Tropismus a patogeneze viru chřipky a koronaviru v kultuře explantátu lidského mozku (COVID-19)
Pozadí:
Chřipka a koronavirus v poslední době opakovaně způsobují pandemii. Stejně jako virus chřipky A/H7N9 způsobil v Číně pět epidemií od své první detekce ve východní Číně v roce 2013. V roce 2017 prodělal dříve nízkopatogenní virus ptačí chřipky (LPAI) H7N9 mutaci ve svém hemaglutininu na vysoce patogenní virus ptačí chřipky (HPAI), který způsobil 32 případů u lidí a potenciálně představuje hrozbu pro zdraví zvířat a lidí. V poslední době pandemie SARS-CoV-2 silně ovlivňuje svět. Pro lepší přípravu na pandemii je proto naléhavě nutná účinná platforma pro hodnocení rizik.
Hypotéza:
Tkáňový tropismus a patogeneze nově vzniklých infekčních virů, jako je vysoce patogenní chřipka, jako H7N9 a koronavirus, jako SARS-CoV-2, by se lišily od tropismu jejich nízkopatogenního podtypu a účinněji by infikovaly a replikovaly lidský dýchací systém. .
Vzhledem k jeho odolnosti vůči oseltamiviru pro chřipku a žádnému účinnému antivirotikum na koronavirus proto výzkumníci navrhují vytvořit novou a účinnou platformu pro hodnocení rizik pro nově se objevující infekční viry.
Experimentální design:
Tkáňový tropismus a kinetika virové replikace HPAI a LP chřipky a koronaviru budou stanoveny v ex vivo kulturách lidského mozku a porovnány s jejich LP subtypem. Replikační kompetence a vrozené imunitní odpovědi chřipky a koronaviru budou studovány a porovnány s jinými LP viry v in vitro kulturách lidských mozkových buněk a lidských mikrovaskulárních endoteliálních buněk (HMVEC), obou izolovaných z lidských mozkových tkání.
Očekávané výsledky:
Chřipka HPAI a koronavirus, zejména SARS-CoV-2, budou infikovat a replikovat lidské mozkové tkáně a buňky účinněji než jejich podtyp LP. Kromě toho chřipka HPAI a SARS-CoV-2 indukují dysregulovanou vrozenou imunitní odpověď hostitele než podtyp LP.
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Detailní popis
V této studii bude přijato 80 subjektů, které podstoupí elektivní nebo nouzové kraniotomie pro vnitřní mozkové léze v nemocnici Prince of Wales Hospital.
Jedná se o prospektivní a kvalitativní studii. Neexistuje žádná randomizace v postupu studie ani terapeutický vynález pro studované subjekty. Nejedná se o žádný hodnocený produkt.
Pro tuto studii budou shromážděny mozkové tkáně, které jsou normálně vyřazeny během operace od pacientů, kteří podstoupí elektivní nebo nouzové kraniotomie pro vnitřní mozkové léze.
Před zákrokem bude získán souhlas s operací a souhlas s použitím odebrané tkáně pro vědecký výzkum.
Typ studie
Zápis (Očekávaný)
Kontakty a umístění
Studijní kontakt
- Jméno: Owen Ho Ko, Ph.D
- Telefonní číslo: +852 26352160
- E-mail: ho.ko@cuhk.edu.hk
Studijní místa
-
-
NT
-
Shatin, NT, Hongkong, 00000
- Nábor
- Prince of Wales Hospital
-
Kontakt:
- Owen Ko, PhD
- Telefonní číslo: 26352160
- E-mail: ho.ko@cuhk.edu.hk
-
Kontakt:
- Pauline Kwan, Master
- Telefonní číslo: 26352160
- E-mail: paulinekwan@cuhk.edu.hk
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Věk: > 1 rok a < 70 let
- Proveďte elektivní nebo nouzové kraniotomie pro vnitřní mozkové léze
Kritéria vyloučení:
A. Vzorky obsahující infikovaný materiál
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Observační modely: Pouze případ
- Časové perspektivy: Budoucí
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Replikační kinetika viru chřipky pomocí ex vivo kultur lidského mozku
Časové okno: základní linie
|
Tkáňové fragmenty se infikují 106 TCID50/ml po dobu 1 hodiny při 37 °C a poté se třikrát promyjí 3 ml teplého PBS, aby se odstranil nenavázaný virus.
Pro stanovení produktivní virové replikace z infikovaných bioptických vzorků budou supernatanty infikovaných kultur odebrány při 1, 24, 48 a 72 hpi a titry viru budou stanoveny testem TCID50.
Explantátové kultury budou fixovány v 10% formalínu při 24 a 72 hpi a pro detekci virem infikovaných buněk bude provedeno imunohistochemické barvení (IHC) proti protilátce HB65 (European Veterinary Laboratories), SARS-CoV nebo virové protilátce SARS-CoV-2 .
|
základní linie
|
|
replikační účinnost a vrozené imunitní reakce viru chřipky
Časové okno: základní linie
|
Buňky budou infikovány viry buď při MOI 0,01 nebo 2 po dobu 1 hodiny.
Po 1 hodině adsorpce viru se viry odsají a buňky se třikrát promyjí PBS, poté se médium doplní.
Pro buňky infikované při MOI 0,01 bude supernatant buněčné kultury sklizen při 1, 24, 48 a 72 hpi a virové titry budou stanoveny testem TCID50.
|
základní linie
|
|
Replikační kinetika koronaviru pomocí ex vivo kultur lidského mozku
Časové okno: Základní linie
|
Tkáňové fragmenty se infikují 106 TCID50/ml po dobu 1 hodiny při 37 °C a poté se třikrát promyjí 3 ml teplého PBS, aby se odstranil nenavázaný virus.
Pro stanovení produktivní virové replikace z infikovaných bioptických vzorků budou supernatanty infikovaných kultur odebrány při 1, 24, 48 a 72 hpi a titry viru budou stanoveny testem TCID50.
Explantátové kultury budou fixovány v 10% formalínu při 24 a 72 hpi a pro detekci virem infikovaných buněk bude provedeno imunohistochemické barvení (IHC) proti protilátce HB65 (European Veterinary Laboratories), SARS-CoV nebo virové protilátce SARS-CoV-2 .
|
Základní linie
|
|
replikační účinnost a vrozené imunitní reakce koronaviru
Časové okno: Základní linie
|
Buňky budou infikovány viry buď při MOI 0,01 nebo 2 po dobu 1 hodiny.
Po 1 hodině adsorpce viru se viry odsají a buňky se třikrát promyjí PBS, poté se médium doplní.
Pro buňky infikované při MOI 0,01 bude supernatant buněčné kultury sklizen při 1, 24, 48 a 72 hpi a virové titry budou stanoveny testem TCID50.
|
Základní linie
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Spolupracovníci
Vyšetřovatelé
- Vrchní vyšetřovatel: Owen Ho Ko, PhD, Chinese University of Hong Kong
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Očekávaný)
Dokončení studie (Očekávaný)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- 2022.120
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .