NIPD na CFTC pro triplet Repeat Diseases (DIACCIMEX)

Neinvazivní prenatální diagnostika (NIPD) založená na analýze cirkulující bezbuněčné fetální DNA (cff-DNA) je velmi slibná pro včasnou diagnostiku monogenních onemocnění. Takový přístup je bezpečnější alternativou k invazivním metodám prenatálního testování (amniocentéza nebo choriocentéza), které s sebou nesou významné riziko potratu (0,5 %-1 %). Technické problémy související s charakteristikami cff-DNA však přetrvávají a neumožňují hledání všech mutací, zejména tripletových expanzních mutací, které se týkají vzácných a nevyléčitelných onemocnění (Huntingtonova choroba, Steinertova myotonická dystrofie, syndrom křehkého X, SCA1, 2 , 3). Silná fragmentace a krátká velikost cff-DNA (143 bp) neumožňují přímou detekci těchto mutací. Požadavky prenatální diagnostiky (PND) u této skupiny patologií však představují druhou nejčastější indikaci PND na národní úrovni po cystické fibróze (ABM 2013). Alternativním přístupem je provedení analýzy cirkulujících fetálních trofoblastických buněk (CFTC) z mateřské krve. K izolaci CFTC z mateřské krve bylo použito několik metod. Dosud však žádný test není dostatečně spolehlivý, aby rutinní aplikace nahradila invazivní protokoly. Nedávno byly optimalizovány nové obohacovací systémy pro cirkulující nádorové buňky (CTC) jako tekutou biopsii rakoviny. Některé z těchto nových technologií lze snadno aplikovat na izolaci a charakterizaci CFTC. Cílem této studie je dokončit naše služby NIPD vyvinutím přístupu k CFTC přizpůsobenému analýze onemocnění s opakováním tripletů, kterou nelze provést na cff-DNA.

Jde o multicentrickou prospektivní studii pro hodnocení výkonu diagnostické metody. Zahrnuty budou těhotné ženy mezi 9. a 34. týdnem těhotenství a jejich partner (budoucí otcové). Genotypy těhotných žen a budoucích otců (nemocných nebo zdravých) jsou známé pro jedno z následujících onemocnění: Huntingtonova choroba, Steinertova myotonická dystrofie, fragilní X a spinocerebelární ataxie typu 1, 2 nebo 3. Hlavního cíle je dosaženo shodou mezi zlatým standardem (PND amniocentézou nebo choriocentézou) a výsledky NIPD u každé těhotné ženy účastnící se studie (nepřítomnost nebo přítomnost mutované alely).

Zařazení páru proběhne v jednom ze zúčastněných lékařských genetických center během genetické poradny pro těhotenství s rizikem jedné z výše uvedených patologií.

Při této návštěvě bude proveden odběr krve těhotné (odběr krve na 3 x 10 ml BCT a 5 ml na EDTA) a budoucího otce (5 ml na EDTA). Doba trvání zahrnutí je doba návštěvy. Odběr krve těhotných žen na bezbuněčné DNA "Blood Collection Tubes" (BCT) pro screening CFTC bude adresován Laboratoři lidských vzácných cirkulujících buněk (LCCRH). Molekulární analýzu CFTC izolovaného LCCRH, jakož i extrakci a analýzu genomové DNA (z 5 ml krve na EDTA) páru bude provádět Laboratoř molekulární genetiky (LGM) sídlící ve stejné budově. (IURC - Univerzitní nemocnice Montpellier).

Analýza provedená na jednoduchém krevním testu matky umožní určit, zda budoucí dítě je nebo není postiženo dědičným onemocněním. S tímto novým přístupem NIPD by mohlo dojít k 50% snížení používání invazivní metody u PND. Tuto analýzu lze nabídnout ženám, které nosí plody s rizikem opakování tripletů. Konečně, tento přístup může být aplikován na jakékoli monogenní onemocnění pomocí automatizace izolace CFTC z mateřské krve.