Transmissão do vírus espumoso símio para humanos

ANTECEDENTES Uma grande proporção, cerca de 75%, dos agentes virais que surgiram recentemente em humanos originaram-se de outros animais. Após o contato inicial resultando na transmissão interespécies, esses vírus muitas vezes evoluíram e se espalharam pela população humana; vários mecanismos estão envolvidos, mas a compreensão dos estágios iniciais do surgimento de vírus e doenças associadas ainda é limitada em muitos casos.

O monitoramento microbiológico em populações em risco de transmissão é necessário para identificar e documentar o início e os estágios iniciais do processo de emergência.

Primatas não humanos (NPHs), que compartilham muitas semelhanças genéticas, fisiológicas e microbiológicas com humanos, são uma fonte potencial de muitos agentes infecciosos.

Isso foi claramente demonstrado para vários retrovírus símios: acredita-se que o HIV-1 e 2 tenham se originado de vírus de chimpanzé e mangabey, respectivamente, na África Central e Ocidental. A distribuição dos vários subtipos moleculares do retrovírus oncogênico HTLV-1 na África é principalmente o resultado do padrão de transmissão interespécies de STLV-1 de várias espécies de NHP no passado distante.

Os vírus espumosos pertencem à família retrovidae e ao gênero spumavirus. São retrovírus exógenos complexos e muito comuns em muitas espécies animais, incluindo primatas, gatos, bovinos e equinos, nos quais causam infecções persistentes.

Os vírus espumosos geralmente não são patogênicos, mesmo em animais infectados experimentalmente. Eles não parecem causar doenças nos poucos humanos que foram infectados acidentalmente e acompanhados clínica e biologicamente a longo prazo (menos de 15 pessoas foram acompanhadas até o momento e eram originalmente saudáveis, de modo que há um viés de seleção). A ausência de patogenicidade in vivo contrasta com os fortes efeitos citopatogênicos do vírus espumoso in vitro, onde causam sincícios em culturas celulares.

Ao contrário dos lentivírus (HIV-SIV), os vírus espumosos são extremamente estáveis ​​geneticamente in vivo. A análise filogenética demonstrou variabilidade genética, dependendo da espécie animal infectada. Isso indica uma longa coevolução desses retrovírus com seus hospedeiros naturais. Switzer et al., mostraram que os vírus espumosos coevoluíram com primatas do velho mundo por pelo menos 30 milhões de anos (Switzer et al. 2005). Esses dados podem explicar a aparente ausência de patogenicidade in vivo, apesar da infecção crônica.

As características moleculares dos vírus espumosos têm sido extensivamente estudadas in vitro, mas pouco se sabe atualmente sobre as características desses vírus in vivo e, em particular, sobre os determinantes epidemiológicos da infecção. De fato, os modos de contaminação e as características da infecção primária em humanos em condições naturais ainda são pouco compreendidos.

Os raros dados epidemiológicos publicados são principalmente para populações de PNHs cativos: a soroprevalência de vírus espumosos pode chegar a 75% ou mais em adultos nessas populações. Vários estudos demonstraram que a saliva de animais infectados apresenta altos títulos do vírus, sugestivos do modo de transmissão. A mucosa da orofaringe é um importante local de replicação em macacos verdes e um artigo recente relata altos níveis de RNA viral na saliva e espécimes orofaríngeos de macacos. Essas observações sugerem que mordidas ou contato com mucosa oral e saliva podem ser mecanismos de transmissão, pelo menos em alguns casos. Outros estudos em colônias de babuínos cativos sugerem que a transmissão pode ser sexual e/ou de mãe para filho através do contato salivar repetido.

Infecção humana com vírus espumosos foi relatada: 1 a 4% das pessoas expostas profissionalmente ao NHP (como veterinários e funcionários que trabalham em biotérios, zoológicos e laboratórios de primatologia) na América do Norte e, mais raramente, na Europa podem ser infetado.

Um grupo americano mostrou infecção por vírus espumosos, originários de gorilas e mandris, em alguns caçadores que vivem em Camarões (Wolfe et al. 2004). Alguns casos de infecção foram demonstrados em pessoas no sudeste da Ásia em contato com macacos (especialmente macacos): pessoas que trabalham em templos, especialmente na Indonésia, ou envolvidas em caça ou outras atividades que as colocam em contato próximo com macacos. Modelos matemáticos estimaram que aproximadamente seis em cada 1.000 visitantes do templo em Bali, Indonésia, onde há muitos macacos, foram infectados com um vírus símio espumoso (Engel et al. 2006).

A colaboração de longo prazo entre os investigadores, o Centro Pasteur de Camarões, o IRD e a Universidade de Yaounde I, usando técnicas sorológicas e moleculares (PCR), demonstrou vírus espumosos em populações selvagens de gorilas, chimpanzés, mandris e brocas em Camarões. Populações adultas de PNHs nessas regiões são altamente infectadas com vírus espumosos, com um vírus específico para cada espécie (Calattini et al. 2004, Calattini et al. 2006b).

Consistente com o estudo americano citado acima, os investigadores demonstraram a infecção de caçadores pelos vírus espumosos encontrados em gorilas, chimpanzés e mandris após terem estado em contato com esses primatas (Calattini et al. 2007).

A unidade EPVO no Institut Pasteur tem trabalhado em estreita colaboração com o Centro Pasteur de Camarões e o IRD por mais de 15 anos em numerosos estudos epidemiológicos no campo dos retrovírus humanos HTLV-1 (Mahieux et al. 2000b, Mauclere et al . 1997), HTLV-2 (Gessain et al. 1995, Mauclere et al. 1995), os retrovírus símios STLV-1 e STLV-3 (Mahieux et al. 2000a, Meertens et al. 2002, Meertens et al. 2001, Meertens et al. 2003, Nerrienet et al. 2004, Nerrienet et al. 2001) e HTLV-3 (Calattini et al. 2009, Calattini et al. 2006a, Calattini et al. 2005).

As populações humanas estudadas são principalmente no sul dos Camarões. Os investigadores continuarão a se concentrar em várias populações do sul de Camarões para coletar mais informações sobre os fatores de risco para a aquisição de retrovírus espumosos após contato com NHPs.

Essas populações vivem próximas ou em áreas densas de floresta tropical. Eles estão particularmente em risco, devido à alta biodiversidade de PNHs nessas regiões. O maior risco advém do contacto relativamente frequente com PNHs durante a caça, tanto para consumo como para venda de carne de animais selvagens.

OBJETIVOS O projeto aqui apresentado é composto por quatro fases. Estas fases podem ser realizadas simultaneamente.

Objetivo principal (fases 1 e 2) O objetivo deste trabalho é realizar um levantamento sorológico e molecular para avaliar a prevalência da infecção por vírus espumoso em pessoas com risco de contato com macacos e caracterizar fatores de risco para transmissão interespécies.

Este projeto corresponde à monitorização microbiológica e, em particular, ao estudo das primeiras fases da emergência viral.

Objetivos secundários (fases 3 e 4)

1. Investigue a possível transmissão intrafamiliar de vírus espumosos de casos índices, todos os quais adquiriram o vírus ao serem mordidos por um grande símio.
2. Investigar possíveis anormalidades biológicas (especialmente imunovirológicas) e clínicas em indivíduos infectados por meio de um estudo de caso-controle. Isso exigirá um mínimo de 30 casos-índice e 30 a 60 controles, se possível.

ORGANIZAÇÃO DO ESTUDO O valor e a importância deste trabalho sobre a emergência viral serão apresentados às autoridades locais administrativas e tradicionais (chefe de aldeia). Os investigadores trabalharão em três regiões do sul dos Camarões: na região costeira (Bipindi/Lolodorf/Campo), numa região mais central (Djoum/Oveng/Mintom/Akonolinga/Somolamo), e no leste na região de Abong-Mang, Lomié e Messok.

Nestas áreas florestais, os investigadores trabalham em aldeias Bantu (Ngoumba, Fang, Mvae, Zimé, etc.) e com as duas populações diferentes de Pigmeus, os Bakolas no Ocidente e os Bakas no Oriente.

As informações são fornecidas a cada indivíduo e o consentimento por escrito de todos os participantes é coletado pelos médicos.

Na Fase 1 do projeto, o estudo é proposto a todos os adultos. Não há seleção. Um exame físico e coleta de sangue em um tubo de 5/10 ml de EDTA são realizados.

Na Fase 2, os investigadores procurarão especificamente por adultos que estiveram em contato com um NHP durante sua vida. Esses contatos podem incluir mordidas, arranhões ou outros ferimentos durante a caça ou encontros casuais com NHPs. Um exame e coleta de sangue em um tubo de 5/10 ml de EDTA são realizados. Os dados epidemiológicos sobre os fatores de risco são coletados por meio de um breve questionário.

Na Fase 3, os investigadores farão uma segunda visita para estender a pesquisa ao núcleo familiar dos indivíduos infectados (cônjuge e filhos). Um exame e coleta de sangue em um tubo de 5/10 ml de EDTA são realizados (Tabela 1).

Durante a Fase 4, exames clínicos e biológicos adicionais serão realizados em indivíduos infectados no Centro Pasteur de Camarões em Yaoundé (Fase 4). Durante esta visita, a saliva é coletada. As amostras orais serão coletadas esfregando o interior da bochecha com um cotonete e, em seguida, enxaguando a boca e coletando o líquido de enxágue em um frasco estéril. O sangue será coletado para estudos posteriores. Alojamento em Yaoundé, transporte e alimentação dos participantes serão cobertos pelo EPVO.

O estudo familiar para detectar a possível transmissão do vírus e o estudo clínico e biológico de caso-controle serão realizados na segunda fase, se forem detectados um número suficiente de infectados durante o primeiro inquérito soroepidemiológico e virológico.

A organização e execução do trabalho de campo é integralmente da responsabilidade da unidade EPVO do Institut Pasteur, com apoio logístico do IRD (aluguer de viatura com motorista) e do CPC (recepção no laboratório de virologia). O Prof. Antoine Gessain coordena o projeto em Paris e Camarões, e o Dr. Edouard Betsem organiza o trabalho em Camarões.

As amostras são aliquotadas. Duas alíquotas de plasma e uma preparação de revestimento leucocitário de sangue periférico são congeladas no Centro Pasteur em Camarões. Em alguns casos, as células mononucleares do sangue periférico serão obtidas em Ficoll e depois cultivadas.

Essas amostras são então enviadas por via aérea ao Institut Pasteur em Paris, de acordo com as normas de transporte vigentes.

De volta a Paris, testes biológicos e análises estatísticas são realizados por membros da unidade EPVO.