Передача обезьяньего пенистого вируса человеку

Предшествующий уровень техники Большая часть, около 75%, вирусных агентов, появившихся в последнее время у людей, произошли от других животных. После первоначального контакта, приведшего к межвидовой передаче, эти вирусы часто развивались и распространялись среди людей; задействованы различные механизмы, но понимание начальных стадий возникновения вирусов и связанных с ними заболеваний во многих случаях все еще ограничено.

Микробиологический мониторинг в популяциях, подверженных риску передачи, необходим для выявления и документирования начала и ранних стадий процесса возникновения.

Нечеловекообразные приматы (NPH), которые имеют много генетического, физиологического и микробиологического сходства с людьми, являются потенциальным источником многих инфекционных агентов.

Это было ясно продемонстрировано для нескольких обезьяньих ретровирусов: считается, что ВИЧ-1 и 2 произошли от вирусов шимпанзе и мангабея, соответственно, в Центральной и Западной Африке. Распространение различных молекулярных подтипов онкогенного ретровируса HTLV-1 в Африке в основном является результатом межвидовой передачи STLV-1 от различных видов NHP в далеком прошлом.

Пенистые вирусы относятся к семейству retrovidae и роду spumavirus. Это сложные экзогенные ретровирусы, которые очень часто встречаются у многих видов животных, включая приматов, кошек, крупный рогатый скот и лошадей, у которых они вызывают стойкие инфекции.

Пенистые вирусы, как правило, непатогенны даже у экспериментально зараженных животных. По-видимому, они не вызывают заболевания у тех немногих людей, которые были случайно инфицированы и находились под длительным клиническим и биологическим наблюдением (на сегодняшний день наблюдалось менее 15 человек, и они изначально были здоровы, так что существует систематическая ошибка отбора). Отсутствие патогенности in vivo контрастирует с сильным цитопатогенным действием пенистых вирусов in vitro, когда они вызывают синцитии в клеточных культурах.

В отличие от лентивирусов (ВИЧ-СИВ), пенистые вирусы чрезвычайно генетически стабильны in vivo. Филогенетический анализ продемонстрировал генетическую изменчивость в зависимости от вида инфицированных животных. Это указывает на длительную коэволюцию этих ретровирусов с их естественными хозяевами. Switzer et al. показали, что пенистые вирусы эволюционировали совместно с приматами Старого Света в течение как минимум 30 миллионов лет (Switzer et al. 2005). Эти данные могут объяснить явное отсутствие патогенности in vivo, несмотря на хроническую инфекцию.

Молекулярные характеристики пенистых вирусов широко изучались in vitro, но в настоящее время мало что известно о характеристиках этих вирусов in vivo и, в частности, об эпидемиологических детерминантах инфекции. Действительно, пути заражения и особенности первичного заражения человека в естественных условиях до сих пор мало изучены.

Редкие опубликованные эпидемиологические данные в основном относятся к популяциям NHP, содержащихся в неволе: серопревалентность пенистых вирусов может достигать 75% и более у взрослых в этих популяциях. Несколько исследований показали, что слюна инфицированных животных имеет высокие титры вируса, что указывает на способ передачи. Слизистая оболочка ротоглотки является важным местом репликации у зеленых мартышек, и в недавней статье сообщается о высоких уровнях вирусной РНК в образцах слюны и ротоглотки макак. Эти наблюдения предполагают, что укусы или контакт со слизистой оболочкой полости рта и слюной могут быть механизмами передачи, по крайней мере, в некоторых случаях. Другие исследования колоний бабуинов, содержащихся в неволе, показывают, что передача может быть половым путем и/или от матери к ребенку через повторный слюнный контакт.

Сообщалось о заражении человека пенистыми вирусами: от 1 до 4% людей, профессионально контактировавших с NHP (например, ветеринары и персонал, работающий в вивариях, зоопарках и приматологических лабораториях) в Северной Америке и, реже, в Европе, могут быть зараженный.

Американская группа продемонстрировала заражение пенистыми вирусами, происходящими от горилл и мандрилов, у некоторых охотников, живущих в Камеруне (Wolfe et al. 2004). Некоторые случаи заражения были продемонстрированы у людей в Юго-Восточной Азии, контактировавших с обезьянами (особенно макаками): у людей, работающих в храмах, особенно в Индонезии, или занимающихся охотой или другими видами деятельности, которые приводят к тесному контакту с обезьянами. Математические модели подсчитали, что примерно шесть из 1000 посетителей храма на Бали, Индонезия, где обитает много макак, были инфицированы обезьяньим пенистым вирусом (Engel et al. 2006).

Долгосрочное сотрудничество между исследователями, Пастеровским центром Камеруна, IRD и Университетом Яунде I с использованием серологических и молекулярных методов (ПЦР) продемонстрировало пенные вирусы в диких популяциях горилл, шимпанзе, мандрилов и дрели. в Камеруне. Взрослые популяции NHP в этих регионах сильно инфицированы пенистыми вирусами, специфическими для каждого вида вирусами (Calattini et al. 2004, Calattini et al. 2006b).

В соответствии с упомянутым выше американским исследованием исследователи продемонстрировали заражение охотников пенистыми вирусами, обнаруженными у горилл, шимпанзе и мандрилов, после контакта с этими приматами (Calattini et al. 2007).

Подразделение EPVO в Институте Пастера более 15 лет работает в тесном сотрудничестве с Камерунским центром Пастера и IRD над многочисленными эпидемиологическими исследованиями человеческих ретровирусов HTLV-1 (Mahieux et al. 2000b, Mauclere et al. . 1997), HTLV-2 (Gessain et al. 1995, Mauclere et al. 1995), ретровирусы обезьян STLV-1 и STLV-3 (Mahieux et al. 2000a, Meertens et al. 2002, Meertens et al. 2001, Меертенс и др., 2003 г., Неринет и др., 2004 г., Неринет и др., 2001 г.) и HTLV-3 (Калаттини и др., 2009 г., Калаттини и др., 2006a, Калаттини и др., 2005 г.).

Изученные человеческие популяции проживают в основном на юге Камеруна. Исследователи продолжат работу над несколькими группами населения южного Камеруна, чтобы собрать дополнительную информацию о факторах риска заражения пенистыми ретровирусами после контакта с NHP.

Эти популяции живут недалеко от густых тропических лесов или в них. Они особенно подвержены риску из-за высокого биоразнообразия NHP в этих регионах. Наибольший риск связан с относительно частыми контактами с NHP во время охоты, которая предназначена как для потребления, так и для продажи мяса диких животных.

ЦЕЛИ Представленный здесь проект состоит из четырех этапов. Эти этапы могут выполняться одновременно.

Основная цель (этапы 1 и 2) Целью данной работы является проведение серологического и молекулярного обследования для оценки распространенности пенистой вирусной инфекции у людей, подверженных риску контакта с обезьянами, и характеристики факторов риска межвидовой передачи.

Этот проект соответствует микробиологическому мониторингу и, в частности, изучению первых стадий возникновения вирусов.

Второстепенные цели (этапы 3 и 4)

1. Изучите возможную внутрисемейную передачу пенистых вирусов от индексных случаев, которые все заразились вирусом в результате укуса большой обезьяны.
2. Расследовать возможные биологические (особенно иммуно-вирусологические) и клинические отклонения у инфицированных лиц с помощью исследования случай-контроль. Для этого потребуется как минимум 30 индексных случаев и от 30 до 60 контрольных, если это возможно.

ОРГАНИЗАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ Ценность и важность этой работы по эмерджентности вирусов будет представлена ​​как административным, так и традиционным (сельским старостам) местным властям. Исследователи будут работать в трех регионах южного Камеруна: прибрежном районе (Бипинди/Лолодорф/Кампо), более центральном районе (Джум/Овенг/Минтом/Аконолинга/Сомоламо) и на востоке в районе Абонг-Манг. Ломие и Мессок.

В этих лесных районах следователи работают в деревнях банту (Нгумба, Фанг, Мвае, Зиме и т. д.) и с двумя разными популяциями пигмеев: бакола на западе и бака на востоке.

Информация предоставляется каждому человеку и с письменного согласия всех участников собирается врачами.

На этапе 1 проекта исследование предлагается всем взрослым. Выбора нет. Проводят физикальное обследование и забор крови в пробирку с ЭДТА объемом 5/10 мл.

На этапе 2 исследователи будут специально искать взрослых, которые были в контакте с NHP в течение своей жизни. Эти контакты могут включать укусы, царапины или другие травмы во время охоты или случайные встречи с NHP. Проводят осмотр и забор крови в пробирку с ЭДТА 5/10 мл. Эпидемиологические данные о факторах риска собираются с помощью короткой анкеты.

На этапе 3 исследователи проведут второй визит, чтобы расширить обследование нуклеарной семьи инфицированных лиц (супруга и дети). Проводят осмотр и забор крови в пробирку с ЭДТА 5/10 мл (табл. 1).

На этапе 4 будут проведены дополнительные клинические и биологические исследования инфицированных лиц в Пастеровском центре Камеруна в Яунде (этап 4). Во время этого посещения собирают слюну. Оральные образцы будут собираться путем протирания внутренней части щеки тампоном, а затем полоскания рта и сбора жидкости для полоскания в стерильную бутылку. Кровь будет взята для дальнейших исследований. Проживание в Яунде, транспорт и питание участников будут покрыты EPVO.

Семейное исследование для выявления возможной передачи вируса, а также клинико-биологическое исследование методом «случай-контроль» будет проведено на втором этапе, если в ходе первого серо-эпидемиологического и вирусологического обследования будет выявлено достаточное количество инфицированных.

Подразделение EPVO в Институте Пастера несет полную ответственность за организацию и выполнение полевых работ при материально-технической поддержке со стороны IRD (аренда автомобиля с водителем) и CPC (прием в вирусологической лаборатории). Профессор Антуан Жессен координирует проект в Париже и Камеруне, а д-р Эдуард Бетсем организует работу в Камеруне.

Образцы делят на аликвоты. Две аликвоты плазмы и препарат лейкоцитарной пленки периферической крови замораживают в Центре Пастера в Камеруне. В некоторых случаях мононуклеарные клетки периферической крови получают на фиколле, а затем культивируют.

Затем эти образцы отправляются в Институт Пастера в Париже самолетом в соответствии с действующими транспортными стандартами.

Вернувшись в Париж, сотрудники подразделения EPVO проводят биологические тесты и статистический анализ.