NIPD CFTC:stä kolminkertaisten toistuvien sairauksien osalta (DIACCIMEX)

Non Invasive Prenatal Diagnosis (NIPD), joka perustuu kiertävän soluttoman sikiön DNA:n (cff-DNA) analyysiin, on erittäin lupaava monogeenisten sairauksien varhaisessa diagnosoinnissa. Tällainen lähestymistapa on turvallisempi vaihtoehto invasiivisille prenataalisille testausmenetelmille (amniocenteesi tai suonikosenteesi), joka sisältää merkittävän keskenmenon riskin (0,5–1 %). Cff-DNA:n ominaisuuksiin liittyvät tekniset ongelmat ovat kuitenkin edelleen olemassa, eivätkä ne salli kaikkien mutaatioiden etsimistä, etenkään triplettilaajenemismutaatioita, jotka koskevat harvinaisia ​​ja parantumattomia sairauksia (Huntingtonin tauti, Steinert-myotoninen dystrofia, Fragile X -oireyhtymä, SCA1, 2). , 3). Itse asiassa cff-DNA:n voimakas fragmentoituminen ja lyhyt koko (143 bp) eivät mahdollista näiden mutaatioiden suoraa havaitsemista. Prenatal Diagnosis (PND) -pyynnöt tälle sairausryhmälle ovat kuitenkin toiseksi yleisin PND-indikaatio kansallisella tasolla kystisen fibroosin jälkeen (ABM 2013). Vaihtoehtoinen lähestymistapa on analysoida äidin verestä peräisin olevia kiertäviä sikiön trofoblastisia soluja (CFTC). Useita menetelmiä on käytetty CFTC:iden eristämiseen äidin verestä. Tähän mennessä mikään testi ei kuitenkaan ole tarpeeksi luotettava rutiinisovellukselle, joka korvaisi invasiiviset protokollat. Äskettäin uusia rikastusjärjestelmiä on optimoitu kiertäviä kasvainsoluja (CTC) varten nestemäisenä syövän biopsiana. Joitakin näistä uusista teknologioista voidaan helposti soveltaa CFTC:iden eristämiseen ja karakterisointiin. Tämän tutkimuksen tavoitteena on täydentää NIPD-palvelumme kehittämällä CFTC-lähestymistapa, joka on mukautettu toistuvien triplettisairauksien analyysiin, jota ei voida suorittaa cff-DNA:lla.

Se on monikeskus, prospektiivinen tutkimus diagnostisen menetelmän suorituskyvyn arvioimiseksi. Mukana olevat kohteet ovat raskaana olevia naisia ​​9–34 raskausviikolla ja heidän kumppaninsa (tulevat isät). Raskaana olevan naisen ja tulevan isän genotyypit (sairaat tai terveet) tunnetaan jostakin seuraavista sairauksista: Huntingtonin tauti, Steinertin myotoninen dystrofia, hauras X ja spinocerebellaariset ataksiatyypit 1, 2 tai 3. Päätavoite saavutetaan kultastandardin (PND amniocentesis tai choriocentesis) ja NIPD-tulosten välisellä sopimuksella jokaisen tutkimukseen osallistuvan raskaana olevan naisen osalta (mutatoituneen alleelin puuttuminen tai esiintyminen).

Parisuhteeseen osallistuminen tapahtuu yhdessä osallistuvista lääketieteellisistä geneettisistä keskuksista geneettisen neuvonnan aikana, kun kyseessä on raskaus, jolla on riski jollekin edellä mainituista patologioista.

Tämän käynnin aikana otetaan raskaana olevan naisen verinäyte (verinäyte otettu 3 x 10 ml BCT:llä ja 5 ml EDTA:lla) ja tulevalta isältä (5 ml EDTA:lla). Osallistumisen kesto on vierailun aika. Raskaana olevien naisten verenotto soluttomalla DNA:lla "BCT-putkia" CFTC:iden seulomiseksi osoitetaan Human Rare Circulating Cells Laboratorylle (LCCRH). LCCRH:n eristämän CFTC:n molekyylianalyysi sekä pariskunnan genomisen DNA:n uutto ja analyysi (5 ml:sta verta EDTA:lla) suorittaa samassa rakennuksessa sijaitseva molekyyligenetiikan laboratorio (LGM). (IURC - Montpellier University Hospital).

Yksinkertaisella äidin verikokeella tehdyn analyysin avulla voidaan määrittää, vaikuttaako tuleva lapsi perinnölliseen sairauteen vai ei. Tämän uuden NIPD-lähestymistavan avulla invasiivisen menetelmän käyttö PND:ssä voi vähentyä 50 %. Tätä analyysiä voidaan tarjota naisille, jotka kantavat sikiöitä, joilla on riski saada kolminkertainen toistuva sairaus. Lopuksi, tätä lähestymistapaa voidaan soveltaa kaikkiin monogeenisiin sairauksiin CFTC:iden eristysautomaatiolla äidin verestä.