Genetyczne uwarunkowania niedrożności naczyń mikrokrążenia wieńcowego w PCI

Celem pracy jest identyfikacja genetycznych uwarunkowań rozwoju niedrożności mikrokrążenia wieńcowego podczas przezskórnych interwencji wieńcowych u pacjentów z zawałem mięśnia sercowego. Badanie dotyczy roli niektórych wariantów polimorfizmu pojedynczego nukleotydu (SNP) jako predyktorów rozwoju CMVO. Wybrane SNP związane z mechanizmami rozwoju CMVO (wg literatury). Hipoteza: wybrane SNP są niezależnymi predyktorami genetycznymi rozwoju CMVO podczas PCI u pacjentów z MI.

Projekt badania: dopasowane badanie kliniczno-kontrolne. Wielkość próby: 80 pacjentów. Pacjenci muszą spełniać kryteria włączenia, nie mieć kryteriów wykluczenia i podpisać świadomą zgodę. Podział na 2 grupy w stosunku 1:1. Grupa 1 (CMVO+): 40 pacjentów z MI, u których wykryto CMVO po PCI. Druga grupa (CMVO-, kontrola): 40 pacjentów z MI, u których nie wykryto CMVO po PCI. Grupy dobierane są według płci i wieku. Liczebność próby (80 pacjentów) określono według następujących parametrów: błąd alfa – 5%, moc badania – 80%, stosunek liczebności grup – 1:1, minimalny iloraz szans na wykrycie – 4,0, rozpowszechnienie SNP w populacji – 12-69% (średnio 50%).

CMVO (no-reflow) definiuje się jako niewystarczającą perfuzję mięśnia sercowego po skutecznym mechanicznym przywróceniu przepływu krwi przez IRA (zgodnie z wytycznymi Europejskiego Towarzystwa Kardiologicznego STEMI z 2017 r.). Kryteria CMVO (musi istnieć co najmniej jedno kryterium): 1) przepływ IRA jest mniejszy niż 3 punkty według stopnia przepływu TIMI; 2) perfuzja mięśnia sercowego mniejsza niż 2 punkty według stopnia rumienia mięśnia sercowego (MBG). Należy wykluczyć inne przyczyny niedrożności IRA (skurcz, rozwarstwienie, choroba zakrzepowo-zatorowa).

Etapy badań: 1) ocena kryteriów włączenia/wyłączenia; 2) podpisanie świadomej zgody; 3) pobranie krwi do badań genetycznych (wykonywane na sali operacyjnej bezpośrednio po PCI); 4) przetwarzanie próbek krwi i ich transport do laboratorium; 5) wypełnienie karty rejestru pacjenta (zawiera informacje o leczeniu i jego wynikach); 6) wykonywanie analiz genetycznych; 7) obróbka statystyczna uzyskanych wyników.

Kartę rejestracyjną wypełnia się na zakończenie hospitalizacji. Cel: 1) porównanie wariantów i wyników SNP; 2) wielowymiarowa analiza wariantów SNP i innych predyktorów CMVO. Karta zawiera następujące dane: informacje o PCI, czynniki ryzyka rozwoju CMVO, dane laboratoryjne (morfologia, biochemiczne badanie krwi itp.), dane z badań (EKG, monitorowanie EKG, echokardiografia, test 6-minutowego marszu), informacje o powikłaniach i wynikach. Te testy laboratoryjne i badania instrumentalne są stosowane zgodnie z rutynowymi protokołami szpitalnymi dotyczącymi leczenia pacjentów z zawałem mięśnia sercowego (stosowanie nie jest związane z badaniem).

Żylna krew obwodowa służy do badań genetycznych. Pobieranie krwi odbywa się bezpośrednio na sali operacyjnej po PCI. Wybrane SNP z panelu „CardioGenetics Hypertension”, panelu „CardioGenetics Thrombophilia” i panelu „Genetics of Folate Metabolism” firmy „DNA-Technology” (Rosja). Zastosowano również zestaw odczynników do wykrywania polimorfizmu Lys198Asn w genie EDN1 „SNP-Express-Cardiogenetics RT” firmy „Litekh” (Rosja). SNP są określane za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym z analizą krzywej topnienia o wysokiej rozdzielczości przy użyciu sond fluorescencyjnych TaqMan. Analizowane są następujące SNP (identyfikator i gen SNP): rs4961 (ADD1); rs699 i rs4762 (AGT); rs5186 (AGTR1); rs1403543 (AGTR2); rs1799998 (CYP11B2); rs5443 (GNB3); rs2070744 i rs1799983 (eNOS); rs1799963 (F2); rs6025 (F5); rs6046 (F7); rs5985 (F13); rs1800790 (FGB); rs1126643 (ITGA2-a2); rs5918 (ITGB3-β3); rs1799762 (PAI-1); rs1801133 (MTHFR); rs1801131 (MTHFR); rs1805087 (MTR); rs1801394 (MTRR); rs5370 (EDN1).

Oczekiwane wyniki: zostanie udowodnione lub obalone, że niektóre warianty SNP są niezależnymi predyktorami rozwoju CMVO podczas PCI u pacjentów z zawałem mięśnia sercowego.