Ruolo delle molecole regolatrici del percorso Podocan e Wnt nella malattia coronarica

Le cellule muscolari lisce (SMC) influenzano in modo critico il decorso clinico della malattia vascolare. La stretta regolazione della migrazione e della proliferazione delle SMC all'interno dello spazio intimale è fondamentale per mantenere un delicato equilibrio tra riparazione insufficiente ed eccessiva della placca aterosclerotica. Quando la proliferazione di SMC è troppo soppressa, il conseguente indebolimento del cappuccio fibroso può portare alla vulnerabilità della placca alla base della sindrome coronarica acuta e quando la proliferazione di SMC è eccessiva, può seguire l'iperplasia intimale come segno distintivo della malattia coronarica accelerata come nella restenosi post PCI. Mentre gli stent hanno notevolmente migliorato il rinculo e la componente di rimodellamento costrittivo della restenosi, il problema della crescita accelerata del SMC intimale è rimasto. L'attuale approccio di fornire stent che rilasciano agenti non specifici che promuovono la morte cellulare e/o l'inibizione della proliferazione ha avuto successo nel ridurre la necessità di interventi vascolari ricorrenti . Tuttavia, questo successo va a scapito del ritardo della guarigione vascolare, il cui impatto clinico finale a lungo termine è ancora in fase di valutazione. Gli effetti negativi a breve e lungo termine sulla guarigione della parete arteriosa, come la riendotelizzazione ritardata, l'aumento dell'infiammazione e l'aumentata trombogenicità dello stent a rilascio di farmaco (DES) sono indiscussi. Questi effetti collaterali del DES vengono mascherati da una doppia terapia antipiastrinica prolungata e aggressiva, che espone i pazienti, in particolare gli anziani, a maggiori rischi di sanguinamento e complica il processo decisionale clinico. Questo problema provoca anche il timore di un'interruzione troppo precoce del trattamento, richiede una rigorosa compliance del paziente ed è costoso. Questi problemi non sono banali nella pratica clinica quotidiana e la mancanza di predittori clinici affidabili di restenosi preclude la selezione di stent personalizzati e su misura per il paziente.

Podocan è una proteina all'interno della famiglia di proteine ​​Single Leucine Rich (SLR) ed è un componente precedentemente non riconosciuto della lesione glomerulare sclerotica che si sviluppa nel corso della nefropatia sperimentale associata all'HIV . Il suo ruolo importante nella regolazione della funzione delle cellule muscolari lisce attraverso il percorso Wnt è stato recentemente descritto dai ricercatori di questo studio . È stato dimostrato che modula la riparazione arteriosa sperimentale e un modello di espressione significativamente diverso è stato trovato nelle lesioni arteriose coronariche ottenute mediante aterectomia coronarica direzionale (DCA) da pazienti con restenosi rispetto all'angina stabile . Questi risultati suggeriscono un possibile ruolo predittivo clinico di Podocan e delle molecole effettrici del percorso Wnt sull'incidenza della restenosi istantanea (ISR) e sulla necessità di ripetere la rivascolarizzazione del vaso bersaglio.

Tutti i pazienti che si presentano al laboratorio di cateterismo cardiaco per l'angiografia per la valutazione di CAD nota o sospetta saranno idonei per l'arruolamento. Si prevede che, sulla base dei risultati angiografici, i partecipanti rientreranno in una delle quattro categorie:

1. Nessun CAD
2. CAD stabile, nessun intervento richiesto
3. CAD ostruttivo che richiede intervento (angioplastica, stent, CABG) (non associato a evento acuto, come infarto del miocardio)

4. Pazienti con Sindrome Coronarica Acuta (ACS)

   In tutti i casi elettivi/programmati, prima della cateterizzazione, verrà prelevato un campione di sangue periferico tramite una linea di accesso IV precedentemente posizionata per la procedura di cateterizzazione. Nei casi emergenti di ACS, i campioni di sangue saranno ottenuti nello stesso modo descritto in precedenza, se possibile. È probabile che in alcuni casi, come l'infarto del miocardio con sopraslivellamento del tratto ST (STEMI), ciò non sia possibile sulla base delle priorità di assistenza clinica. In questi casi i campioni di sangue saranno prelevati entro 24 ore dalla cateterizzazione. Questi campioni di sangue dovranno essere ottenuti tramite prelievo venoso e saranno chiaramente etichettati/registrati come raccolti dopo la procedura. I campioni di sangue saranno congelati e conservati in un congelatore a -80°C presso l'Istituto di Ricerca. I campioni saranno inviati in batch al Baylor Medical Center per essere testati per la presenza di molecole Wnt e Podocan (Wnt-1, Wnt-3, Dkk-1, Sclerostin, WIF-1, sFRP-1, sFRP-3) misurando la circolazione livelli tramite ELISA Gruppo CAD ostruttivo (non ACS): si prevede che 900 pazienti con stent saranno arruolati nell'arco di 18-20 mesi. La giustificazione del numero di pazienti deriva dallo scopo specifico di tentare di stabilire una componente prospettica del nostro studio, che è la previsione della restenosi. Data un'attuale incidenza media di restenosi tra il 10 e il 15% (DES intorno al 7% e BMS intorno al 20% del tasso di restenosi) questo numero dovrebbe garantire circa 100 eventi di restenosi su 900 pazienti. Ciò dovrebbe fornire una possibilità statistica realistica di rilevare un possibile valore predittivo clinico delle nostre variabili. I partecipanti che sono acconsentiti e campionati ma che risultano non avere una CAD ostruttiva che richiede lo stent verranno mantenuti separatamente nel database dello studio come gruppo di controllo per analisi future.

   Le seguenti informazioni saranno raccolte dall'angiogramma di base:

   • punteggio di sintassi per determinare il carico aterosclerotico coronarico
   • PCI eseguito durante l'angiogramma basale? Se sì, che tipo di stent, posizione

   I grafici dei partecipanti saranno rivisti a 24 mesi dopo il cateterismo per raccogliere le covariate (come età, sesso, razza/etnia, ipertensione, obesità, fumo e diabete) e per monitorare i seguenti eventi:

   • Ripetere il cateterismo cardiaco

     --Re-stenosi dello stent posizionato all'angiogramma basale

     --Insorgenza di nuove lesioni

     • Progressione delle lesioni non trattate all'angiogramma basale
   • MI/ACS di nuova insorgenza
   • MI/SCA ricorrente
   • Morte per cause cardiovascolari note

   Gruppo CS:

   Le seguenti informazioni saranno raccolte dall'angiogramma di base:

   • punteggio di sintassi per determinare il carico aterosclerotico coronarico
   • PCI eseguito durante l'angiogramma basale? Se sì, che tipo di stent, posizione

   I grafici dei partecipanti saranno rivisti a 24 mesi dopo il cateterismo per monitorare i seguenti eventi:

   • Ripetere il cateterismo cardiaco -- Re-stenosi dello stent posizionato all'angiogramma basale

     --Insorgenza di nuove lesioni

     --Progressione delle lesioni non trattate all'angiogramma basale

   • MI/SCA ricorrente
   • Morte per cause cardiovascolari note

   Gruppo CAD non ostruttivo/stabile:

   Le seguenti informazioni saranno raccolte dall'angiogramma di base:

   -punteggio di sintassi per determinare il carico aterosclerotico coronarico

   I grafici dei partecipanti saranno rivisti a 24 mesi dopo il cateterismo per monitorare i seguenti eventi:

   • Ripetere il cateterismo cardiaco

     --Insorgenza di nuove lesioni

     --Progressione delle lesioni non trattate all'angiogramma basale

   • MI/ACS di nuova insorgenza
   • Morte per cause cardiovascolari note

   Gruppo di angiografia normale (senza CAD):

   I grafici dei partecipanti saranno rivisti a 24 mesi dopo il cateterismo per monitorare i seguenti eventi:

   • Ripetere il cateterismo cardiaco --Insorgenza di nuove lesioni

     • Progressione delle lesioni non trattate all'angiogramma basale
   • MI/ACS di nuova insorgenza
   • Morte per cause cardiovascolari note

   Confronto con campioni storici: il ricercatore principale possiede una raccolta di campioni di tessuto storici che hanno biopsie di lesioni coronariche definite angiograficamente da pazienti clinici con angina stabile e restenosi. La tecnica di DCA (Directional Coronary Artherectomy), con cui sono stati raccolti questi campioni, non viene più eseguita clinicamente, impedendo agli investigatori di raccogliere questi campioni dagli attuali partecipanti allo studio. Gli attuali partecipanti allo studio saranno raggruppati secondo gli stessi identici criteri clinici dei pazienti storici e quindi rappresenteranno una coorte clinica comparabile. L'espressione delle molecole effettrici Podocan e Wnt (Wnt-1, Wnt-3, Dkk-1, Sclerostin, WIF-1, sFRP-1, sFRP-3) nelle lesioni coronariche ottenute mediante arterectomia coronarica direzionale sarà analizzata mediante immuno- colorazione istochimica e analisi istomorfometrica quantitativa che confronta la restenosi con la malattia coronarica primaria stabile come pubblicato dai ricercatori (5). Questo confronto consentirà agli investigatori di esaminare la relazione tra il livello delle molecole effettrici Podocan e Wnt, la fisiologia della placca coronarica e l'endpoint dello studio della progressione della malattia come evidenziato dalla restenosi.