Rola niedojrzałych komórek szpikowych, monocytów, komórek dentrytycznych i neutrofili w ciążach ludzkich jako markerów ciąży dojrzałej i porodu spontanicznego

Zgromadzone dowody sugerują, że mechanizmy proliferacyjne, inwazyjne i tolerancji immunologicznej, które wykorzystują nowotwory złośliwe do zapewnienia zaopatrzenia w składniki odżywcze i unikania lub modyfikowania odpowiedzi immunologicznej gospodarza, są podobne do tych stosowanych przez rozwijające się łożysko podczas normalnej ciąży. Oprócz wspólnej zdolności do inwazji przez zdrowe tkanki, zarówno komórki rakowe, jak i komórki rozwijającego się łożyska tworzą mikrośrodowisko wspierające zarówno przywilej immunologiczny, jak i angiogenezę.

Komórki CD11b + Gr1 + są heterogenną populacją komórek pochodzących ze szpiku kostnego (BMDC), które składają się z niedojrzałych komórek szpiku (IMC) i zostały po raz pierwszy opisane jako komórki supresorowe pochodzące ze szpiku. U zdrowych osób IMC, które są generowane w szpiku kostnym, różnicują się w dojrzałe granulocyty, makrofagi lub komórki dendrytyczne (DC). Wykazano, że komórki te odgrywają zasadniczą rolę w pośredniczeniu w supresji immunologicznej w zwierzęcych modelach ludzkich nowotworów. W wyniku wywołanych przez nowotwór zmian w mielopoezie, IMC znaleziono we krwi obwodowej, narządach limfatycznych i samej tkance nowotworowej. Zwiększoną populację IMC zidentyfikowano u pacjentów z kilkoma typami nowotworów. Odpowiednio, IMC wykryte we krwi obwodowej takich pacjentów wykazujących ekspresję wspólnego markera mieloidalnego CD33, ale brakuje im markerów dojrzałych komórek mieloidalnych, takich jak cząsteczka MHC klasy II HLADR.

Wykazano, że IMC aktywnie promują wzrost guza i przerzuty poprzez modulację środowiska cytokin i poprzez przebudowę naczyń poprzez promowanie angiogenezy.

W naszym laboratorium wykazano, że IMC infiltrują łożyska ciężarnych myszy i aktywnie promują angiogenezę. Komórki te wykazują uderzające podobieństwo do IMC, które zasiedlają nowotwory złośliwe. W związku z tym ludzkie łożyska są również infiltrowane przez znaczną populację IMC. Immunobarwienie ludzkich łożysk wykazało, że IMC stanowią około 25% (zakres 10-40%) wszystkich łożyskowych komórek krwiotwórczych CD45+ pochodzących ze szpiku kostnego i że ta populacja jest zlokalizowana blisko naczyń włosowatych. Badacze wykazali również, że niedojrzałe DC, komórki pierwotnie opisane jako regulujące adaptacyjną odpowiedź immunologiczną, również promują angiogenezę w modelach neowaskularyzacji naczyniówkowej, endometriozy i guzów.

Celem tego proponowanego badania jest porównanie liczebności IMC, DC, monocytów i neutrofilów w próbkach krwi kobiet w ciąży prawidłowej: 1. u kobiet donoszonych, czynnych. 2. U kobiet niepracujących. 3. W porodzie przedwczesnym.

Zgodnie z naszymi wcześniejszymi ustaleniami badacze postawili hipotezę, że IMC, monocyty i poród aktywny (zarówno o czasie, jak i przedwcześnie) będą niższe niż u kobiet bez oznak porodu. Badacze wysuwają również hipotezę, że DC i neutrofile będą bardziej obfite podczas aktywnego porodu (o czasie i przedwcześnie) niż u kobiet bez oznak porodu.

Plan eksperymentu:

Morfologia zostanie pobrana od kobiet w ciąży, które wyrażą zgodę na udział w badaniu:

Próbki zostaną przesłane do rutynowej morfologii krwi w laboratorium hematologicznym Hillel Yaffe, a także zostaną przeanalizowane pod kątem populacji IMC i DC w naszym laboratorium przy użyciu fluorescencyjnego barwienia immunologicznego specyficznymi przeciwciałami monoklonalnymi i cytometrii przepływowej.

IMC na wszystkie CD45-dodatnie komórki krwiotwórcze z tkanki łożyska będą analizowane przy użyciu fluorescencyjnego barwienia immunologicznego ze specyficznymi przeciwciałami monoklonalnymi i cytometrii przepływowej. Konkretna lokalizacja tych komórek w łożysku zostanie zidentyfikowana w tkance łożyska za pomocą immunohistochemii (IHC). Ekspresja genów proangiogennych będzie analizowana przez RT PCR i Western blotting.