Společné požití leucinu a myofibrilární syntéza proteinů u starších dospělých

Na začátku budou účastníci požádáni, aby nosili krokoměr a dokončili fyzickou aktivitu a záznam váženého jídla po dobu 3 dnů. Nalačno bude hodnocen klidový energetický výdej (nepřímá kalorimetrie), tělesná hmotnost a složení těla (DEXA). Bude proveden silový test za účelem stanovení maxima 1 opakování (1-RM) a maximální zátěže, kterou může každý účastník zvednout pro 15 - 24 opakování pomocí stroje na prodlužování nohou vsedě. Účastníci budou poté randomizováni do jedné ze dvou skupin podle věku, úrovně aktivity a BMI: vyšší (1,2 g/kg/den) nebo nižší denní protein (0,8 g/kg/den). Účastníci poté zahájí 9denní řízenou dietu (den -3 až 6) navrženou tak, aby splnila energetické požadavky na udržení hmotnosti a zajistila denní příjem bílkovin podle skupinové alokace každého účastníka (tj. 0,8 nebo 1,2 g/kg/den).

Všichni účastníci dostanou ochucené doplňkové nápoje (Infinit Nutrition, Windsor, Ontario) a budou instruováni, aby konzumovali jeden nápoj v polovině každého jídla od 0. do 5. dne. Jednotlivé porce doplňku budou zabaleny do sáčku na zip. Infinit Nutrition ve formě síly. Účastníci budou muset doma přidat vodu do elektřiny. Během dne 0 - 2 (období bez suplementace) bude nápojem placebo (maltodextrin a sacharóza) a během dne 3 - 5 (období suplementace leucinem) bude nápoj obsahovat krystalický leucin (5 g) se sacharózou pro příchuť. Nápoje budou poskytovány jednoduše slepým způsobem, energeticky přizpůsobené a budou mít podobnou vůni, barvu a chuť. Účastníci budou také zaslepeni, pokud jde o jejich rozdělení do skupin.

Aminoacidemie, inzulinémie a glykémie budou stanoveny v reakci na požití snídaně, oběda a večeře během období bez suplementace (2. den) a období suplementace leucinem (5. den). Během každé z těchto zkoušek odběru krve budou vzorky krve odebírány bezprostředně před a 20, 40, 60, 90, 120, 180, 240 minut po požití každého jídla (celkem 25 x 4 ml vzorků krve na účastníka na zkoušku).

Integrativní MPS bude měřena ve cvičené a necvičené noze během období bez suplementace (den 0 - 3) a období suplementovaného leucinem (den 3 - 6) pomocí perorálně požité deuterované vody (D20) a svalových biopsií získaných z vastus lateralis dne dny 0, 3 a 6. Účastníci se hlásí do laboratoře na lačno v den 0 a po svalové biopsii ze vzorku vastus lateralis a slin účastníci zkonzumují jeden 100 ml perorální bolus D20 přibližně v 09:00. Bezprostředně po bolusu D20 účastníci provedou záchvat jednostranného cvičení extenze nohou (3 sady do selhání vůle při maximální zátěži, kterou mohou zvednout po 15–24 opakováních (~40–50 % 1-RM)). V den 3 účastníci provedou identické cvičení s odporem s tou výjimkou, že počet opakování bude omezen na počet dosažený v den 0. Po obou cvičeních účastníci zkonzumují svou individuální snídani (s placebem v den 0 a s leucinovým nápojem v den 3) v laboratoři před návratem domů. Bilaterální svalové biopsie budou získány před cvičením v den 3 (konec období bez suplementace) a v den 6 (konec období s doplněným leucinem). Celkové obohacení tělesné vody deuteriem lze použít jako náhradu za značení alaninu v plazmě a bude určeno ze slin odebraných účastníkem každé ráno v 09:00. Účastníci budou instruováni, aby nic nejedli ani nepili po dobu 30 minut před odběrem slin a vzorky budou před další návštěvou laboratoře uloženy v mrazáku účastníka.