Coingestión de leucina y síntesis de proteínas miofibrilares en adultos mayores

Al inicio del estudio, se les pedirá a los participantes que usen un podómetro y completen una actividad física y un registro de alimentos pesados ​​durante 3 días. El gasto energético en reposo (calorimetría indirecta), el peso corporal y la composición corporal (DEXA) se evaluarán en ayunas. Se realizará una prueba de fuerza para determinar 1 repetición máxima (1-RM) y la carga máxima que cada participante puede levantar de 15 a 24 repeticiones usando una máquina de extensión de piernas sentado. Luego, los participantes serán asignados aleatoriamente a uno de dos grupos emparejados por edad, nivel de actividad e IMC: proteína diaria más alta (1,2 g/kg/d) o más baja (0,8 g/kg/d). Luego, los participantes comenzarán una dieta controlada de 9 días (días -3 a 6) diseñada para cumplir con los requisitos de energía para mantener el peso y proporcionar una ingesta diaria de proteínas de acuerdo con la asignación de grupo de cada participante (es decir, 0,8 o 1,2 g/kg/día).

Todos los participantes recibirán bebidas suplementarias con sabor (Infinit Nutrition, Windsor, Ontario) y se les indicará que consuman una bebida a la mitad de cada comida del día 0 al 5. Las porciones individuales del suplemento se empaquetarán en una bolsa con cierre hermético por Infinit Nutrition en forma de poder. Se requerirá que los participantes agreguen agua a la energía en el hogar. Durante los días 0 - 2 (período sin suplementación) la bebida será un placebo (maltodextrina y sacarosa), y durante los días 3 - 5 (período de suplementación con leucina) la bebida contendrá leucina cristalina (5 g) con sacarosa para darle sabor. Las bebidas se proporcionarán de manera ciega simple, con igual energía y serán similares en olor, color y sabor. Los participantes también estarán cegados a la asignación de su grupo.

La aminoacidemia, la insulinemia y la glucemia se determinarán en respuesta a la ingestión del desayuno, el almuerzo y la cena durante los períodos sin suplementación (día 2) y suplementación con leucina (día 5). Durante cada uno de estos ensayos de muestreo de sangre, se obtendrán muestras de sangre inmediatamente antes y 20, 40, 60, 90, 120, 180, 240 min después de la ingestión de cada comida (un total de 25 muestras de sangre de 4 ml por participante por ensayo).

La MPS integrativa se medirá en la pierna ejercitada y no ejercitada durante el período sin suplementos (días 0 - 3) y el período suplementado con leucina (días 3 - 6) utilizando agua deuterada ingerida por vía oral (D20) y biopsias musculares obtenidas del vasto lateral en Días 0, 3 y 6. Los participantes se presentarán en el laboratorio en ayunas el día 0 y, luego de una biopsia muscular del vasto lateral y una muestra de saliva, los participantes consumirán un solo bolo oral de 100 ml de D20 aproximadamente a las 09:00. Inmediatamente después del bolo D20, los participantes realizarán un ejercicio de extensión de pierna unilateral (3 series hasta el fallo voluntario con la carga máxima que pueden levantar durante 15-24 repeticiones (~40-50% 1-RM)). El día 3, los participantes realizarán una sesión de ejercicio de fuerza idéntica con la excepción de que las repeticiones se limitarán al número logrado el día 0. Después de ambas sesiones de ejercicio, los participantes consumirán su desayuno individualizado (con la bebida de placebo el día 0 y con la bebida de leucina). el día 3) en el laboratorio antes de regresar a casa. Se obtendrán biopsias musculares bilaterales antes del ejercicio el día 3 (final del período sin suplemento) y el día 6 (final del período con suplemento de leucina). El enriquecimiento en deuterio del agua corporal total se puede usar como un sustituto para el etiquetado de alanina en plasma y se determinará a partir de hisopos de saliva recolectados por el participante todas las mañanas a las 09:00. Se indicará a los participantes que no coman ni beban nada durante 30 minutos antes de la toma de muestras de saliva y las muestras se almacenarán en el congelador del participante antes de su próxima visita al laboratorio.