Tropismo y patogenia del virus de la influenza y el coronavirus en cultivos de explantes de cerebro humano (COVID-19)
Fondo:
La influenza y el coronavirus han estado causando repetidamente pandemias recientemente. Al igual que el virus de la influenza A/H7N9, ha causado cinco epidemias en China desde su primera detección en el este de China en 2013. En 2017, el virus H7N9 de la influenza aviar de baja patogenicidad (LPAI) anteriormente sufrió una mutación en su hemaglutinina para convertirse en un virus de influenza aviar de alta patogenicidad (HPAI) que causó 32 casos humanos y representa una amenaza potencial para la salud animal y humana. Más recientemente, la pandemia de SARS-CoV-2 ha estado afectando gravemente al mundo. Por lo tanto, se requiere con urgencia una plataforma de evaluación de riesgos eficaz para una mejor preparación ante una pandemia.
Hipótesis:
El tropismo tisular y la patogénesis de un virus infeccioso recién surgido, como la influenza altamente patógena, como el H7N9 y el coronavirus, como el SARS-CoV-2, serían diferentes de los de su subtipo de baja patogenicidad e infectarían y replicarían el sistema respiratorio humano de manera más eficiente. .
Debido a su resistencia al oseltamivir para la influenza y a que no es un antiviral efectivo para el coronavirus, los investigadores proponen establecer una plataforma de evaluación de riesgos novedosa y efectiva para los virus infecciosos emergentes.
Diseño experimental:
El tropismo tisular y la cinética de replicación viral de una influenza y un coronavirus HPAI y LP se determinarán en cultivos ex vivo de cerebro humano y se compararán con su subtipo LP. La capacidad de replicación y las respuestas inmunitarias innatas de la influenza y el coronavirus se estudiarán y compararán con otros virus LP en cultivos in vitro de células cerebrales humanas y células endoteliales microvasculares humanas (HMVEC), ambos aislados de tejidos cerebrales humanos.
Resultados esperados:
La influenza HPAI y el coronavirus, particularmente el SARS-CoV-2, infectarán y replicarán los tejidos y células del cerebro humano de manera más eficiente que su subtipo LP. Además, la influenza HPAI y el SARS-CoV-2 inducirán una respuesta inmune innata del huésped desregulada que el subtipo LP.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Descripción detallada
En este estudio, se reclutarán 80 sujetos que se someterán a craneotomías electivas o de emergencia por lesiones cerebrales intrínsecas en el Hospital Prince of Wales.
Se trata de un estudio prospectivo y cualitativo. No hay aleatorización en el procedimiento del estudio ni invención terapéutica para los sujetos del estudio. No hay ningún producto en investigación involucrado.
Para este estudio, se recolectarán tejidos cerebrales normales descartados durante la operación de pacientes que se someten a craneotomías electivas o de emergencia por lesiones cerebrales intrínsecas.
Se obtendrá un consentimiento para la operación y un acuerdo para el uso del tejido extraído para investigación científica antes del procedimiento.
Tipo de estudio
Inscripción (Anticipado)
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Owen Ho Ko, Ph.D
- Número de teléfono: +852 26352160
- Correo electrónico: ho.ko@cuhk.edu.hk
Ubicaciones de estudio
-
-
NT
-
Shatin, NT, Hong Kong, 00000
- Reclutamiento
- Prince of Wales Hospital
-
Contacto:
- Owen Ko, PhD
- Número de teléfono: 26352160
- Correo electrónico: ho.ko@cuhk.edu.hk
-
Contacto:
- Pauline Kwan, Master
- Número de teléfono: 26352160
- Correo electrónico: paulinekwan@cuhk.edu.hk
-
-
Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Géneros elegibles para el estudio
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- Edad: > 1 año y < 70 años
- Someterse a craneotomías electivas o de emergencia por lesiones cerebrales intrínsecas
Criterio de exclusión:
a. Muestras que contienen material infectado
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Modelos observacionales: Solo caso
- Perspectivas temporales: Futuro
¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
|
Cinética de replicación del virus de la influenza utilizando cultivos ex vivo de cerebro humano
Periodo de tiempo: base
|
Los fragmentos de tejido se infectarán con 106 TCID50/mL durante 1 h a 37 °C y luego se lavarán con 3 ml de PBS tibio tres veces para eliminar el virus no unido.
Para determinar la replicación viral productiva de las muestras de biopsia infectadas, los sobrenadantes de los cultivos infectados se recolectarán a las 1, 24, 48 y 72 hpi y los títulos de virus se determinarán mediante el ensayo TCID50.
Los cultivos de explantes se fijarán en formalina al 10 % a las 24 y 72 hpi y se realizará una tinción inmunohistoquímica (IHC) contra el anticuerpo HB65 (European Veterinary Laboratories), el anticuerpo viral SARS-CoV o SARS-CoV-2 para la detección de células infectadas por virus .
|
base
|
|
eficiencia de replicación y respuestas inmunes innatas del virus de la influenza
Periodo de tiempo: base
|
Las células se infectarán con virus a una MOI de 0,01 o 2 durante 1 hora.
Después de 1 h de adsorción del virus, se aspirarán los virus y se lavarán las células con PBS tres veces, luego se repondrá el medio.
Para las células infectadas con una MOI de 0,01, el sobrenadante del cultivo celular se recogerá a las 1, 24, 48 y 72 hpi y los títulos virales se determinarán mediante el ensayo TCID50.
|
base
|
|
Cinética de replicación del coronavirus usando cultivos ex vivo de cerebro humano
Periodo de tiempo: Base
|
Los fragmentos de tejido se infectarán con 106 TCID50/mL durante 1 h a 37 °C y luego se lavarán con 3 ml de PBS tibio tres veces para eliminar el virus no unido.
Para determinar la replicación viral productiva de las muestras de biopsia infectadas, los sobrenadantes de los cultivos infectados se recolectarán a las 1, 24, 48 y 72 hpi y los títulos de virus se determinarán mediante el ensayo TCID50.
Los cultivos de explantes se fijarán en formalina al 10 % a las 24 y 72 hpi y se realizará una tinción inmunohistoquímica (IHC) contra el anticuerpo HB65 (European Veterinary Laboratories), el anticuerpo viral SARS-CoV o SARS-CoV-2 para la detección de células infectadas por virus .
|
Base
|
|
eficiencia de replicación y respuestas inmunes innatas coronavirus
Periodo de tiempo: Base
|
Las células se infectarán con virus a una MOI de 0,01 o 2 durante 1 hora.
Después de 1 h de adsorción del virus, se aspirarán los virus y se lavarán las células con PBS tres veces, luego se repondrá el medio.
Para las células infectadas con una MOI de 0,01, el sobrenadante del cultivo celular se recogerá a las 1, 24, 48 y 72 hpi y los títulos virales se determinarán mediante el ensayo TCID50.
|
Base
|
Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Investigador principal: Owen Ho Ko, PhD, Chinese University of Hong Kong
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Anticipado)
Finalización del estudio (Anticipado)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Actual)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- 2022.120
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
Esta información se obtuvo directamente del sitio web clinicaltrials.gov sin cambios. Si tiene alguna solicitud para cambiar, eliminar o actualizar los detalles de su estudio, comuníquese con register@clinicaltrials.gov. Tan pronto como se implemente un cambio en clinicaltrials.gov, también se actualizará automáticamente en nuestro sitio web. .
Ensayos clínicos sobre Coronavirus
-
Salvacion USA Inc.TerminadoEnfermedad del coronavirusEstados Unidos
-
Janssen Vaccines & Prevention B.V.TerminadoEnfermedad del coronavirusEstados Unidos
-
ProgenaBiomeDSCS CROTerminadoCOVID-19 | Infección de coronavirus | COVID-19 | Contagio de coronavirus | Coronavirus | SARS-CoV-2 | Coronavirus-19 | Coronavirus 19Estados Unidos
-
Beijing Ditan HospitalDesconocidoNuevo coronavirusPorcelana
-
Texas A&M UniversityM.D. Anderson Cancer Center; Baylor College of Medicine; Cedars-Sinai Medical Center y otros colaboradoresTerminadoInfección de coronavirus | Coronavirus | El coronavirus como causa de enfermedades clasificadas en otra parteEstados Unidos
-
OSF Healthcare SystemTerminadoCOVID-19 | Infección de coronavirus | COVID-19 | Contagio de coronavirus | Coronavirus | SARS-CoV-2 | El coronavirus asociado al SARS como causa de enfermedad clasificada en otra parte | Enfermedad del coronavirus | Coronavirus SARS asociado como causa de enfermedad clasificada en otra parte | El coronavirus...Estados Unidos
-
Qilu Hospital of Shandong UniversityReclutamientoCoronavirus | Medicina tradicional chinaPorcelana
-
Maimonides Medical CenterTerminadoCovid, coronavirusEstados Unidos
-
Level 42 AI, Inc.Johns Hopkins University; Schmidt FuturesTerminadoContagio de coronavirus | CoronavirusEstados Unidos
-
NPO PetrovaxTerminadoInfecciones, CoronavirusBielorrusia, Federación Rusa