Iniezioni ripetute di cellule staminali mesenchimali nella SLA

Uno studio clinico in aperto, monocentrico per valutare la sicurezza e l'efficacia di ripetute somministrazioni intratecali di cellule staminali mesenchimali autologhe derivate dal midollo osseo in pazienti affetti da SLA. Lo studio comprende 20 soggetti (età: 20-70) con diagnosi definitiva di SLA e punteggio ALS-FRS-R di almeno 20 e durata della malattia inferiore a 3 anni. Il protocollo di trattamento prevede quattro iniezioni intratecali di MSC, a intervalli di 3 mesi tra le iniezioni. Gli endpoint primari sono la sicurezza e la tollerabilità. Diverse misure di efficacia sono valutate come endpoint secondari.

Le domande dei pazienti vengono ricevute nel nostro centro. Un comitato selettivo indipendente istituito dall'amministrazione dell'ospedale esamina in modo anonimo, secondo i criteri di inclusione ed esclusione predefiniti. Dopo l'inclusione e la visita di screening, i pazienti vengono seguiti per un periodo di "run-in" di 6 mesi prima della prima visita (visita 1), per valutare il tasso di progressione della loro malattia. e per sei mesi dopo l'ultimo trapianto.

Un mese dopo l'inclusione, i pazienti vengono sottoposti alla procedura di aspirazione del midollo osseo (BMA) e le cellule MSC vengono prodotte dall'aspirato del midollo osseo. Durante la visita di trattamento, i pazienti vengono trapiantati con un'iniezione intratecale (IT) di MSC (1 milione di cellule per kg di peso corporeo) e successivamente con iniezioni aggiuntive ogni 3-6 mesi. Dopo il trapianto di MSC, i pazienti vengono esaminati su base bimestrale e valutati per il punteggio ALSFRSr e la capacità vitale forzata dei polmoni (FVC) per un periodo di follow-up totale di 3 mesi dopo l'ultima iniezione di MSC.

Per stabilire il tasso di progressione della malattia, verranno calcolate le variazioni mensili del punteggio funzionale ALS: ALSFRSr durante i 6 mesi di "run in period" e per l'intera durata dello studio, terminando a 3 mesi dopo l'ultima iniezione di MSC cellule staminali. Il tasso di progressione (come evidenziato dalle variazioni mensili di ALSFRSr e FVC) durante lo studio (calcolato al momento dell'ultima visita, 3 mesi dopo l'ultima iniezione di MSC) sarà confrontato con il tasso di progressione durante il periodo di "run-in" .

Le visite di follow-up includono l'osservazione degli effetti collaterali, la valutazione neurologica completa e il grafico muscolare, il punteggio ALS e il test della capacità vitale forzata (FVC). La sicurezza viene valutata dopo il trattamento con MSC, utilizzando le misurazioni delle seguenti variabili: esame fisico, segni vitali (HR, BP, RR, temperatura corporea) e parametri clinici di laboratorio: globuli bianchi con conta differenziale e piastrinica, emoglobina (Hb), ematocrito (Ht), chimica del sangue per elettroliti, creatinina ed enzimi epatici.

Tutti i pazienti selezionati vengono sottoposti ad aspirazione midollare in leggera anestesia generale e viene prelevato un inoculo di cellule midollari grezze (150 ml) di cui due terzi mantenuti congelati. Un terzo è coltivato in condizioni GCP presso la struttura della camera bianca per colture cellulari umane di Hadassah HMO. Le MSC sono ottenute dal midollo osseo di ciascun paziente e preparate utilizzando il nostro protocollo precedentemente descritto con lievi modifiche.

Dopo un mese il paziente viene ricoverato e viene eseguita una puntura lombare in condizioni standard e anestesia locale a livello lombare L4-5 e 3 ml di CSF e le MSC purificate in coltura (1x106/kg di peso corporeo) vengono risospese in 3 ml di soluzione fisiologica normale viene iniettata nel liquido cerebrospinale, utilizzando un ago calibro 20 e una cannula a 3 vie.