NIPD op CFTC voor Triplet Repeat Diseases (DIACCIMEX)

Niet-invasieve prenatale diagnostiek (NIPD), gebaseerd op de analyse van circulerend celvrij foetaal DNA (cff-DNA), is veelbelovend voor een vroege diagnose van monogene ziekten. Een dergelijke aanpak is een veiliger alternatief voor invasieve methoden van prenataal onderzoek (vruchtwaterpunctie of choriocentese) die een aanzienlijk risico op een miskraam met zich meebrengen (0,5%-1%). Technische problemen met betrekking tot de kenmerken van cff-DNA blijven echter bestaan ​​en maken het niet mogelijk om alle mutaties te doorzoeken, in het bijzonder triplet-expansiemutaties die betrekking hebben op zeldzame en ongeneeslijke ziekten (de ziekte van Huntington, Steinert Myotone dystrofie, Fragile X-syndroom, SCA1, 2 , 3). De sterke fragmentatie en de korte omvang van cff-DNA (143 bp) laten inderdaad geen directe detectie van deze mutaties toe. Verzoeken om prenatale diagnose (PND) voor deze groep pathologieën vertegenwoordigen echter de op een na meest voorkomende PND-indicatie op nationaal niveau na cystic fibrosis (ABM 2013). Een alternatieve benadering is het uitvoeren van analyses op circulerende foetale trofoblastcellen (CFTC) uit maternaal bloed. Er zijn verschillende methoden gebruikt om CFTC's uit maternaal bloed te isoleren. Tot op heden is echter geen enkele test betrouwbaar genoeg voor een routinematige toepassing om invasieve protocollen te vervangen. Onlangs zijn nieuwe verrijkingssystemen geoptimaliseerd voor circulerende tumorcellen (CTC's) als een vloeibare biopsie van kanker. Sommige van deze nieuwe technologieën kunnen gemakkelijk worden toegepast op de isolatie en karakterisering van CFTC's. Het doel van deze studie is om onze NIPD-diensten aan te vullen door een aanpak voor CFTC te ontwikkelen die is aangepast aan de analyse van triplet-repeat-ziekten, die niet kan worden uitgevoerd op cff-DNA.

Het is een multicenter, prospectieve studie voor prestatie-evaluatie van een diagnostische methode. De geïncludeerde proefpersonen zijn zwangere vrouwen tussen 9 en 34 weken zwangerschap en hun partner (toekomstige vaders). Genotypes van zwangere vrouwen en toekomstige vaders (ziek of gezond) staan ​​bekend om een ​​van de volgende ziekten: de ziekte van Huntington, myotone dystrofie van Steinert, fragiele X en spinocerebellaire ataxie type 1, 2 of 3. Het hoofddoel wordt bereikt door overeenstemming tussen de gouden standaard (PND door vruchtwaterpunctie of choriocentese) en NIPD-resultaten voor elke zwangere vrouw die aan het onderzoek deelneemt (de aan- of afwezigheid van het gemuteerde allel).

De koppelopname vindt plaats in een van de deelnemende medisch-genetische centra tijdens het erfelijkheidsadvies voor een zwangerschap met risico op een van de hierboven vermelde pathologieën.

Tijdens dit bezoek wordt bloed afgenomen bij de zwangere vrouw (bloed afgenomen op 3 x 10 ml BCT en 5 ml op EDTA) en bij de aanstaande vader (5 ml op EDTA). De opnameduur is het tijdstip van het bezoek. Bloedafname van zwangere vrouwen op celvrij DNA "Blood Collection Tubes" (BCT) om CFTC's te screenen, zal worden gericht aan het Human Rare Circulating Cells Laboratory (LCCRH). De moleculaire analyse van de CFTC geïsoleerd door de LCCRH, evenals de genomische DNA-extractie en analyse (uit de 5 ml bloed op EDTA) van het paar zullen worden uitgevoerd door het Laboratorium voor Moleculaire Genetica (LGM) in hetzelfde gebouw (IURC - Universitair Ziekenhuis van Montpellier).

De analyse uitgevoerd op een eenvoudige maternale bloedtest zal het mogelijk maken om te bepalen of het toekomstige kind al dan niet door de erfelijke ziekte wordt getroffen. Met deze nieuwe NIPD-aanpak zou het gebruik van de invasieve methode voor PND met 50% kunnen afnemen. Deze analyse kan worden aangeboden aan vrouwen die foetussen dragen die risico lopen op triplet-herhalingsziekten. Ten slotte kan deze aanpak worden toegepast op alle monogene ziekten door automatisering van de isolatie van CFTC's uit maternaal bloed.