NIPD på CFTC for triplet gentagelsessygdomme (DIACCIMEX)

Ikke-invasiv prænatal diagnose (NIPD), baseret på analyse af cirkulerende cellefrit føtalt DNA (cff-DNA) er meget lovende for tidlig diagnosticering af monogene sygdomme. En sådan tilgang er et sikrere alternativ til invasive metoder til prænatal testning (amniocentese eller choriocentese), som indebærer en betydelig risiko for abort (0,5%-1%). Tekniske problemer relateret til cff-DNA's karakteristika forbliver dog og tillader ikke søgning af alle mutationerne, især tripletekspansionsmutationer, der vedrører sjældne og uhelbredelige sygdomme (Huntingtons sygdom, Steinert myotonisk dystrofi, Fragilt X-syndrom, SCA1, 2 , 3). Faktisk tillader den stærke fragmentering og den korte størrelse af cff-DNA (143 bp) ikke direkte påvisning af disse mutationer. Imidlertid repræsenterer anmodninger om prænatal diagnose (PND) for denne gruppe af patologier den næsthyppigste PND-indikation på nationalt plan efter cystisk fibrose (ABM 2013). En alternativ tilgang er at udføre analyse på cirkulerende føtale trofoblastiske celler (CFTC) fra moderens blod. Adskillige metoder er blevet brugt til at isolere CFTC'er fra moderens blod. Til dato er ingen test dog pålidelig nok til, at en rutineapplikation kan erstatte invasive protokoller. For nylig er nye berigelsessystemer blevet optimeret til cirkulerende tumorceller (CTC'er) som en flydende biopsi af cancer. Nogle af disse nye teknologier kan let anvendes til isolering og karakterisering af CFTC'er. Formålet med denne undersøgelse er at fuldende vores NIPD-tjenester ved at udvikle en tilgang til CFTC tilpasset analysen af ​​triplet-gentagelsessygdomme, som ikke kan udføres på cff-DNA.

Det er et multicenter, prospektivt studie til præstationsevaluering af en diagnostisk metode. De inkluderede forsøgspersoner vil være gravide kvinder mellem 9 og 34 ugers graviditet og deres partner (fremtidige fædre). Genotyper for gravide kvinder og kommende far (syge eller raske) er kendt for en af ​​følgende sygdomme: Huntingtons sygdom, Steinerts myotoniske dystrofi, skrøbelig X og spinocerebellære ataksier type 1, 2 eller 3. Hovedformålet opnås ved overensstemmelsen mellem guldstandard (PND ved fostervandsprøve eller choriocentese) og NIPD-resultater for hver gravid kvinde, der deltager i undersøgelsen (fravær eller tilstedeværelse af den muterede allel).

Parinklusionen vil finde sted i et af de deltagende medicinske genetiske centre under genetisk rådgivningskonsultation for en graviditet med risiko for en af ​​ovennævnte patologier.

Under dette besøg vil den gravides blodprøve (blodprøve taget på 3 x 10 ml BCT og 5 ml på EDTA) og den kommende far (5 ml på EDTA) blive taget. Varigheden af ​​inklusion er tidspunktet for besøget. Blodindsamling af gravide kvinder på cellefrit DNA "Blood Collection Tubes" (BCT) til screening af CFTC'er vil blive adresseret til Human Rare Circulating Cells Laboratory (LCCRH). Den molekylære analyse af CFTC isoleret af LCCRH samt den genomiske DNA-ekstraktion og analyse (fra 5 ml blod på EDTA) af parret vil blive udført af Laboratory of Molecular Genetics (LGM) placeret i samme bygning (IURC - Montpellier Universitetshospital).

Analysen udført på en simpel moderblodprøve vil gøre det muligt at bestemme, om det fremtidige barn er påvirket eller ej af den arvelige sygdom. Med denne nye NIPD-tilgang kan der være et fald på 50 % i brugen af ​​den invasive metode til PND. Denne analyse kan tilbydes kvinder, der bærer fostre med risiko for gentagne triplet-sygdomme. Endelig kan denne tilgang anvendes på alle monogene sygdomme ved CFTCs isoleringsautomatisering fra moderens blod.