Opakované injekce mezenchymálních kmenových buněk u ALS

Otevřená jednocentrická klinická studie k vyhodnocení bezpečnosti a účinnosti opakovaného intratekálního podávání autologních kmenových buněk mezenchymu z kostní dřeně u pacientů s ALS. Studie zahrnuje 20 subjektů (věk: 20-70) s definitivní diagnózou ALS a skóre ALS-FRS-R alespoň 20 a trváním onemocnění kratším než 3 roky. Léčebný protokol zahrnuje čtyři intratekální injekce MSC v intervalech 3 měsíců mezi injekcemi. Primárními cíli jsou bezpečnost a snášenlivost. Jako sekundární koncové body se hodnotí několik měření účinnosti.

Přihlášky pacientů přijímáme v našem centru. Nezávislá výběrová komise sestavená administrativou nemocnice zkoumá anonymně, podle předem definovaných kritérií pro zařazení a vyloučení. Po zahrnutí a screeningové návštěvě jsou pacienti sledováni po dobu 6 měsíců před první návštěvou (návštěva 1), aby se vyhodnotila míra progrese jejich onemocnění. a po dobu šesti měsíců po poslední transplantaci.

Jeden měsíc po zařazení pacienti podstoupí proceduru aspirace kostní dřeně (BMA) a buňky MSC jsou produkovány z aspirátu kostní dřeně. Při léčebné návštěvě jsou pacientům transplantováni intratekální (IT) injekcí MSC (1 milion buněk na kg tělesné hmotnosti) a poté další injekce každých 3-6 měsíců. Po transplantaci MSC jsou pacienti každé dva měsíce vyšetřováni a hodnoceni na skóre ALSFRSr a usilovnou vitální kapacitu plic (FVC) po celkovou dobu sledování 3 měsíce po poslední injekci MSC.

Pro stanovení míry progrese onemocnění budou měsíční změny ve funkčním skóre ALS: ALSFRSr vypočítány během 6 měsíců – „období zavádění“ a po celou dobu trvání studie, která skončí 3 měsíce po poslední injekci MSC. kmenové buňky. Míra progrese (jak doloženo měsíčními změnami v ALSFRSr a FVC) během studie (vypočítaná v časovém bodě poslední návštěvy, 3 měsíce po poslední injekci MSC) bude porovnána s mírou progrese během období „záběhu“. .

Následné návštěvy zahrnují pozorování vedlejších účinků, úplné neurologické vyšetření a svalovou tabulku, skóre ALS a test nucené vitální kapacity (FVC). Bezpečnost je hodnocena po léčbě MSC pomocí měření následujících proměnných: fyzikální vyšetření, vitální funkce (HR, TK, RR, tělesná teplota) a klinické laboratorní parametry: WBC s diferenciálem a počtem krevních destiček, hemoglobin (Hb), hematokrit (Ht), krevní chemie pro elektrolyty, kreatinin a jaterní enzymy.

Všichni vybraní pacienti podstoupí aspiraci kostní dřeně v lehké celkové anestezii a získá se inokulum hrubých buněk kostní dřeně (150 ml), které se dvě třetiny uchovávají ve zmrazeném stavu. Jedna třetina se kultivuje za podmínek GCP v čistém prostoru pro lidské buněčné kultury Hadassah HMO. MSC se získávají z kostní dřeně každého pacienta a připravují se s použitím našeho dříve popsaného protokolu s mírnou modifikací.

O měsíc později je pacient hospitalizován a je mu provedena lumbální punkce za standardních podmínek a lokální anestezie v lumbální úrovni L4-5 a jsou odebrány 3 ml CSF a kultivované purifikované MSC (1x106/kg tělesné hmotnosti) resuspendovány ve 3 ml normální fyziologický roztok se vstříkne do mozkomíšního moku pomocí jehly 20G a 3cestné kanyly.