Роль незрелых миелоидных клеток, моноцитов, дендритных клеток и нейтрофилов при беременности человека как маркеров зрелой беременности и спонтанных родов

Накапливающиеся данные свидетельствуют о том, что механизмы пролиферативной, инвазивной и иммунной толерантности, которые злокачественные опухоли используют для обеспечения снабжения питательными веществами и уклонения или изменения иммунного ответа хозяина, аналогичны тем, которые используются развивающейся плацентой во время нормальной беременности. В дополнение к общей способности проникать через нормальные ткани как раковые клетки, так и клетки развивающейся плаценты создают микроокружение, поддерживающее как иммунологическую привилегию, так и ангиогенез.

Клетки CD11b+Gr1+ представляют собой гетерогенную популяцию клеток костного мозга (BMDC), которые состоят из незрелых миелоидных клеток (IMC) и впервые были описаны как супрессорные клетки миелоидного происхождения. У здоровых людей ИМК, образующиеся в костном мозге, дифференцируются в зрелые гранулоциты, макрофаги или дендритные клетки (ДК). Было показано, что эти клетки играют важную роль в опосредовании подавления иммунитета в животных моделях опухолей человека. В результате индуцированных опухолью изменений миелопоэза в периферической крови, лимфоидных органах и самой опухолевой ткани были обнаружены ИМК. Повышенная популяция ИМК выявлена ​​у пациентов с несколькими типами опухолей. Соответственно, ИМК, обнаруженные в периферической крови таких пациентов, экспрессируют общий миелоидный маркер CD33, но не содержат маркеров зрелых миелоидных клеток, таких как молекула MHC класса II HLADR.

Было показано, что IMC активно способствуют росту опухоли и метастазированию, модулируя среду цитокинов и ремоделируя сосуды, способствуя ангиогенезу.

В нашей лаборатории было продемонстрировано, что ИМК проникают в плаценту беременных мышей и активно способствуют ангиогенезу. Эти клетки демонстрируют поразительное сходство с IMC, населяющими злокачественные опухоли. Соответственно, человеческая плацента также инфильтрирована значительной популяцией IMC. Иммуноокрашивание плаценты человека показало, что IMC составляют около 25% (диапазон 10-40%) от общего количества плацентарных CD45+ гемопоэтических клеток, происходящих из костного мозга, и что эта популяция расположена вблизи кровеносных капилляров. Исследователи также продемонстрировали, что незрелые DCs, клетки, первоначально описанные как регулирующие адаптивный иммунный ответ, также способствуют ангиогенезу в моделях хориоидальной неоваскуляризации, эндометриоза и опухолей.

Целью предлагаемого исследования является сравнение содержания ИМК, ДК, количества моноцитов и нейтрофилов в образцах крови при нормальных беременностях: 1. у женщин в доношенных активных родах. 2. У нерожавших женщин. 3. При преждевременных родах.

Согласно нашим предыдущим выводам, исследователи предполагают, что IMC, моноциты и активные роды (как доношенные, так и недоношенные) будут ниже, чем у женщин без признаков родов. Исследователи также предполагают, что ДК и нейтрофилы будут более распространены при активных родах (доношенных и недоношенных), чем у женщин без признаков родов.

Экспериментальный план:

Анализ крови будет взят у беременных женщин, согласившихся участвовать в исследовании:

Образцы будут отправлены на стандартный общий анализ крови в гематологическую лабораторию Hillel Yaffe, а также будут проанализированы на популяцию IMC и DC в нашей лаборатории с использованием флуоресцентного иммунного окрашивания специфическими моноклональными антителами и проточной цитометрии.

IMC на общее количество CD45-положительных гемопоэтических клеток из плацентарной ткани будет проанализировано с использованием флуоресцентного иммунного окрашивания специфическими моноклональными антителами и проточной цитометрии. Конкретное расположение этих клеток в плаценте будет определено в плацентарной ткани с помощью иммуногистохимии (ИГХ). Экспрессию проангиогенных генов будут анализировать с помощью ОТ-ПЦР и Вестерн-блоттинга.