Kinetyczne przebiegi czasowe bisfenolu-S u ochotników

W pierwszym etapie ochotnicy zostaną ostro narażeni doustnie na 0,1 mg/kg masy ciała (m.c.) doustnie (co odpowiada 7 mg dla osoby o masie ciała 70 kg). Zgodnie z niedawną oceną Agencji Ochrony Środowiska Stanów Zjednoczonych (Amerykańska Agencja Ochrony Środowiska) uważa się, że dawka ta nie powoduje żadnych skutków ubocznych w przypadku scenariusza narażenia podprzewlekłego u szczurów (EPA, 2014). Deuterowana postać bisfenolu S (BPS d8, Toronto Research Chemical) zostanie wykorzystana w celu uniknięcia potencjalnej interferencji BPS w diecie. Dawka, która zostanie podana ochotnikom (0,1 mg/kg m.c.) doustnie, w formie deuterowanej, jest identyczna jak stosowana wcześniej w badaniu ochotników narażonych na Bisfenol A (0,1 mg/kg BPA-d6 podanego doustnie ochotnikom) (Thayer i in., 2015).

Dawka referencyjna BPS (RfD) została ustalona na podstawie 45-dniowego badania toksyczności rodzicielskiej na samcach szczurów narażonych doustnie, przy poziomie, przy którym nie obserwuje się szkodliwych skutków (NOAEL) 10 mg/kg masy ciała (poziom najniższego obserwowanego szkodliwego działania (LOAEL) ) 60 mg/kg mc./dzień dla toksyczności rodzicielskiej oraz wartości NOAEL i LOAEL wynoszące 60 i 300 mg/kg mc./dzień dla szkodliwego działania na rozrodczość) (EPA 2014) (strona 4-282). Dawka podawana ochotnikom będzie 100 razy mniejsza niż NOAEL i uwzględnia czynnik niepewności międzygatunkowej równy 10 i międzyosobniczy równy 10. Sześciu ochotników zostanie następnie poddanych ostrej ekspozycji doustnej na wcześniej ustaloną dawkę (0,1 mg/kg masy ciała).

W celu podania produkt zostanie rozpuszczony w etanolu (100 mg/ml, co odpowiada 10 mg/100 μl), a roztwór zostanie umieszczony na ciasteczku (depozyt około 70 μl roztworu na ciasteczko dla osoby o masie ciała 70 kg) ) i pozostawiono do odparowania etanolu przed podaniem każdemu ochotnikowi, po czym wypito 100 ml wody.

W przypadku drugiego składnika ochotnicy będą narażeni skórnie w dawce 1 mg/kg masy ciała. Należy zauważyć, że obecnie nie ma zalecanej dawki referencyjnej dla narażenia przez skórę. Badania toksykokinetyki bisfenolu A (BPA) na modelu zwierzęcym i ludzkim oszacowały, że frakcja absorpcji wynosiła 8,6 ± 2,1% w eksplantatach ludzkiej skóry (n = 7) (Demierre i in., 2012). Oczekiwana dawka podana na skórę zakłada, że ​​wchłanianie przez skórę wynosi <10% w oparciu o badanie Demierre'a i dlatego może być wyższa niż dawka doustna. Wstępne doświadczenie na ochotnika zostanie przeprowadzone przed wykonaniem wszystkich zaplanowanych ochotników.

Około 48 godzin przed ekspozycją skórną na BPS zaleca się usunięcie owłosienia na przedramieniu, uważając przy tym, aby nie podrażnić nadmiernie skóry. Roztwór zostanie następnie nałożony na powierzchnię 40 cm2 przedramienia i odgraniczony nieusuwalnym markerem. BPS będzie dodawany w postaci zawiesiny w roztworze wodnym zawierającym 1% karboksymetylocelulozy i podawany w postaci kropli (70 µl dla osoby o wadze 70 kg). Leczony obszar pozostanie niepokryty i niemyty przez okres 4 godzin. Po 4 godzinach miejsce aplikacji zostanie przemyte wodą z mydłem. Ten rodzaj zastosowania jest zatem podobny do narażenia ogółu populacji przez skórę (manipulowanie kwitami pieniężnymi).

Kinetyka bisfenolu S (BPS) i jego metabolitu (BPS skoniugowanego z glukuronem (BPSG) we krwi zostanie udokumentowana poprzez pobranie krwi przez nakłucie żylne w czasie: -30 min (próbka kontrolna) oraz w ustalonych porach w okresie 48-godzinnym po zabiegu: po 15 min, 30 min, 45 min, 1 h, 1 h 15, 1 h 30, 1 h 45, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h, 6 h, 8 h, 10 h, 24 godziny i 48 godzin po zabiegu (n = 17 próbek na osobnika). Cewnik zostanie wprowadzony w dniu ekspozycji, aby umożliwić seryjne pobieranie krwi. Łącznie zostanie pobranych 20 ml na punkt czasowy, co odpowiada łącznie 340 ml, co jest wartością mniejszą niż oddanie krwi.

Aby udokumentować przebiegi oddawania moczu, do odrębnych butelek będą zbierane pełne mikcje moczu w ustalonych przedziałach czasowych: -10 h-0 h (kontrola) i 0-2 h, 2-4 h, 4-6 h, 6-8 h, 8 -10 godz., 10-12 godz., 12-14 godz., 14-24 godz., 24-48 godz. i 48-72 godz. po podaniu (n = 11 pobrań na osobnika i wszystkie pustki między dwoma punktami czasowymi zostaną zsumowane).