Role regulačních molekul Podocan a Wnt Pathway u ischemické choroby srdeční

Buňky hladkého svalstva (SMC's) kriticky ovlivňují klinický průběh cévního onemocnění. Úzká regulace migrace a proliferace SMC v intimním prostoru je rozhodující pro udržení jemné rovnováhy mezi nedostatečnou a nadměrnou reparací aterosklerotického plátu. Je-li proliferace SMC příliš potlačena, následné oslabení vazivového uzávěru může mít za následek zranitelnost plaku, která je základem akutního koronárního syndromu, a pokud je proliferace SMC nadměrná, může následovat hyperplazie intimy jako charakteristický znak zrychleného onemocnění věnčitých tepen, jako je tomu u restenózy po PCI. Zatímco stenty se výrazně zlepšily na základě zpětného rázu a konstriktivní remodelační složky restenózy, problém zrychleného růstu intimy SMC přetrvává. Současný přístup zavádění stentů uvolňujících nespecifická činidla podporující buněčnou smrt a/nebo inhibici proliferace byl úspěšný při snižování potřeby rekurentních vaskulárních intervencí. Tento úspěch však přichází na úkor oddálení cévního hojení, jehož konečný dlouhodobý klinický dopad se stále hodnotí. Krátkodobé a dlouhodobé negativní účinky na hojící se arteriální stěnu, jako je opožděná reendotelizace, zvýšený zánět a zvýšená trombogenita lékového stentu (DES) jsou nesporné. Tyto vedlejší účinky DES jsou maskovány dlouhodobou a agresivní duální protidestičkovou terapií, která vystavuje pacienty – zejména starší osoby – zvýšenému riziku krvácení a komplikuje klinické rozhodování. Tento problém také vyvolává obavy z příliš brzkého ukončení léčby, vyžaduje přísnou compliance pacienta a je nákladný. Tyto problémy nejsou v každodenní klinické praxi triviální a nedostatek spolehlivých klinických prediktorů restenózy znemožňuje výběr stentu individuálně a na míru pacienta.

Podocan je protein ze skupiny proteinů s obsahem jediného leucinu (SLR) a je dříve nerozpoznanou složkou sklerotické glomerulární léze, která se vyvíjí v průběhu experimentální nefropatie související s HIV. Jeho důležitá role při regulaci funkce buněk hladkého svalstva prostřednictvím Wnt-dráhy byla nedávno popsána výzkumníky této studie. Bylo prokázáno, že moduluje experimentální arteriální opravu a významně odlišný vzor exprese byl nalezen v koronárních arteriálních lézích získaných směrovou koronární aterektomií (DCA) od pacientů s restenózou ve srovnání se stabilní anginou pectoris. Tato zjištění naznačují možnou klinickou prediktivní roli Podocanu a efektních molekul Wnt dráhy na incidenci intentové restenózy (ISR) a potřebu opakované revaskularizace cílových cév.

Všichni pacienti, kteří se dostaví do kardiologické laboratoře na angiografii za účelem vyhodnocení známé nebo suspektní CAD, budou způsobilí k zařazení. Očekává se, že na základě angiografických výsledků budou účastníci spadat do jedné ze čtyř kategorií:

1. Žádný CAD
2. Stabilní CAD, není nutný žádný zásah
3. Obstrukční CAD vyžadující intervenci (angioplastika, stentování, CABG) (není spojeno s akutní příhodou, jako je IM)

4. Pacienti s akutním koronárním syndromem (ACS)

   Ve všech elektivních/plánovaných případech bude před katetrizací odebrán vzorek periferní krve prostřednictvím IV přístupové linky, která byla předtím umístěna pro katetrizační proceduru. V naléhavých případech AKS budou vzorky krve, pokud je to možné, odebrány stejným způsobem popsaným výše. Je pravděpodobné, že v některých případech, jako je infarkt myokardu s elevace ST (STEMI), to nebude možné na základě priorit klinické péče. V těchto případech budou vzorky krve odebrány do 24 hodin po katetrizaci. Tyto vzorky krve bude nutné získat venepunkcí a budou jasně označeny/zaznamenány jako odebrané po výkonu. Vzorky krve budou zamraženy a uloženy v mrazáku -80°C ve Výzkumném ústavu. Vzorky budou hromadně odeslány do Baylor Medical Center, kde budou testovány na přítomnost molekul Wnt a Podocan (Wnt-1, Wnt-3, Dkk-1, sklerostin, WIF-1, sFRP-1, sFRP-3) měřením cirkulace hladiny pomocí ELISA Obstrukční ICHS (non-ACS) Skupina: Očekává se, že během 18-20 měsíců bude zařazeno 900 pacientů se stentem. Zdůvodnění počtu pacientů je odvozeno ze specifického cíle pokusu o stanovení prospektivní složky naší studie, kterou je predikce restenózy. Při současné průměrné incidenci restenózy mezi 10 až 15 % (DES kolem 7 % a BMS kolem 20 % restenóz) by toto číslo mělo zaručit přibližně 100 příhod restenózy z 900 pacientů. To by mělo poskytnout realistickou statistickou šanci detekovat možnou klinickou prediktivní hodnotu našich proměnných. Účastníci, kteří jsou odsouhlaseni a odebírají vzorky, ale u kterých se zjistí, že nemají obstrukční ICHS vyžadující stentování, budou vedeni odděleně v databázi studie jako kontrolní skupina pro budoucí analýzu.

   Ze základního angiogramu budou shromážděny následující informace:

   • syntax skóre za účelem stanovení koronární aterosklerotické zátěže
   • PCI provedená během základního angiogramu? Pokud ano - jaký typ stentu, umístění

   Účastnické tabulky budou přezkoumány 24 měsíců po katetrizaci, aby se shromáždily kovariáty (jako je věk, pohlaví, rasa/etnická příslušnost, vysoký krevní tlak, obezita, kouření a cukrovka) a aby se monitorovaly následující události:

   • Opakujte srdeční katetrizaci

     --Re-stenóza stentu umístěného na základním angiogramu

     -- Nástup nových lézí

     • Progrese lézí neléčených na výchozím angiogramu
   • Nový nástup MI/ACS
   • Opakující se MI/ACS
   • Smrt v důsledku známé kardiovaskulární příčiny

   CS skupina:

   Ze základního angiogramu budou shromážděny následující informace:

   • syntax skóre za účelem stanovení koronární aterosklerotické zátěže
   • PCI provedená během základního angiogramu? Pokud ano - jaký typ stentu, umístění

   Účastnické tabulky budou zkontrolovány 24 měsíců po katetrizaci za účelem sledování následujících událostí:

   • Opakujte srdeční katetrizaci - Re-stenóza stentu umístěného na základním angiogramu

     -- Nástup nových lézí

     --Progrese lézí neléčených při výchozím angiogramu

   • Opakující se MI/ACS
   • Smrt v důsledku známé kardiovaskulární příčiny

   Neobstrukční/stabilní skupina CAD:

   Ze základního angiogramu budou shromážděny následující informace:

   -syntaktické skóre za účelem stanovení koronární aterosklerotické zátěže

   Účastnické tabulky budou zkontrolovány 24 měsíců po katetrizaci za účelem sledování následujících událostí:

   • Opakujte srdeční katetrizaci

     -- Nástup nových lézí

     --Progrese lézí neléčených při výchozím angiogramu

   • Nový nástup MI/ACS
   • Smrt v důsledku známé kardiovaskulární příčiny

   Skupina normální angiografie (bez CAD):

   Účastnické tabulky budou zkontrolovány 24 měsíců po katetrizaci za účelem sledování následujících událostí:

   • Opakujte srdeční katetrizaci -- Nástup nových lézí

     • Progrese lézí neléčených na výchozím angiogramu
   • Nový nástup MI/ACS
   • Smrt v důsledku známé kardiovaskulární příčiny

   Srovnání s historickými vzorky: Hlavní zkoušející vlastní sbírku historických vzorků tkáně, které mají angiograficky definované biopsie koronární cílové léze od klinických pacientů se stabilní anginou pectoris a restenózou. Technika DCA (Directional Coronary Artherectomy), kterou byly tyto vzorky odebírány, již není klinicky prováděna, což výzkumníkům brání v odběru těchto vzorků od současných účastníků studie. Současní účastníci studie budou seskupeni podle přesně stejných klinických kritérií jako pacienti v minulosti, a budou tedy představovat srovnatelnou klinickou kohortu. Exprese efektních molekul Podocan a Wnt (Wnt-1, Wnt-3, Dkk-1, Sklerostin, WIF-1, sFRP-1, sFRP-3) v lézích koronárních tepen získaných směrovou koronární arterektomií bude analyzována pomocí imuno- histochemické barvení a kvantitativní histomorfometrická analýza srovnávající restenózu s primárním stabilním onemocněním koronárních tepen, jak bylo publikováno výzkumnými pracovníky (5). Toto srovnání umožní výzkumníkům zkoumat vztah mezi hladinou efektorních molekul Podocan a Wnt, fyziologií koronárního plaku a koncovým bodem studie progrese onemocnění, jak je prokázáno restenózou.