprostředkování imunitní suprese u zvířecích modelů lidských nádorů. V důsledku nádorem vyvolaných změn myelopoézy byly IMC nalezeny v periferní krvi, lymfoidních orgánech a samotné nádorové tkáni. Zvýšená populace IMC byla identifikována u pacientů s několika typy nádorů. V souladu s tím IMC detekované v periferní krvi takových pacientů nesoucích exprimující běžný myeloidní marker CD33, ale postrádající markery zralých myeloidních buněk, jako je molekula MHC II. třídy HLADR.

Ukázalo se, že IMC aktivně podporují růst nádoru a metastázy modulací cytokinového prostředí a prostřednictvím vaskulární remodelace podporou angiogeneze.

V naší laboratoři bylo prokázáno, že IMC infiltrují placenty březích myší a aktivně podporují angiogenezi. Tyto buňky vykazují nápadnou podobnost s IMC, které osídlují maligní nádory. V souladu s tím jsou lidské placenty také infiltrovány významnou populací IMC. Imunologické barvení lidských placent ukázalo, že IMC tvoří přibližně 25 % (rozmezí 10-40 %) z celkových placentárních CD45+ hematopoetických buněk odvozených z kostní dřeně a že tato populace se nachází v blízkosti krevních kapilár. Výzkumníci také prokázali, že nezralé DC, buňky původně popsané pro regulaci adaptivní imunitní reakce, také podporují angiogenezi v modelech choroidální neovaskularizace, endometriózy a nádorů.

Cílem této navrhované studie je porovnat množství IMC, DC, monocytů a neutrofilů ve vzorcích krve normálních těhotenství: 1. u žen v termínu aktivního porodu. 2. U žen, které nerodí. 3. V předčasném porodu.

Podle našich předchozích zjištění vědci předpokládají, že IMC, monocyty a při aktivním porodu (jak v termínu, tak před termínem) budou nižší než u žen bez známek porodu. Výzkumníci také předpokládají, že DC a neutrofily budou hojnější při aktivním porodu (v termínu a před termínem) než ženy bez známek porodu.

Experimentální plán:

Krevní obraz bude odebrán těhotným ženám, které souhlasí s účastí ve výzkumu:

Vzorky budou odeslány na rutinní kompletní krevní obraz v hematologické laboratoři Hillel Yaffe a také budou analyzovány na populaci IMC a DC v naší laboratoři pomocí fluorescenčního imunobarvení se specifickými monoklonálními protilátkami a průtokovou cytometrií.

IMC na celkové CD45 pozitivní hematopoetické buňky z placentární tkáně budou analyzovány pomocí fluorescenčního imunobarvení se specifickými monoklonálními protilátkami a průtokovou cytometrií. Specifické umístění těchto buněk v placentě bude identifikováno v placentární tkáni pomocí imunohistochemie (IHC). Exprese proangiogenních genů bude analyzována pomocí RT PCR a Western blottingu.