NIPD på CFTC for gjentatte triplettsykdommer (DIACCIMEX)

Ikke-invasiv prenatal diagnose (NIPD), basert på analyse av sirkulerende cellefritt føtalt DNA (cff-DNA) er svært lovende for tidlig diagnose av monogene sykdommer. En slik tilnærming er et sikrere alternativ til invasive metoder for prenatal testing (amniocentese eller choriocentese) som innebærer en betydelig risiko for spontanabort (0,5 %-1 %). Imidlertid gjenstår tekniske problemer knyttet til egenskapene til cff-DNA og tillater ikke søk etter alle mutasjonene, spesielt triplettekspansjonsmutasjoner som gjelder sjeldne og uhelbredelige sykdommer (Huntingtons sykdom, Steinert myotonisk dystrofi, Fragilt X-syndrom, SCA1, 2 , 3). Den sterke fragmenteringen og den korte størrelsen av cff-DNA (143 bp) tillater faktisk ikke direkte påvisning av disse mutasjonene. Forespørsler om prenatal diagnose (PND) for denne gruppen patologier representerer imidlertid den nest hyppigste PND-indikasjonen på nasjonalt nivå etter cystisk fibrose (ABM 2013). En alternativ tilnærming er å utføre analyser på sirkulerende føtale trofoblastiske celler (CFTC) fra mors blod. Flere metoder har blitt brukt for å isolere CFTC fra mors blod. Men til dags dato er ingen test pålitelig nok til at en rutineapplikasjon kan erstatte invasive protokoller. Nylig har nye anrikningssystemer blitt optimalisert for sirkulerende tumorceller (CTCs) som en flytende biopsi av kreft. Noen av disse nye teknologiene kan enkelt brukes til isolering og karakterisering av CFTC-er. Målet med denne studien er å fullføre våre NIPD-tjenester ved å utvikle en tilnærming på CFTC tilpasset analysen av tripletrepetisjonssykdommer, som ikke kan utføres på cff-DNA.

Det er en multisenter, prospektiv studie for ytelsesevaluering av en diagnostisk metode. De som inkluderes vil være gravide kvinner mellom 9 og 34 ukers svangerskap og deres partner (fremtidige fedre). Genotyper for gravide kvinner og fremtidige farer (syke eller friske) er kjent for en av følgende sykdommer: Huntingtons sykdom, Steinerts myotoniske dystrofi, skjøre X og spinocerebellar ataksier type 1, 2 eller 3. Hovedmålet oppnås ved samsvar mellom gullstandard (PND ved fostervannsprøve eller choriocentese) og NIPD-resultater for hver gravid kvinne som deltar i studien (fravær eller tilstedeværelse av den muterte allelen).

Parinkluderingen vil finne sted i et av de deltakende medisinske genetiske sentrene under genetisk rådgivningskonsultasjon for en graviditet med risiko for en av patologiene nevnt ovenfor.

Under dette besøket vil den gravides blodprøve (blodprøve tatt på 3 x 10 ml BCT og 5 ml på EDTA) og den fremtidige faren (5 ml på EDTA) bli tatt. Varigheten av inkluderingen er tidspunktet for besøket. Blodinnsamling av gravide kvinner på cellefritt DNA "Blood Collection Tubes" (BCT) for å screene CFTCs vil bli adressert til Human Rare Circulating Cells Laboratory (LCCRH). Den molekylære analysen av CFTC isolert av LCCRH samt den genomiske DNA-ekstraksjonen og analysen (fra 5 ml blod på EDTA) av paret vil bli utført av Laboratory of Molecular Genetics (LGM) lokalisert i samme bygning (IURC - Montpellier universitetssykehus).

Analysen utført på en enkel mors blodprøve vil tillate å avgjøre om det fremtidige barnet er påvirket eller ikke av den arvelige sykdommen. Med denne nye NIPD-tilnærmingen kan det være en nedgang på 50 % i bruken av den invasive metoden for PND. Denne analysen kan tilbys kvinner som bærer fostre med risiko for gjentatte triplettsykdommer. Til slutt kan denne tilnærmingen brukes på alle monogene sykdommer ved CFTCs isolasjonsautomatisering fra mors blod.