Přenos opičího pěnivého viru na člověka

DOSAVADNÍ STAV TECHNIKY Velká část, asi 75 %, virových činidel, která se nedávno objevila u lidí, pochází z jiných zvířat. Po počátečním kontaktu, který vedl k mezidruhovému přenosu, se tyto viry často vyvinuly a rozšířily lidskou populací; jsou zapojeny různé mechanismy, ale pochopení počátečních fází vzniku virů a přidružených onemocnění je v mnoha případech stále omezené.

Mikrobiologické monitorování v populacích ohrožených přenosem je nutné k identifikaci a dokumentaci iniciace a raných fází procesu vzniku.

Nelidští primáti (NPH), kteří sdílejí mnoho genetických, fyziologických a mikrobiologických podobností s lidmi, jsou potenciálním zdrojem mnoha infekčních agens.

To bylo jasně prokázáno u několika opičích retrovirů: HIV-1 a 2 jsou považovány za pocházející z virů šimpanzů a mangabey ve střední a západní Africe. Distribuce různých molekulárních subtypů onkogenního retroviru HTLV-1 v Africe je především výsledkem vzoru mezidruhového přenosu STLV-1 z různých druhů NHP v dávné minulosti.

Pěnivé viry patří do čeledi retrovidae a do rodu spumavirů. Jsou to komplexní exogenní retroviry a jsou velmi běžné u mnoha druhů zvířat, včetně primátů, koček, skotu a koní, u kterých způsobují přetrvávající infekce.

Pěnivé viry jsou obecně nepatogenní, a to i u experimentálně infikovaných zvířat. Zdá se, že nezpůsobují onemocnění u několika lidí, kteří byli náhodně infikováni a klinicky a biologicky sledováni dlouhodobě (dosud bylo sledováno méně než 15 lidí a byli původně zdraví, takže existuje selekční zkreslení). Absence patogenity in vivo kontrastuje se silnými cytopatogenními účinky pěnovitého viru in vitro, kde způsobují syncytia v buněčných kulturách.

Na rozdíl od lentivirů (HIV-SIV) jsou pěnivé viry extrémně geneticky stabilní in vivo. Fylogenetická analýza prokázala genetickou variabilitu v závislosti na infikovaném zvířecím druhu. To ukazuje na dlouhou koevoluci těchto retrovirů s jejich přirozenými hostiteli. Switzer et al., ukázali, že pěnivé viry se vyvíjely společně s primáty starého světa po dobu nejméně 30 milionů let (Switzer et al. 2005). Tato data mohou vysvětlit zjevnou nepřítomnost patogenity in vivo navzdory chronické infekci.

Molekulární charakteristiky pěnovitých virů byly rozsáhle studovány in vitro, ale v současné době je málo známo o charakteristikách těchto virů in vivo, a zejména o epidemiologických determinantech infekce. Způsoby kontaminace a charakteristiky primární infekce u lidí v přirozených podmínkách jsou stále špatně pochopeny.

Vzácná publikovaná epidemiologická data jsou většinou pro populace NHP v zajetí: séroprevalence pěnovitých virů může u dospělých v těchto populacích dosáhnout 75 % nebo více. Několik studií ukázalo, že sliny infikovaných zvířat mají vysoké titry viru, což naznačuje způsob přenosu. Sliznice orofaryngu je důležitým místem replikace u zelených opic a nedávný článek uvádí vysoké hladiny virové RNA ve slinách a orofaryngeálních vzorcích makaků. Tato pozorování naznačují, že kousnutí nebo kontakt s ústní sliznicí a slinami mohou být přenosovými mechanismy, alespoň v některých případech. Jiné studie na koloniích paviánů chovaných v zajetí naznačují, že přenos může být sexuální a/nebo z matky na dítě opakovaným kontaktem slinami.

Byla hlášena lidská infekce pěnivými viry: 1 až 4 % lidí profesionálně vystavených NHP (jako jsou veterináři a personál pracující ve zvířecích chovech, zoologických zahradách a primatologických laboratořích) v Severní Americe a vzácněji i v Evropě může být infikovaný.

Americká skupina prokázala infekci pěnivými viry pocházejícími z goril a mandril u některých lovců žijících v Kamerunu (Wolfe et al. 2004). Některé případy infekce byly prokázány u lidí v jihovýchodní Asii, kteří byli v kontaktu s opicemi (zejména s makaky): lidé pracující v chrámech, zejména v Indonésii, nebo zapojené do lovu nebo jiných činností, které je přivedly do těsného kontaktu s opicemi. Matematické modely odhadují, že přibližně šest z 1000 návštěvníků chrámu na Bali v Indonésii, kde žije mnoho makaků, bylo infikováno opičím pěnovitým virem (Engel et al. 2006).

Dlouhodobá spolupráce mezi vyšetřovateli, Pasteurovým centrem v Kamerunu, IRD a University of Yaounde I pomocí sérologických a molekulárních technik (PCR) prokázala pěnivé viry v divokých populacích goril, šimpanzů, mandril a vrtáků. v Kamerunu. Dospělé populace NHP v těchto oblastech jsou vysoce infikovány pěnivými viry, se specifickým virem pro každý druh (Calattini et al. 2004, Calattini et al. 2006b).

V souladu s výše citovanou americkou studií vyšetřovatelé prokázali infekci lovců pěnivými viry nalezenými u goril, šimpanzů a mandrilů poté, co byli v kontaktu s těmito primáty (Calattini et al. 2007).

Jednotka EPVO v Institut Pasteur již více než 15 let úzce spolupracuje s Pasteurovým centrem v Kamerunu a IRD na četných epidemiologických studiích v oblasti lidských retrovirů HTLV-1 (Mahieux et al. 2000b, Mauclere et al. . 1997), HTLV-2 (Gessain a kol. 1995, Mauclere a kol. 1995), opičí retroviry STLV-1 a STLV-3 (Mahieux a kol. 2000a, Meertens a kol. 2002, Meertens a kol. 2001, 2001, 3. Meertens a kol. 2003, Nerrienet a kol. 2004, Nerrienet a kol. 2001) a HTLV-3 (Calattini a kol. 2009, Calattini a kol. 2006a, Calattini a kol. 2005).

Studované lidské populace jsou primárně v jižním Kamerunu. Vyšetřovatelé se budou i nadále zaměřovat na několik populací jižního Kamerunu, aby získali další informace o rizikových faktorech pro získání pěnivých retrovirů po kontaktu s NHP.

Tyto populace žijí blízko nebo v oblastech s hustým deštným pralesem. Jsou zvláště ohroženy kvůli vysoké biologické rozmanitosti NHP v těchto regionech. Největší riziko představuje poměrně častý kontakt s NHP při lovu, který je jak pro konzumaci, tak pro prodej bushmeatu.

CÍLE Zde prezentovaný projekt se skládá ze čtyř fází. Tyto fáze mohou být prováděny současně.

Základní cíl (fáze 1 a 2) Účelem této práce je provést sérologický a molekulární průzkum za účelem posouzení prevalence infekce virem pěny u osob ohrožených kontaktem s opicemi a charakterizovat rizikové faktory mezidruhového přenosu.

Tento projekt odpovídá mikrobiologickému monitoringu a zejména studiu prvních fází vzniku viru.

Sekundární cíle (fáze 3 a 4)

1. Prozkoumejte možný intrafamiliární přenos pěnovitých virů z indexových případů, kteří všichni získali virus pokousáním lidoopem.
2. Prozkoumejte možné biologické (zejména imunovirologické) a klinické abnormality u infikovaných jedinců prostřednictvím případové kontrolní studie. To bude vyžadovat minimálně 30 případů indexu a 30 až 60 kontrol, pokud je to možné.

ORGANIZACE STUDIE Hodnota a význam této práce o virovém vzniku bude představena jak správním, tak tradičním (náčelníkům vesnice) místním úřadům. Vyšetřovatelé budou pracovat ve třech regionech jižního Kamerunu: v pobřežním regionu (Bipindi/Lolodorf/Campo), v centrální oblasti (Djoum/Oveng/Mintom/Akonolinga/Somolamo) a na východě v regionu Abong-Mang, Lomié a Messok.

V těchto zalesněných oblastech vyšetřovatelé pracují v bantuských vesnicích (Ngoumba, Fang, Mvae, Zimé atd.) a se dvěma různými populacemi Pygmejů, Bakolů na Západě a Bakasů na Východě.

Informace jsou poskytovány každému jednotlivci a lékaři shromažďují písemný souhlas všech účastníků.

V 1. fázi projektu je studie navržena všem dospělým. Neexistuje žádný výběr. Provede se fyzikální vyšetření a odběr krve do 5/10 ml EDTA zkumavky.

Ve fázi 2 budou vyšetřovatelé konkrétně vyhledávat dospělé, kteří byli během svého života v kontaktu s NHP. Tyto kontakty mohou zahrnovat kousnutí, škrábance nebo jiná zranění během lovu nebo náhodná setkání s NHP. Provede se vyšetření a odběr krve do zkumavky 5/10 ml EDTA. Epidemiologické údaje o rizikových faktorech jsou shromažďovány prostřednictvím krátkého dotazníku.

Ve fázi 3 provedou vyšetřovatelé druhou návštěvu, aby rozšířili průzkum na nukleární rodinu infikovaných jedinců (manžel/ka a děti). Provede se vyšetření a odběr krve do 5/10 ml EDTA zkumavky (tabulka 1).

Během fáze 4 budou provedena další klinická a biologická vyšetření infikovaných jedinců v Pasteurově centru v Kamerunu v Yaoundé (4. fáze). Během této návštěvy se odebírají sliny. Orální vzorky budou odebrány potřením vnitřní strany tváře tampónem a poté opláchnutím úst a zachycením výplachové tekutiny do sterilní lahvičky. Krev bude odebrána pro další studie. Ubytování v Yaoundé, dopravu a stravování účastníků bude hrazeno EPVO.

Rodinná studie k odhalení možného přenosu viru a klinická a biologická případová-kontrolní studie budou provedeny během druhé fáze, pokud bude během prvního séroepidemiologického a virologického průzkumu zjištěn dostatek infikovaných osob.

Oddělení EPVO v Institut Pasteur je plně odpovědné za organizaci a provádění terénních prací s logistickou podporou IRD (pronájem vozidla s řidičem) a CPC (příjem ve virologické laboratoři). Prof Antoine Gessain koordinuje projekt v Paříži a Kamerunu a Dr. Edouard Betsem organizuje práci v Kamerunu.

Vzorky jsou rozděleny do alikvotů. Dva alikvoty plazmy a preparátu periferní krve se zmrazí v Pasteurově centru v Kamerunu. V některých případech budou mononukleární buňky periferní krve získány na Ficoll a poté kultivovány.

Tyto vzorky jsou poté odeslány do Institutu Pasteur v Paříži letecky, podle aktuálních přepravních norem.

Po návratu do Paříže provádějí členové jednotky EPVO biologické testy a statistické analýzy.