NIPD na CFTC dla chorób potrójnych powtórzeń (DIACCIMEX)

Nieinwazyjna diagnostyka prenatalna (NIPD), oparta na analizie krążącego bezkomórkowego płodowego DNA (cff-DNA), jest bardzo obiecująca we wczesnej diagnostyce chorób monogenowych. Takie podejście jest bezpieczniejszą alternatywą dla inwazyjnych metod badań prenatalnych (amniopunkcja czy choriopunkcja), z którymi wiąże się znaczne ryzyko poronienia (0,5%-1%). Jednak kwestie techniczne związane z charakterystyką cff-DNA pozostają i nie pozwalają na poszukiwanie wszystkich mutacji, w szczególności mutacji ekspansji trojaczków, które dotyczą rzadkich i nieuleczalnych chorób (choroba Huntingtona, dystrofia miotoniczna Steinerta, zespół łamliwego chromosomu X, SCA1, 2 , 3). Rzeczywiście, silna fragmentacja i krótki rozmiar cff-DNA (143 pz) nie pozwalają na bezpośrednie wykrycie tych mutacji. Jednak zapytania o diagnostykę prenatalną (PND) dla tej grupy patologii stanowią drugie, po mukowiscydozie, najczęstsze wskazanie PND na poziomie krajowym (ABM 2013). Alternatywnym podejściem jest wykonanie analizy krążących płodowych komórek trofoblastycznych (CFTC) z krwi matki. Do wyizolowania CFTC z krwi matki zastosowano kilka metod. Jednak jak dotąd żaden test nie jest wystarczająco wiarygodny, aby rutynowe zastosowanie mogło zastąpić protokoły inwazyjne. Niedawno zoptymalizowano nowe systemy wzbogacania pod kątem krążących komórek nowotworowych (CTC) jako płynnej biopsji raka. Niektóre z tych nowych technologii można łatwo zastosować do izolacji i charakteryzacji CFTC. Celem tego badania jest uzupełnienie naszych usług NIPD poprzez opracowanie podejścia do CFTC dostosowanego do analizy chorób powtórzeń trojaczków, których nie można wykonać na cff-DNA.

Jest to wieloośrodkowe, prospektywne badanie oceniające działanie metody diagnostycznej. Badanymi będą kobiety w ciąży między 9 a 34 tygodniem ciąży oraz ich partner (przyszli ojcowie). Genotypy kobiety ciężarnej i przyszłego ojca (chorego lub zdrowego) są znane z jednej z następujących chorób: choroba Huntingtona, dystrofia miotoniczna Steinerta, zespół łamliwego chromosomu X oraz ataksja rdzeniowo-móżdżkowa typu 1, 2 lub 3. Głównym celem jest osiągnięcie zgodności pomiędzy złotym standardem (PND przez amniopunkcję lub choriopunkcję) a wynikami NIPD dla każdej ciężarnej biorącej udział w badaniu (brak lub obecność zmutowanego allelu).

Włączenie pary nastąpi w jednym z uczestniczących centrów genetyki medycznej podczas konsultacji genetycznej w przypadku ciąży zagrożonej jedną z wyżej wymienionych patologii.

Podczas tej wizyty zostanie wykonane pobranie krwi ciężarnej (próbka krwi pobrana na 3 x 10 ml BCT i 5 ml na EDTA) oraz przyszłego ojca (5 ml na EDTA). Czas trwania włączenia to czas wizyty. Pobieranie krwi kobiet w ciąży na wolne od komórek DNA „probówki do pobierania krwi” (BCT) w celu przesiewania CFTC zostanie skierowane do Laboratorium Ludzkich Rzadkich Komórek Krążących (LCCRH). Analiza molekularna CFTC wyizolowanego przez LCCRH oraz ekstrakcja i analiza genomowego DNA (z 5 ml krwi na EDTA) pary zostanie przeprowadzona przez Laboratorium Genetyki Molekularnej (LGM) mieszczące się w tym samym budynku (IURC – Szpital Uniwersytecki Montpellier).

Analiza przeprowadzona na podstawie prostego badania krwi matki pozwoli stwierdzić, czy przyszłe dziecko jest dotknięte chorobą dziedziczną, czy też nie. Dzięki temu nowemu podejściu do NIPD może dojść do 50% spadku stosowania metody inwazyjnej w przypadku PND. Analizę tę można zaproponować kobietom, u których płody są zagrożone chorobami powtórzeń trojaczków. Wreszcie, podejście to można zastosować do wszelkich chorób monogenowych poprzez automatyzację izolacji CFTC z krwi matki.