Kinetické časové průběhy bisfenolu-S u dobrovolníků

V prvním kroku budou dobrovolníci orálně akutně vystaveni 0,1 mg/kg tělesné hmotnosti (bw) orálně (odpovídá 7 mg pro jedince o hmotnosti 70 kg). Podle nedávného hodnocení Agentury pro ochranu životního prostředí USA (U.S. EPA) se má za to, že tato dávka není spojena s žádným nepříznivým účinkem pro scénář subchronické expozice u potkanů ​​(EPA, 2014). Deuterovaná forma bisfenolu S (BPS d8, Toronto Research Chemical) bude použita, aby se zabránilo potenciální interferenci s BPS ve stravě. Dávka, která bude podávána dobrovolníkům (0,1 mg/kg tělesné hmotnosti) orálně, v deuterované formě, je totožná s dávkou, která byla dříve použita ve studii u dobrovolníků vystavených bisfenolu A (0,1 mg/kg BPA-d6 podaný perorálně dobrovolníkům) (Thayer et al., 2015).

Referenční dávka BPS (RfD) byla stanovena na základě 45denní studie rodičovské toxicity u samců potkanů ​​po orální expozici s hladinou bez pozorovaného nepříznivého účinku (NOAEL) 10 mg/kg tělesné hmotnosti (úroveň nejnižšího pozorovaného nežádoucího účinku (LOAEL) ) 60 mg/kg tělesné hmotnosti/den pro rodičovskou toxicitu a hodnoty NOAEL a LOAEL 60 a 300 mg/kg tělesné hmotnosti/den pro reprodukční toxicitu) (EPA 2014) (strana 4-282). Dávka podaná dobrovolníkům bude 100krát nižší než NOAEL a vezme se v úvahu mezidruhový faktor nejistoty 10 a interindividuální 10. Šest dobrovolníků bude poté akutně orálně vystaveno dříve stanovené dávce (0,1 mg/kg tělesné hmotnosti).

Pro aplikaci se přípravek rozpustí v ethanolu (100 mg/ml ekvivalent 10 mg/100 μl) a roztok se uloží na sušenku (nanesení asi 70 μl roztoku na sušenku pro jedince o hmotnosti 70 kg ) a před podáním každému dobrovolníkovi se nechá odpařit ethanol s následnou spotřebou 100 ml vody.

V druhé složce budou dobrovolníci exponováni dermálně akutní v dávce 1 mg/kg tělesné hmotnosti. Je důležité poznamenat, že v současné době neexistuje žádná doporučená referenční dávka pro dermální expozici. Studie toxikokinetiky bisfenolu A (BPA) na zvířecím a lidském modelu odhadly, že absorpční frakce byla 8,6 ± 2,1 % v explantátech lidské kůže (n = 7) (Demierre et al., 2012). Očekávaná dávka dermálního podání předpokládá, že dermální absorpce je <10 % na základě Demierrovy studie, a proto může být vyšší než perorální dávka. Před provedením všech plánovaných dobrovolníků bude provedena předběžná zkušenost s dobrovolníkem.

Přibližně 48 hodin před dermální expozicí BPS se doporučuje odstranit chloupky na předloktí, přičemž dbejte na to, abyste příliš nepodráždili pokožku. Roztok se poté nanese na plochu 40 cm2 předloktí a ohraničí nesmazatelným fixem. BPS se přidá v suspenzi ve vodném roztoku obsahujícím 1 % karboxymethylcelulózy a podává se ve formě kapek (70 ul pro jedince o hmotnosti 70 kg). Ošetřená oblast bude ponechána bez nátěru a nemytá po dobu 4 hodin. Po 4 hodinách se místo aplikace umyje vodou a mýdlem. Tento typ aplikace je tedy podobný expozici běžné populace prostřednictvím kůže (manipulace s peněžními příjmy).

Kinetika bisfenolu S (BPS) a jeho metabolitu (glukurono-konjugovaný BPS (BPSG) v krvi bude dokumentována odběrem krve žilní punkcí v čase: -30 min (kontrolní vzorek) a ve stanovených časech během 48 hodin doléčení: v 15 min, 30 min, 45 min, 1 h, 1 h 15, 1 h 30, 1 h 45, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h, 6 h, 8 h, 10 h, 24 hodin a 48 hodin po ošetření (n = 17 vzorků na jednotlivce). Během dne expozice bude zaveden katétr, který umožní sériové odběry krve. Za časový bod bude odebráno celkem 20 ml, což představuje celkem 340 ml, což je méně než darování krve.

Za účelem zdokumentování časových průběhů moči budou kompletní močová média odebírána do samostatných lahví v pevně stanovených časových intervalech: -10 h-0 h (kontrola) a 0-2 h, 2-4 h, 4-6 h, 6-8 h, 8 -10 h, 10-12 h, 12-14 h, 14-24 h, 24-48 h a 48-72 h po podání (n = 11 odběrů na jednotlivce a všechny prázdné mezi dvěma časovými body budou sloučeny).