NIPD på CFTC för triplettupprepade sjukdomar (DIACCIMEX)

Non Invasive Prenatal Diagnosis (NIPD), baserad på analys av cirkulerande cellfritt foster-DNA (cff-DNA) är mycket lovande för tidig diagnos av monogena sjukdomar. Ett sådant tillvägagångssätt är ett säkrare alternativ till invasiva metoder för prenatal testning (amniocentesis eller choriocentesis) som medför en betydande risk för missfall (0,5%-1%). Tekniska problem relaterade till egenskaperna hos cff-DNA kvarstår dock och tillåter inte sökning av alla mutationer, i synnerhet triplettexpansionsmutationer som rör sällsynta och obotliga sjukdomar (Huntingtons sjukdom, Steinerts myotoniska dystrofi, Fragilt X-syndrom, SCA1, 2 3). Den starka fragmenteringen och den korta storleken av cff-DNA (143 bp) tillåter faktiskt inte direkt detektion av dessa mutationer. Prenatal Diagnosis (PND)-förfrågningar för denna grupp av patologier representerar dock den näst vanligaste PND-indikationen på nationell nivå efter cystisk fibros (ABM 2013). Ett alternativt tillvägagångssätt är att utföra analys av cirkulerande fetala trofoblastiska celler (CFTC) från moderns blod. Flera metoder har använts för att isolera CFTC från moderns blod. Men hittills är inget test tillräckligt tillförlitligt för att en rutinapplikation ska ersätta invasiva protokoll. Nyligen har nya anrikningssystem optimerats för cirkulerande tumörceller (CTC) som en flytande biopsi av cancer. Vissa av dessa nya teknologier kan lätt tillämpas på isolering och karakterisering av CFTC. Syftet med denna studie är att komplettera våra NIPD-tjänster genom att utveckla ett tillvägagångssätt för CFTC anpassat för analys av triplettrepetitiva sjukdomar, som inte kan utföras på cff-DNA.

Det är en multicenter, prospektiv studie för prestationsutvärdering av en diagnostisk metod. De försökspersoner som inkluderas kommer att vara gravida kvinnor mellan 9 och 34 veckors graviditet och deras partner (blivande fäder). Genotyper för gravida kvinnor och blivande far (sjuka eller friska) är kända för en av följande sjukdomar: Huntingtons sjukdom, Steinerts myotoniska dystrofi, fragil X och spinocerebellär ataxi typ 1, 2 eller 3. Huvudmålet uppnås genom överensstämmelsen mellan guldstandard (PND genom amniocentesis eller choriocentesis) och NIPD-resultat för varje gravid kvinna som deltar i studien (frånvaron eller närvaron av den muterade allelen).

Parinkluderingen kommer att äga rum i ett av de deltagande medicinska genetiska centren under genetisk rådgivningskonsultation för en graviditet som riskerar att drabbas av en av ovan nämnda patologier.

Vid detta besök kommer den gravida kvinnans blodprov (blodprov taget på 3 x 10 ml BCT och 5 ml på EDTA) och den blivande pappan (5 ml på EDTA) att genomföras. Varaktigheten av inkluderingen är tiden för besöket. Blodinsamling av gravida kvinnor på cellfritt DNA "Blood Collection Tubes" (BCT) för att screena CFTC kommer att adresseras till Human Rare Circulating Cells Laboratory (LCCRH). Den molekylära analysen av CFTC som isolerats av LCCRH såväl som genomisk DNA-extraktion och analys (från 5 ml blod på EDTA) av paret kommer att utföras av Laboratory of Molecular Genetics (LGM) i samma byggnad (IURC - Montpellier University Hospital).

Analysen som utförs på ett enkelt moderns blodprov gör det möjligt att avgöra om det framtida barnet påverkas eller inte av den ärftliga sjukdomen. Med denna nya NIPD-metod kan det bli en 50 % minskning av användningen av den invasiva metoden för PND. Denna analys kan erbjudas kvinnor som bär foster som riskerar att drabbas av triplettsjukdomar. Slutligen kan detta tillvägagångssätt tillämpas på alla monogena sjukdomar genom CFTCs isoleringsautomatisering från moderns blod.