Rollen til umodne myeloide celler, monocytter, dentritiske celler og nøytrofiler i menneskelige graviditeter som markører for moden graviditet og spontan fødsel

Akkumulerende bevis tyder på at de proliferative, invasive og immuntoleransemekanismene som ondartede svulster bruker for å etablere en næringstilførsel og unngå eller redigere vertens immunrespons er lik de som brukes av den utviklende placenta under normal graviditet. I tillegg til den delte kapasiteten til å invadere gjennom normalt vev, skaper både kreftceller og celler i den utviklende placenta et mikromiljø som støtter både immunologiske privilegier og angiogenese.

CD11b+Gr1+-celler er en heterogen populasjon av benmargsavledede celler (BMDC) som består av umodne myeloidceller (IMC), og ble først beskrevet som myeloidavledede suppressorceller. Hos friske individer differensierer IMC-er som genereres i benmargen til modne granulocytter, makrofager eller dendritiske celler (DC). Disse cellene har vist seg å spille en viktig rolle i å formidle immunundertrykkelse i dyremodeller av humane svulster. Som et resultat av tumorinduserte endringer i myelopoiesis, har IMC blitt funnet i perifert blod, lymfoide organer og selve tumorvevet. En økt populasjon av IMC ble identifisert hos pasienter med flere tumortyper. Følgelig uttrykker IMC-er påvist i det perifere blodet til slike pasienter som bærer den vanlige myeloidmarkøren CD33, men mangler markører for modne myeloide celler som MHC klasse II-molekylet HLADR.

IMC-er har vist seg å aktivt fremme tumorvekst og metastase ved å modulere cytokinmiljøet, og gjennom vaskulær ombygging ved å fremme angiogenese.

Det har blitt demonstrert i vårt laboratorium at IMC-er infiltrerer placenta hos gravide mus og aktivt fremmer angiogenese. Disse cellene viser slående likhet med IMC-er som befolker ondartede svulster. Følgelig blir menneskelige morkaker også infiltrert av en betydelig populasjon av IMC-er. Immunfarging av humane placenta viste at IMC utgjør rundt 25 % (område 10-40 %) av totale CD45+ benmargsavledede hematopoietiske celler fra placenta, og at denne populasjonen er lokalisert nær blodkapillærer. Etterforskerne viste også at umodne DC-er, celler som opprinnelig ble beskrevet for å regulere den adaptive immunresponsen, også fremmer angiogenese i modeller av koroidal neovaskularisering, endometriose og svulster.

Målet med denne foreslåtte studien er å sammenligne mengde IMC, DC, monocytter og nøytrofiler i blodprøver ved normale svangerskap: 1. hos kvinner i aktiv fødsel. 2. Hos kvinner som ikke føder. 3. I førtidsarbeid.

I følge våre tidligere funn, antar etterforskerne at IMC, monocytter og i aktiv fødsel (både termin og preterm) vil være lavere enn kvinner uten tegn på fødsel. Etterforskerne antar også at DC-er og nøytrofiler vil være mer rikelig ved aktiv fødsel (i termin og pretermin) enn kvinner uten tegn på fødsel.

Eksperimentell plan:

Blodtelling vil bli samlet inn fra gravide kvinner som godtar å delta i forskningen:

Prøvene vil bli sendt for rutinemessig fullstendig blodtelling i Hillel Yaffe hematologiske laboratorium og vil også bli analysert for IMCs og DCs populasjoner i laboratoriet vårt ved bruk av fluorescerende immunfarging med spesifikke monoklonale antistoffer og flowcytometri.

IMCs per totale CD45 positive hematopoietiske celler fra placentavevet vil bli analysert ved bruk av fluorescerende immunfarging med spesifikke monoklonale antistoffer og flowcytometri. Den spesifikke plasseringen av disse cellene i placenta vil bli identifisert i placentavevet ved hjelp av immunhistokjemi (IHC). Ekspresjonen av pro angiogene gener vil bli analysert ved RT PCR og Western blotting.