Тропизм и патогенез вируса гриппа и коронавируса в культуре эксплантатов головного мозга человека (COVID-19)
Фон:
В последнее время грипп и коронавирус неоднократно вызывали пандемии. Подобно вирусу гриппа A/H7N9, он вызвал пять эпидемий в Китае с момента его первого обнаружения в Восточном Китае в 2013 году. В 2017 году ранее низкопатогенный вирус птичьего гриппа (LPAI) H7N9 претерпел мутацию гемагглютинина, в результате которой появился высокопатогенный вирус птичьего гриппа (HPAI), вызвавший 32 случая заболевания человека и потенциально представляющий угрозу для здоровья животных и человека. Совсем недавно пандемия SARS-CoV-2 сильно повлияла на мир. Поэтому для лучшей подготовки к пандемии срочно требуется эффективная платформа для оценки рисков.
Гипотеза:
Тканевой тропизм и патогенез недавно появившихся инфекционных вирусов, таких как высокопатогенный грипп, такой как H7N9, и коронавирус, такой как SARS-CoV-2, будет отличаться от их низкопатогенного подтипа, и он будет более эффективно заражать и воспроизводить дыхательную систему человека. .
Из-за его устойчивости к осельтамивиру для лечения гриппа и отсутствия эффективного противовирусного препарата для коронавируса исследователи предлагают создать новую и эффективную платформу для оценки рисков для новых инфекционных вирусов.
Экспериментальная дизайн:
Тканевой тропизм и кинетика репликации вируса HPAI и LP гриппа и коронавируса будут определяться в культурах ex vivo головного мозга человека и сравниваться с их подтипом LP. Репликационная способность и врожденные иммунные реакции гриппа и коронавируса будут изучены и сравнены с другими вирусами LP в культурах in vitro клеток головного мозга человека и эндотелиальных клеток микрососудов человека (HMVEC), выделенных из тканей головного мозга человека.
Ожидаемые результаты:
Грипп HPAI и коронавирус, особенно SARS-CoV-2, будут инфицировать и воспроизводить ткани и клетки человеческого мозга более эффективно, чем их подтип LP. Кроме того, грипп HPAI и SARS-CoV-2 вызывают нарушение регуляции врожденного иммунного ответа хозяина, чем подтип LP.
Обзор исследования
Статус
Условия
Подробное описание
В этом исследовании будут набраны 80 человек, которым предстоит плановая или экстренная трепанация черепа по поводу внутренних поражений головного мозга в больнице принца Уэльского.
Это проспективное и качественное исследование. В процедуре исследования нет ни рандомизации, ни терапевтических изобретений для испытуемых. Никакой исследовательский продукт не задействован.
Для этого исследования будут собраны ткани головного мозга, которые в норме отбраковываются во время операции у пациентов, перенесших плановую или экстренную трепанацию черепа по поводу внутренних поражений головного мозга.
Согласие на операцию и согласие на использование удаленной ткани для научных исследований будет получено до процедуры.
Тип исследования
Регистрация (Ожидаемый)
Контакты и местонахождение
Контакты исследования
- Имя: Owen Ho Ko, Ph.D
- Номер телефона: +852 26352160
- Электронная почта: ho.ko@cuhk.edu.hk
Места учебы
-
-
NT
-
Shatin, NT, Гонконг, 00000
- Рекрутинг
- Prince of Wales Hospital
-
Контакт:
- Owen Ko, PhD
- Номер телефона: 26352160
- Электронная почта: ho.ko@cuhk.edu.hk
-
Контакт:
- Pauline Kwan, Master
- Номер телефона: 26352160
- Электронная почта: paulinekwan@cuhk.edu.hk
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Возраст: > 1 года и < 70 лет
- Пройти плановую или экстренную трепанацию черепа при внутренних поражениях головного мозга.
Критерий исключения:
а. Образцы, содержащие зараженный материал
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Наблюдательные модели: Только для случая
- Временные перспективы: Перспективный
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Кинетика репликации вируса гриппа с использованием ex vivo культур головного мозга человека
Временное ограничение: исходный уровень
|
Фрагменты ткани будут инфицированы 106 TCID50/мл в течение 1 часа при 37°C, а затем трижды промыты 3 мл теплого PBS для удаления несвязавшегося вируса.
Для определения продуктивной репликации вируса из инфицированных образцов биопсии супернатанты инфицированных культур будут собираться при 1, 24, 48 и 72 HPI, а титры вируса будут определяться с помощью анализа TCID50.
Культуры эксплантатов будут фиксироваться в 10% формалине при 24 и 72 HPI, а для выявления инфицированных вирусом клеток будет выполняться иммуногистохимическое окрашивание (ИГХ) против антител HB65 (European Veterinary Laboratories), вирусных антител против SARS-CoV или SARS-CoV-2. .
|
исходный уровень
|
|
эффективность репликации и врожденный иммунный ответ вируса гриппа
Временное ограничение: исходный уровень
|
Клетки будут инфицированы вирусами при МВД 0,01 или 2 в течение 1 часа.
После 1 ч адсорбции вируса вирусы будут аспирированы, а клетки трижды промыты PBS, затем среда будет восполнена.
Для клеток, инфицированных при MOI 0,01, супернатант клеточной культуры собирают при 1, 24, 48 и 72 HPI, а титры вируса определяют с помощью анализа TCID50.
|
исходный уровень
|
|
Кинетика репликации коронавируса с использованием ex vivo культур человеческого мозга
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Фрагменты ткани будут инфицированы 106 TCID50/мл в течение 1 часа при 37°C, а затем трижды промыты 3 мл теплого PBS для удаления несвязавшегося вируса.
Для определения продуктивной репликации вируса из инфицированных образцов биопсии супернатанты инфицированных культур будут собираться при 1, 24, 48 и 72 HPI, а титры вируса будут определяться с помощью анализа TCID50.
Культуры эксплантатов будут фиксироваться в 10% формалине при 24 и 72 HPI, а для выявления инфицированных вирусом клеток будет выполняться иммуногистохимическое окрашивание (ИГХ) против антител HB65 (European Veterinary Laboratories), вирусных антител против SARS-CoV или SARS-CoV-2. .
|
Базовый уровень
|
|
эффективность репликации и врожденные иммунные реакции на коронавирус
Временное ограничение: Базовый уровень
|
Клетки будут инфицированы вирусами при МВД 0,01 или 2 в течение 1 часа.
После 1 ч адсорбции вируса вирусы будут аспирированы, а клетки трижды промыты PBS, затем среда будет восполнена.
Для клеток, инфицированных при MOI 0,01, супернатант клеточной культуры собирают при 1, 24, 48 и 72 HPI, а титры вируса определяют с помощью анализа TCID50.
|
Базовый уровень
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Соавторы
Следователи
- Главный следователь: Owen Ho Ko, PhD, Chinese University of Hong Kong
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Ожидаемый)
Завершение исследования (Ожидаемый)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- 2022.120
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .
Клинические исследования Коронавирус
-
VA Office of Research and DevelopmentЗавершенныйТестирование SARS Coronavirus 2 методом ОТ-ПЦРСоединенные Штаты