Influenssaviruksen ja koronaviruksen tropismi ja patogeneesi ihmisen aivoviljelmässä (COVID-19)
Tausta:
Influenssa ja koronavirus ovat aiheuttaneet toistuvasti pandemiaa viime aikoina. Kuten influenssa A/H7N9 -virus, on aiheuttanut viisi epidemiaa Kiinassa sen jälkeen, kun se havaittiin ensimmäisen kerran Itä-Kiinassa vuonna 2013. Vuonna 2017 aiemmin matalapatogeenisen lintuinfluenssan (LPAI) H7N9-viruksen hemagglutiniinissa tapahtui mutaatio korkeapatogeeniseksi lintuinfluenssavirukseksi (HPAI), joka aiheutti 32 ihmisen tapausta ja mahdollisesti uhkaa eläinten ja ihmisten terveyttä. Viime aikoina SARS-CoV-2-pandemia on vaikuttanut voimakkaasti maailmaan. Siksi pandemiaan valmistautumisen parantamiseksi tarvitaan pikaisesti tehokas riskinarviointialusta.
Hypoteesi:
Äskettäin syntyneiden tarttuvien virusten, kuten erittäin patogeenisen influenssan, kuten H7N9:n ja koronaviruksen, kuten SARS-CoV-2, kudostropismi ja patogeneesi olisi erilainen kuin niiden matalapatogeenisen alatyypin ja se tartuttaisi ja replikoisi ihmisen hengityselimiä tehokkaammin. .
Koska se on vastustuskykyinen oseltamivirille influenssalle eikä tehokasta viruslääkettä koronavirukselle, tutkijat ehdottavat siksi uuden ja tehokkaan riskinarviointialustan perustamista uusille tartuntaviruksille.
Kokeellinen suunnittelu:
HPAI- ja LP-influenssa- ja koronaviruksen kudostropismi ja virusreplikaatiokinetiikka määritetään ihmisen aivojen ex vivo -viljelmissä ja niitä verrataan niiden LP-alatyyppiin. Influenssan ja koronaviruksen replikaatiokykyä ja synnynnäisiä immuunivasteita tutkitaan ja verrataan muihin LP-viruksiin ihmisen aivokudoksesta eristettyjen ihmisen aivosolujen ja ihmisen mikrovaskulaaristen endoteelisolujen (HMVEC) in vitro -viljelmissä.
Odotetut lopputulokset:
HPAI-influenssa ja koronavirus, erityisesti SARS-CoV-2, infektoivat ja replikoivat ihmisen aivokudoksia ja soluja tehokkaammin kuin niiden LP-alatyyppi. Lisäksi HPAI-influenssa ja SARS-CoV-2 indusoivat säätelemättömän isännän synnynnäisen immuunivasteen kuin LP-alatyyppi.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Yksityiskohtainen kuvaus
Tässä tutkimuksessa rekrytoidaan 80 koehenkilöä, joille tehdään valinnainen tai hätäkraniotomia sisäisten aivovaurioiden vuoksi Prince of Walesin sairaalassa.
Tämä on prospektiivinen ja laadullinen tutkimus. Tutkimusmenettelyssä ei ole satunnaistamista eikä terapeuttista keksintöä koehenkilöille. Mitään tutkimustuotetta ei ole mukana.
Tätä tutkimusta varten kerätään aivokudokset, jotka poistetaan normaalisti leikkauksen aikana potilailta, joille tehdään elektiivinen tai hätäkraniotomia sisäisten aivovaurioiden vuoksi.
Ennen toimenpidettä hankitaan lupa leikkaukseen ja suostumus poistetun kudoksen käyttöön tieteellisessä tutkimuksessa.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Odotettu)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Owen Ho Ko, Ph.D
- Puhelinnumero: +852 26352160
- Sähköposti: ho.ko@cuhk.edu.hk
Opiskelupaikat
-
-
NT
-
Shatin, NT, Hong Kong, 00000
- Rekrytointi
- Prince of Wales Hospital
-
Ottaa yhteyttä:
- Owen Ko, PhD
- Puhelinnumero: 26352160
- Sähköposti: ho.ko@cuhk.edu.hk
-
Ottaa yhteyttä:
- Pauline Kwan, Master
- Puhelinnumero: 26352160
- Sähköposti: paulinekwan@cuhk.edu.hk
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Ikä: > 1 v ja < 70 vuotta vanha
- Tee valinnainen tai hätäkraniotomia sisäisten aivovaurioiden varalta
Poissulkemiskriteerit:
a. Infektoitunutta materiaalia sisältävät näytteet
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Havaintomallit: Vain tapaus
- Aikanäkymät: Tulevaisuuden
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Influenssaviruksen replikaatiokinetiikka käyttämällä ihmisen aivojen ex vivo -viljelmiä
Aikaikkuna: perusviiva
|
Kudosfragmentit infektoidaan 106 TCID50/ml 1 tunnin ajan 37 °C:ssa ja pestään sitten 3 ml:lla lämmintä PBS:ää kolme kertaa sitoutumattoman viruksen poistamiseksi.
Viruksen tuottavan replikaation määrittämiseksi infektoituneista biopsianäytteistä infektoituneiden viljelmien supernatantit kerätään 1, 24, 48 ja 72 hpi:ssä ja virustiitterit määritetään TCID50-määrityksellä.
Eksplanttiviljelmät kiinnitetään 10 % formaliiniin 24 ja 72 hpi:ssä ja immunohistokemiallinen värjäys (IHC) HB65-vasta-ainetta (European Veterinary Laboratories), SARS-CoV- tai SARS-CoV-2-viruksen vasta-ainetta vastaan suoritetaan virustartunnan saaneiden solujen havaitsemiseksi. .
|
perusviiva
|
|
influenssaviruksen replikaatiotehokkuus ja luontaiset immuunivasteet
Aikaikkuna: perusviiva
|
Solut infektoidaan viruksilla joko MOI:lla 0,01 tai 2 1 tunnin ajan.
1 tunnin viruksen adsorption jälkeen virukset imetään ja soluja pestään PBS:llä kolme kertaa, sitten väliaine täytetään.
Soluille, jotka on infektoitu MOI:lla 0,01, soluviljelmän supernatantti kerätään 1, 24, 48 ja 72 hpi:llä ja virustiitterit määritetään TCID50-määrityksellä.
|
perusviiva
|
|
Koronaviruksen replikaatiokinetiikka käyttämällä ihmisen aivojen ex vivo -viljelmiä
Aikaikkuna: Perustaso
|
Kudosfragmentit infektoidaan 106 TCID50/ml 1 tunnin ajan 37 °C:ssa ja pestään sitten 3 ml:lla lämmintä PBS:ää kolme kertaa sitoutumattoman viruksen poistamiseksi.
Viruksen tuottavan replikaation määrittämiseksi infektoituneista biopsianäytteistä infektoituneiden viljelmien supernatantit kerätään 1, 24, 48 ja 72 hpi:ssä ja virustiitterit määritetään TCID50-määrityksellä.
Eksplanttiviljelmät kiinnitetään 10 % formaliiniin 24 ja 72 hpi:ssä ja immunohistokemiallinen värjäys (IHC) HB65-vasta-ainetta (European Veterinary Laboratories), SARS-CoV- tai SARS-CoV-2-viruksen vasta-ainetta vastaan suoritetaan virustartunnan saaneiden solujen havaitsemiseksi. .
|
Perustaso
|
|
replikaatiotehokkuus ja luontaiset immuunivasteet koronavirus
Aikaikkuna: Perustaso
|
Solut infektoidaan viruksilla joko MOI:lla 0,01 tai 2 1 tunnin ajan.
1 tunnin viruksen adsorption jälkeen virukset imetään ja soluja pestään PBS:llä kolme kertaa, sitten väliaine täytetään.
Soluille, jotka on infektoitu MOI:lla 0,01, soluviljelmän supernatantti kerätään 1, 24, 48 ja 72 hpi:llä ja virustiitterit määritetään TCID50-määrityksellä.
|
Perustaso
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Tutkijat
- Päätutkija: Owen Ho Ko, PhD, Chinese University of Hong Kong
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Odotettu)
Opintojen valmistuminen (Odotettu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 2022.120
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .
Kliiniset tutkimukset Koronaviirus
-
VA Office of Research and DevelopmentValmisSARS Coronavirus 2 RT-PCR-testausYhdysvallat
-
Beijing Chao Yang HospitalTuntematon
-
Goethe UniversityNationwide Network of University Medicine (NUM) on Covid-19RekrytointiVaikea akuutti hengitystieoireyhtymä Coronavirus 2 (SARS-CoV-2)Saksa
-
University of SaskatchewanGovernment of Canada; Government of SaskatchewanValmisVaikea akuutti hengitystieoireyhtymä Coronavirus 2 -infektioKanada
-
Farzanah LaherValmisCOVID-19 | SARS-CoV2-infektioEtelä-Afrikka
-
ANRS, Emerging Infectious DiseasesRekrytointiVaikea akuutti hengitystieoireyhtymä Coronavirus 2 (SARS-CoV-2)Ranska, Martinique
-
University of PecsHungarian Ministry of Innovation and TechnologyLopetettuVaikea akuutti hengitystieoireyhtymä Coronavirus 2 (SARS-CoV-2)Unkari
-
Central Hospital, Nancy, FranceValmisARDS, joka johtuu vakavasta akuutista hengitystieoireyhtymästä Coronavirus 2Ranska
-
Cogna Technology Solutions LLCNovavaxValmisVaikea akuutti hengitystieoireyhtymä Coronavirus 2 (SARS-CoV-2)Yhdistyneet Arabiemiirikunnat
-
Saint Francis CareValmisVaikea akuutti hengitystieoireyhtymä Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) | COVID | KoronaviirusYhdysvallat