NIPD на CFTC для триплетных повторных заболеваний (DIACCIMEX)

Неинвазивная пренатальная диагностика (NIPD), основанная на анализе циркулирующей внеклеточной фетальной ДНК (cff-DNA), очень перспективна для ранней диагностики моногенных заболеваний. Такой подход является более безопасной альтернативой инвазивным методам пренатального обследования (амниоцентез или хориоцентез), сопряженным со значительным риском невынашивания беременности (0,5–1%). Однако остаются технические проблемы, связанные с характеристиками cff-ДНК, которые не позволяют провести поиск всех мутаций, в частности мутаций триплетной экспансии, которые касаются редких и неизлечимых заболеваний (болезнь Гентингтона, миотоническая дистрофия Штейнерта, синдром Fragile X, SCA1, 2). , 3). Действительно, сильная фрагментация и небольшой размер cff-ДНК (143 п.н.) не позволяют напрямую обнаружить эти мутации. Однако запросы на пренатальную диагностику (ПНД) для этой группы патологий представляют собой второе наиболее частое показание к ПНД на национальном уровне после муковисцидоза (ABM 2013). Альтернативный подход заключается в проведении анализа циркулирующих фетальных трофобластических клеток (CFTC) из материнской крови. Для выделения CFTC из материнской крови использовалось несколько методов. Однако на сегодняшний день ни один тест не является достаточно надежным, чтобы его рутинное применение могло заменить инвазивные протоколы. Недавно новые системы обогащения были оптимизированы для циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в качестве жидкой биопсии рака. Некоторые из этих новых технологий могут быть легко применены для выделения и определения характеристик CFTC. Целью этого исследования является завершение наших услуг NIPD путем разработки подхода к CFTC, адаптированного к анализу заболеваний с триплетными повторами, который не может быть выполнен на cff-ДНК.

Это многоцентровое проспективное исследование для оценки эффективности диагностического метода. Включенными субъектами будут беременные женщины в возрасте от 9 до 34 недель беременности и их партнеры (будущие отцы). Генотипы беременной женщины и будущего отца (больной или здоровый) известны по одному из следующих заболеваний: болезнь Гентингтона, миотоническая дистрофия Штейнерта, ломкая Х и спиноцеребеллярные атаксии 1, 2 или 3 типов. Основная цель достигается совпадением золотого стандарта (ПНД методом амниоцентеза или хориоцентеза) и результатов НИПД для каждой беременной, участвующей в исследовании (отсутствие или наличие мутантного аллеля).

Включение пары будет происходить в одном из медико-генетических центров-участников во время генетической консультации при беременности с риском одной из вышеперечисленных патологий.

Во время этого визита будет взят образец крови беременной женщины (проба крови взята на 3 х 10 мл BCT и 5 мл на ЭДТА) и будущего отца (5 мл на ЭДТА). Продолжительность включения - время посещения. Сбор крови беременных женщин на бесклеточную ДНК «Пробирки для сбора крови» (BCT) для скрининга CFTC будет адресован Лаборатории редких циркулирующих клеток человека (LCCRH). Молекулярный анализ CFTC, выделенного LCCRH, а также выделение и анализ геномной ДНК (из 5 мл крови на ЭДТА) пары будут проводиться Лабораторией молекулярной генетики (LGM), расположенной в том же здании. (IURC - Университетская клиника Монпелье).

Анализ, выполненный на простом анализе крови матери, позволит определить, поражен или нет будущий ребенок наследственным заболеванием. С этим новым подходом NIPD может быть 50% снижение использования инвазивного метода для PND. Этот анализ может быть предложен женщинам, вынашивающим плод из группы риска по триплетному повтору. Наконец, этот подход может быть применен к любым моногенным заболеваниям путем автоматизации выделения CFTC из материнской крови.