Vliv diety a exkluzivní enterální výživy "Crohnova choroba - léčba - jídlem" na zdravé střevní bakterie

Tato studie je randomizovaná, zkřížená studie dietní intervence. Zdraví dospělí (>18 let) účastníci z komunity budou náborováni pomocí reklamního letáku a ústním podáním. Do studie budou zařazeni způsobilí účastníci. Těm subjektům, které o studii projevily zájem, ale nehodí se k účasti, poděkujeme a vysvětlíme jim, proč je třeba je vyloučit. Ti, kteří jsou způsobilí a chtějí se zúčastnit, budou požádáni, aby podstoupili dvě různé experimentální diety, každá po dobu sedmi dnů:

1. Exkluzivní enterální výživa (EEN), což je výhradní konzumace patentovaného doplňku stravy na bázi mléka (Modulen®, Nestle). Jedná se o tekutou dietu používanou k léčbě dětí s aktivním CD. Ačkoli se tato dieta používá primárně z klinických důvodů, je založena na potravinách a neobsahuje žádné léky ani nepotravinářské farmaceutické přísady. Je k dispozici online a bez lékařského předpisu od lékárníka.
2. Crohn's Disease Treatment-with-EATing diet (CD-TREAT diet), eliminační přizpůsobená dieta, která se bude skládat z běžného jídla a bude se podobat složení potravin/živin EEN (např. obsah vlákniny, složení mastných kyselin) a zvážení důkazů, které se týkají určitých živin a složek potravin (např. maso, cukr) v etiologii a riziku relapsu CD. Strava bude vytvořena pomocí metodologie výměny potravin a bude analyzována pomocí Windiets® 2010.

Obě diety budou mít stejný energetický obsah a budou izokalorické s cílem udržet váhu účastníků stabilní během období studie. Jejich energetický obsah bude přizpůsoben celkovému energetickému výdeji účastníků a úrovni fyzické aktivity vypočítané pomocí sady rovnic WHO. Pořadí diet bude náhodně přiděleno pomocí příkazu MS Excel. Abychom minimalizovali únavu dietou, ale také abychom zajistili, že budeme schopni detekovat změny střevní mikroflóry, budou podávány experimentální diety po dobu 7 dnů. To je založeno na nedávných důkazech naznačujících, že dietní změny po dobu 5 dnů vyvolávají reprodukovatelné změny ve složení a metabolismu střevní mikroflóry. Před prvním dietním zásahem účastníci také zaznamenají svůj dietní příjem pomocí 7denního deníku odhadovaného jídla. Mezi těmito dvěma intervencemi budou muset účastníci jíst svou obvyklou stravu po dobu dvou týdnů a toto bude období vymývání, jehož cílem je vrátit střevní mikroflóru zpět na výchozí úroveň. Týden před zahájením druhé intervence budou účastníci požádáni, aby dodržovali stejný stravovací režim jako týden před prvním pokusem.

Podrobné metody:

Předběžná zdravotní kontrola: Účastníci v den náboru vyplní krátký zdravotní dotazník obsahující základní zdravotní informace, věk nebo jakékoli léky.

Antropometrie: Všem účastníkům bude naměřena výška a hmotnost na začátku a pouze hmotnost bude změřena v každém časovém bodě odběru vzorku.

Dodržování diety: V průběhu dvou experimentálních diet budeme sledovat dodržování diety tím, že požádáme účastníky o vyplnění dotazníku. Dotazník se bude ptát, zda cítili potřebu kdykoli doplnit jídelníček o další potraviny nebo nápoje. Intervalový hovor 2 dny po zahájení každé diety bude také použit ke zvýšení motivace účastníků a dodržování diet.

Odběr vzorků a analýza: Před a po každém dietním zásahu budou odebrány čerstvé vzorky stolice a moči (celkem 4krát), aby bylo možné posoudit a porovnat dopad těchto diet na složení střevní mikroflóry a metabolickou aktivitu.

Laboratorní testy:

1. Diverzita a složení střevních bakterií ze vzorků stolice bude měřeno pomocí molekulárních technik, jako je kvantitativní polymerázová řetězová reakce (PCR) z bakteriální ribozomální DNA a sekvenování nové generace (metagenomika).
2. Velké množství různých produktů bakteriálního metabolismu, jako jsou mastné kyseliny s krátkým řetězcem, sulfid a amoniak, bude měřeno pomocí řady technik včetně plynové chromatografie a hmotnostní spektrometrie plynové chromatografie (GCMS) (metabolomika). Bude také měřeno pH stolice, marker bakteriální fermentace.

Výpočet výkonu: Čerstvé vzorky stolice a moči budou odebrány od 38 zdravých účastníků ve 4 časových bodech. Na základě naší předchozí in vivo práce u dětí s CD by nám to dalo sílu 80 % (p=0,05) k detekci průměrného rozdílu koncentrací 1,0 log (SD:1,5) u Faecalibacterium prausnitzii mezi jejich obvyklou stravou a dietou EEN nebo dietu CD-TREAT.