Transmisión del virus espumoso de los simios a los humanos

ANTECEDENTES Una gran proporción, alrededor del 75%, de los agentes virales que han surgido recientemente en humanos se han originado en otros animales. Después del contacto inicial que resultó en la transmisión entre especies, estos virus a menudo han evolucionado y se han propagado entre la población humana; varios mecanismos están involucrados, pero la comprensión de las etapas iniciales de la aparición de virus y enfermedades asociadas todavía es limitada en muchos casos.

Se requiere monitoreo microbiológico en poblaciones en riesgo de transmisión para identificar y documentar el inicio y las primeras etapas del proceso de emergencia.

Los primates no humanos (NPH), que comparten muchas similitudes genéticas, fisiológicas y microbiológicas con los humanos, son una fuente potencial de muchos agentes infecciosos.

Esto se ha demostrado claramente en varios retrovirus de simios: se cree que el VIH-1 y 2 se originaron a partir de los virus del chimpancé y del mangabey, respectivamente, en África central y occidental. La distribución de los diversos subtipos moleculares del retrovirus oncogénico HTLV-1 en África es principalmente el resultado del patrón de transmisión entre especies de STLV-1 de varias especies de NHP en el pasado distante.

Los virus espumosos pertenecen a la familia retrovidae y al género spumavirus. Son retrovirus exógenos complejos y son muy comunes en muchas especies animales, incluidos primates, gatos, ganado y caballos, en los que causan infecciones persistentes.

Los virus espumosos generalmente no son patógenos, incluso en animales infectados experimentalmente. No parecen causar enfermedades en los pocos humanos que se infectaron accidentalmente y se les hizo un seguimiento clínico y biológico a largo plazo (hasta la fecha se ha seguido a menos de 15 personas y originalmente estaban sanas, de modo que existe un sesgo de selección). La ausencia de patogenicidad in vivo contrasta con los fuertes efectos citopatógenos del virus espumoso in vitro donde provocan sincitios en cultivos celulares.

A diferencia de los lentivirus (VIH-SIV), los virus espumosos son extremadamente estables genéticamente in vivo. El análisis filogenético ha demostrado la variabilidad genética, dependiendo de la especie animal infectada. Esto indica una larga coevolución de estos retrovirus con sus huéspedes naturales. Switzer et al. demostraron que los virus espumosos han coevolucionado con los primates del viejo mundo durante al menos 30 millones de años (Switzer et al. 2005). Estos datos pueden explicar la aparente ausencia de patogenicidad in vivo a pesar de la infección crónica.

Las características moleculares de los virus espumosos se han estudiado extensamente in vitro, pero actualmente se sabe poco sobre las características de estos virus in vivo y, en particular, sobre los determinantes epidemiológicos de la infección. De hecho, los modos de contaminación y las características de la infección primaria en humanos en condiciones naturales aún no se conocen bien.

Los escasos datos epidemiológicos publicados corresponden principalmente a poblaciones de PNH en cautiverio: la seroprevalencia de los virus espumosos puede alcanzar el 75 % o más en los adultos de estas poblaciones. Varios estudios han demostrado que la saliva de animales infectados tiene títulos altos del virus, lo que sugiere el modo de transmisión. La mucosa de la orofaringe es un sitio importante de replicación en los monos verdes y un artículo reciente informa altos niveles de ARN viral en muestras de saliva y orofaringe de macacos. Estas observaciones sugieren que las mordeduras o el contacto con la mucosa oral y la saliva pueden ser mecanismos de transmisión, al menos en algunos casos. Otros estudios en colonias de babuinos en cautiverio sugieren que la transmisión puede ser sexual y/o de madre a hijo a través del contacto salival repetido.

Se ha informado infección humana con virus espumosos: 1 a 4% de las personas expuestas profesionalmente a NHP (como veterinarios y personal que trabaja en casas de animales, zoológicos y laboratorios de primatología) en América del Norte y, más raramente, en Europa pueden estar infectado.

Un grupo estadounidense ha demostrado infección por virus espumosos, originados en gorilas y mandriles, en algunos cazadores que viven en Camerún (Wolfe et al. 2004). Se han demostrado algunos casos de infección en personas del sudeste asiático en contacto con monos (especialmente macacos): personas que trabajan en templos, especialmente en Indonesia, o que participan en la caza u otras actividades que los ponen en contacto cercano con monos. Los modelos matemáticos han estimado que aproximadamente seis de cada 1000 visitantes del templo en Bali, Indonesia, donde hay muchos macacos, han sido infectados con un virus espumoso simio (Engel et al. 2006).

La colaboración a largo plazo entre los investigadores, el Centro Pasteur de Camerún, el IRD y la Universidad de Yaundé I, utilizando técnicas serológicas y moleculares (PCR), ha demostrado virus espumosos en poblaciones salvajes de gorilas, chimpancés, mandriles y taladros. en Camerún Las poblaciones adultas de NHP en estas regiones están altamente infectadas con virus espumosos, con un virus específico para cada especie (Calattini et al. 2004, Calattini et al. 2006b).

De acuerdo con el estudio estadounidense citado anteriormente, los investigadores han demostrado la infección de cazadores por los virus espumosos que se encuentran en gorilas, chimpancés y mandriles después de haber estado en contacto con estos primates (Calattini et al. 2007).

La unidad EPVO del Institut Pasteur ha estado trabajando en estrecha colaboración con el Centro Pasteur de Camerún y el IRD durante más de 15 años en numerosos estudios epidemiológicos en el campo de los retrovirus humanos HTLV-1 (Mahieux et al. 2000b, Mauclere et al. . 1997), HTLV-2 (Gessain et al. 1995, Mauclere et al. 1995), los retrovirus de los simios STLV-1 y STLV-3 (Mahieux et al. 2000a, Meertens et al. 2002, Meertens et al. 2001, Meertens et al. 2003, Nerrienet et al. 2004, Nerrienet et al. 2001) y HTLV-3 (Calattini et al. 2009, Calattini et al. 2006a, Calattini et al. 2005).

Las poblaciones humanas estudiadas se encuentran principalmente en el sur de Camerún. Los investigadores continuarán centrándose en varias poblaciones del sur de Camerún para recopilar más información sobre los factores de riesgo para la adquisición de retrovirus espumosos tras el contacto con NHP.

Estas poblaciones viven cerca o en áreas densas de selva tropical. Están particularmente en riesgo, debido a la gran biodiversidad de los PNH en estas regiones. El mayor riesgo proviene del contacto relativamente frecuente con los NHP durante la caza, que es tanto para el consumo como para la venta de carne de animales silvestres.

OBJETIVOS El proyecto que aquí se presenta consta de cuatro fases. Estas fases pueden llevarse a cabo simultáneamente.

Objetivo principal (fases 1 y 2) El propósito de este trabajo es realizar un estudio serológico y molecular para evaluar la prevalencia de la infección por el virus de la espuma en personas en riesgo de contacto con monos y caracterizar los factores de riesgo para la transmisión entre especies.

Este proyecto corresponde al seguimiento microbiológico y, en particular, al estudio de los primeros estadios de emergencia viral.

Objetivos secundarios (fases 3 y 4)

1. Investigar la posible transmisión intrafamiliar de virus espumosos de casos índice, quienes adquirieron el virus al ser mordidos por un gran simio.
2. Investigar posibles anomalías biológicas (especialmente inmunovirológicas) y clínicas en individuos infectados a través de un estudio de casos y controles. Esto requerirá un mínimo de 30 casos índice y de 30 a 60 controles, si es posible.

ORGANIZACIÓN DEL ESTUDIO El valor y la importancia de este trabajo sobre emergencia viral se presentarán a las autoridades locales tanto administrativas como tradicionales (jefes de aldea). Los investigadores trabajarán en tres regiones del sur de Camerún: la región costera (Bipindi/Lolodorf/Campo), una región más central (Djoum/Oveng/Mintom/Akonolinga/Somolamo), y en el Este en la región de Abong-Mang, Lomié y Messok.

En estas áreas boscosas, los investigadores trabajan en pueblos bantúes (Ngoumba, Fang, Mvae, Zimé, etc.) y con las dos poblaciones diferentes de pigmeos, los bakolas en el oeste y los bakas en el este.

La información se proporciona a cada individuo y el consentimiento por escrito de todos los participantes recogido por los médicos.

En la Fase 1 del proyecto, el estudio se propone a todos los adultos. No hay selección. Se realiza un examen físico y extracción de sangre en un tubo con EDTA de 5/10 ml.

En la Fase 2, los investigadores buscarán específicamente adultos que hayan estado en contacto con un NHP durante su vida. Estos contactos pueden incluir mordeduras, rasguños u otras lesiones durante la caza o encuentros casuales con NHP. Se realiza un examen y extracción de sangre en un tubo con EDTA de 5/10 ml. Los datos epidemiológicos sobre factores de riesgo se recogen a través de un breve cuestionario.

En la Fase 3, los investigadores realizarán una segunda visita para extender la encuesta al núcleo familiar de las personas infectadas (cónyuge e hijos). Se realiza un examen y extracción de sangre en un tubo con EDTA de 5/10 ml (Tabla 1).

Durante la Fase 4, se realizarán exámenes clínicos y biológicos adicionales a las personas infectadas en el Centro Pasteur de Camerún en Yaundé (Fase 4). Durante esta visita, se recolecta la saliva. Las muestras orales se recolectarán frotando el interior de la mejilla con un hisopo y luego enjuagando la boca y recolectando el líquido de enjuague en una botella estéril. Se recolectará sangre para estudios posteriores. EPVO cubrirá el alojamiento en Yaoundé, el transporte y las comidas de los sujetos.

El estudio familiar para detectar la posible transmisión del virus, y el estudio clínico y biológico de casos y controles, se realizarán durante la segunda fase, si se detectan suficientes personas infectadas durante la primera encuesta seroepidemiológica y virológica.

La unidad EPVO del Institut Pasteur es totalmente responsable de la organización y ejecución del trabajo de campo con el apoyo logístico del IRD (alquiler de un vehículo con conductor) y del CPC (recepción en el laboratorio de virología). El Prof. Antoine Gessain coordina el proyecto en París y Camerún, y el Dr. Edouard Betsem organiza el trabajo en Camerún.

Las muestras se alicuotan. Dos alícuotas de plasma y una preparación de capa leucocítica de sangre periférica se congelan en el Centro Pasteur de Camerún. En algunos casos, las células mononucleares de sangre periférica se obtendrán en Ficoll y luego se cultivarán.

Estas muestras se envían luego al Institut Pasteur de París por vía aérea, de acuerdo con las normas de transporte vigentes.

De vuelta en París, los miembros de la unidad EPVO realizan pruebas biológicas y análisis estadísticos.