Účinky směsi syrovátkových a kolagenových proteinů na rychlost syntézy proteinů (Blend)

Tato studie využívá dvojitě zaslepenou, paralelní skupinu, placebem kontrolovanou intervenci se dvěma skupinami. Celkem bude do studie zahrnuto až 38 zdravých rekreačně aktivních mužů (věk: 18-35 let), zatímco 28 subjektů musí dokončit experimentální testovací den. Subjekty provedou jedno cvičení s jednostranným odporem (leg press a extenze nohou) a budou náhodně přiřazeny ke konzumaci nápoje obsahujícího buď směs 25 g syrovátky a 5 g kolagenového proteinu, nebo placebo s nedusíkovým, nekalorickým aromatem. voda. Budou odebírány biopsie krve a svalů, zatímco bude podávána kontinuální infuze L-[ring-13C6] fenylalaninu. Délka celého studia bude přibližně 24 měsíců. Toto období zahrnuje screening, testování a analýzu dat všech 28 subjektů. Předmětové testování bude provedeno přibližně po 12 měsících.

Subjekty se zúčastní jednoho screeningu. Během tohoto sezení budou znovu slovně vysvětleny studijní postupy a zodpovězeny případné zbývající otázky předmětu. Poté bude podepsán formulář informovaného souhlasu. Subjekty budou požádány, aby vyplnily lékařský dotazník, aby získaly informace o svém celkovém zdravotním stavu, anamnéze, užívání léků a sportovních aktivitách. Měří se tělesná výška, tělesná hmotnost a složení těla. BIA je jednoduchý a neinvazivní postup. Na závěr budou subjekty seznámeny a testovány na sílu na posilovacích strojích (leg-press a extenze). Subjekty budou poučeny o správné technice vzpírání na jedné noze na každém cvičebním stroji (leg-press a extenze) a vyplní standardizovaný testovací protokol pro stanovení měření maximální síly (1RM) na každém cvičebním stroji. Testovací protokol vyžaduje, aby subjekty dokončily sady na každém cvičebním stroji se zvyšující se hmotností, dokud nedojde k únavě z vůle. Nejtěžší váha, kterou bylo možné zvednout při dobrém provedení cviku, bude brána jako 1RM. Po stanovení 1RM budou subjekty naplánovány na den jejich experimentálního testování.

Všechny subjekty konzumují standardizovanou večeři večer před každým testovacím dnem. Subjekty obdrží jídlo po screeningovém testu v termotašce. Subjekty budou instruovány, aby jídlo až do přípravy skladovaly v mrazáku a aby si pokrm připravovaly samy podle pokynů na etiketě. Všichni účastníci budou instruováni, aby se 2 dny před testovacím dnem zdrželi jakéhokoli těžkého fyzického cvičení a pití alkoholu. Kromě toho budou subjekty požádány, aby zaznamenaly svůj příjem potravy a fyzickou aktivitu po dobu 48 hodin před začátkem testovacího dne do deníku, který bude poskytnut během screeningu.

Každý subjekt se zúčastní pouze 1 experimentálního testovacího dne, který trvá ~9 hodin. Protokol je navržen tak, aby vyhodnotil pozátěžové plazmatické aminokyselinové odpovědi, myofibrilární a pojivovou tkáňovou syntézu proteinů.

Obecný přehled protokolu studie je uveden na obrázku 1. V 7:45 ráno po nočním půstu dorazí subjekty do laboratoře autem nebo veřejnou dopravou. Subjekty budou odpočívat v poloze na zádech a teflonový katétr bude vložen do vyhřívané dorzální ruční žíly a umístěn do horkého boxu (60 °C) pro odběr arterializované krve. Do kontralaterálního ramene bude zaveden další teflonový katétr pro stabilní izotopovou infuzi. Bude odebrán vzorek bazální arterializované venózní krve (t = -210 min), poté bude podána jedna intravenózní dávka L-[kruh-13C6] fenylalaninu (Cambridge Isotopes, Andover, MA). Poté bude zahájena kontinuální infuze L-[kruh-13C6] fenylalaninu (t = -210 min) pomocí kalibrovaného space plus infusomat pumpy (Braun, Melsungen, Německo), běžící po dobu 510 min. Svalová biopsie z horní části nohy, která neprovede jednostranné cvičení, bude odebrána v čase t = -180 min jako reference pro posouzení postabsorpční rychlosti syntézy svalových proteinů. Po provedení první svalové biopsie bude ultrazvukem změřena tloušťka svalu přímého femoris. Vzorky arterializované žilní krve budou odebírány v t = -210, -180, -120, -60 a 0 min. V t = -45 min bude provedeno jednostranné cvičení, které se skládá ze 4 sérií po 8 opakováních na stroji na tlak a extenzi nohou na 80% 1RM 8 opakování a poslední sérii do selhání. V t = 0 min se odeberou svalové biopsie z m. vastus lateralis jak odpočívající, tak cvičené nohy. Bezprostředně po odběru krve (t = 0 min) subjekty požijí testovací nápoj obsahující směs 25 g syrovátky a 5 g kolagenového proteinu (PRO) nebo nekalorické placebo (CON). Po požití testovacího nápoje budou odebírány vzorky arterializované žilní krve v čase t = 30, 60, 90, 120, 180, 240 a 300 min. Dále bude odebrán další vzorek svalu z odpočinuté a cvičené nohy v t = 300 min.