Genetické determinanty koronární mikrovaskulární obstrukce u PCI

Cílem studie bylo identifikovat genetické determinanty rozvoje koronární mikrovaskulární obstrukce při perkutánních koronárních intervencích u pacientů s infarktem myokardu. Studie zkoumá roli některých variant jednonukleotidového polymorfismu (SNP) jako prediktorů rozvoje CMVO. Vybrané SNP, které jsou spojeny s mechanismy rozvoje CMVO (podle literatury). Hypotéza: vybrané SNP jsou nezávislými genetickými prediktory rozvoje CMVO během PCI u pacientů s IM.

Design studie: shodná případová-kontrolní studie. Velikost vzorku: 80 pacientů. Pacienti musí mít kritéria pro zařazení, nesmí mít kritéria pro vyloučení a podepsat informovaný souhlas. Rozdělení do 2 skupin v poměru 1:1. Skupina 1 (CMVO+): 40 pacientů s IM, u kterých byl detekován CMVO po PCI. Druhá skupina (CMVO-, kontrola): 40 pacientů s IM, u kterých nebyla po PCI detekována CMVO. Skupiny se shodují podle pohlaví a věku. Velikost vzorku (80 pacientů) byla stanovena v souladu s následujícími parametry: chyba alfa - 5 %, síla studie - 80 %, poměr velikosti skupiny - 1:1, minimální poměr šancí pro detekci - 4,0, prevalence SNP v populaci - 12-69 % (průměrně 50 %).

CMVO (no-reflow) je definováno jako nedostatečná perfuze myokardu po úspěšné mechanické obnově průtoku krve přes IRA (podle pokynů Evropské kardiologické společnosti STEMI z roku 2017). Kritéria CMVO (musí existovat alespoň jedno kritérium): 1) průtok krve IRA je menší než 3 body podle stupně průtoku TIMI; 2) perfuze myokardu méně než 2 body podle stupně zčervenání myokardu (MBG). Jiné příčiny obstrukce IRA (spasmus, disekce, tromboembolismus) musí být vyloučeny.

Fáze výzkumu: 1) posouzení kritérií pro zařazení/vyloučení; 2) podepsání informovaného souhlasu; 3) odběr krve na genetickou analýzu (provádí se na operačním sále bezprostředně po PCI); 4) zpracování vzorků krve a jejich transport do laboratoře; 5) vyplnění registrační karty pacienta (obsahuje informace o léčbě a výsledcích); 6) provádění genetické analýzy; 7) statistické zpracování získaných výsledků.

Registrační karta se vyplňuje při ukončení hospitalizace. Účel: 1) srovnání variant a výsledků SNP; 2) multivariační analýza variant SNP a dalších prediktorů CMVO. Karta obsahuje následující údaje: informace o PCI, rizikové faktory pro vznik CMVO, laboratorní údaje (celkový krevní obraz, biochemický krevní test atd.), údaje o vyšetření (EKG, monitorování EKG, echokardiografie, šestiminutový test chůze), informace o komplikacích a výsledcích. Tyto laboratorní testy a instrumentální studie se používají v souladu s rutinními nemocničními protokoly pro léčbu pacientů s IM (použití není spojeno s vyšetřováním).

Pro genetické vyšetření se používá žilní periferní krev. Odběr krve se provádí přímo na operačním sále po PCI. Vybrané SNP z panelu "CardioGenetics Hypertension", panelu "CardioGenetics Thrombophilia" a panelu "Genetics of Folate Metabolism" od společnosti "DNA-Technology" (Rusko). Také byla použita sada činidel pro detekci polymorfismu Lys198Asn v genu EDN1 "SNP-Express-Cardiogenetics RT" od společnosti "Litekh" (Rusko). SNP jsou určeny polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase s analýzou křivky tání s vysokým rozlišením pomocí fluorescenčních sond TaqMan. Jsou analyzovány následující SNP (identifikátor a gen SNP): rs4961 (ADD1); rs699 a rs4762 (AGT); rs5186 (AGTR1); rs1403543 (AGTR2); rs1799998 (CYP11B2); rs5443 (GNB3); rs2070744 a rs1799983 (eNOS); rs1799963 (F2); rs6025 (F5); rs6046 (F7); rs5985 (F13); rs1800790 (FGB); rs1126643 (ITGA2-a2); rs5918 (ITGB3-p3); rs1799762 (PAI-1); rs1801133 (MTHFR); rs1801131 (MTHFR); rs1805087 (MTR); rs1801394 (MTRR); rs5370 (EDN1).

Očekávané výsledky: bude prokázáno nebo vyvráceno, že některé varianty SNP jsou nezávislými prediktory rozvoje CMVO během PCI u pacientů s infarktem myokardu.