Effetti della miscela di proteine ​​​​del siero di latte e del collagene sui tassi di sintesi proteica (Blend)

Questo studio utilizza un intervento in doppio cieco, a gruppi paralleli, controllato con placebo con due gruppi. In totale, saranno inclusi nello studio fino a 38 soggetti maschi sani e attivi a livello ricreativo (età: 18-35 anni), mentre 28 soggetti devono completare la giornata di test sperimentale. I soggetti eseguiranno una singola sessione di esercizi di resistenza unilaterale (leg press e leg extension) e verranno assegnati in modo casuale a consumare una bevanda contenente una miscela di 25 g di siero di latte e 5 g di proteine ​​del collagene o un placebo con aroma non azotato e non calorico acqua. Verranno prelevate biopsie ematiche e muscolari mentre verrà somministrata un'infusione continua di L-[ring-13C6] fenilalanina. La durata dell'intero studio sarà di circa 24 mesi. Questo periodo include screening, test e analisi dei dati di tutti i 28 soggetti. Il test del soggetto verrà eseguito dopo circa 12 mesi.

I soggetti parteciperanno a una sessione di screening. Durante questa sessione, le procedure di studio saranno nuovamente spiegate verbalmente e verrà data risposta alle eventuali domande rimanenti del soggetto. Successivamente verrà firmato il modulo di consenso informato. Ai soggetti verrà chiesto di compilare un questionario medico per raccogliere informazioni sulla loro salute generale, storia medica, uso di farmaci e attività sportive. Saranno misurati l'altezza del corpo, il peso corporeo e la composizione corporea. La BIA è una procedura semplice e non invasiva. Infine, i soggetti saranno familiarizzati e testati per la forza sulle macchine per esercizi (leg-press e leg-extension). I soggetti verranno istruiti sulla corretta tecnica di sollevamento pesi con una sola gamba su ciascuna macchina per esercizi (leg-press ed estensione delle gambe) e completeranno un protocollo di test standardizzato per determinare una misurazione della forza massima (1RM) su ciascuna macchina per esercizi. Il protocollo di test richiede che i soggetti completino le serie su ciascuna macchina per esercizi aumentando di peso fino a quando non si verifica la fatica volontaria. Il peso più pesante che avrebbe potuto essere sollevato con una buona esecuzione dell'esercizio sarà preso come 1RM. Dopo la determinazione dell'1RM, i soggetti saranno programmati per il loro giorno di test sperimentale.

Tutti i soggetti consumeranno una cena standardizzata la sera prima di ogni giorno di test. I soggetti riceveranno il pasto dopo il test di screening in una borsa termica. I soggetti saranno istruiti a conservare il pasto in un congelatore fino alla preparazione ea preparare il pasto da soli secondo le istruzioni sull'etichetta. Tutti i soggetti saranno istruiti ad astenersi da qualsiasi tipo di esercizio fisico pesante e assunzione di alcol 2 giorni prima del giorno del test. Inoltre, ai soggetti verrà chiesto di registrare l'assunzione di cibo e l'attività fisica per 48 ore prima dell'inizio della giornata di test in un diario che verrà fornito durante lo screening.

Ogni soggetto parteciperà solo a 1 giornata di test sperimentale, della durata di ~9 h. Il protocollo è progettato per valutare le risposte aminoacidiche plasmatiche post-esercizio, la sintesi proteica miofibrillare e del tessuto connettivo.

Una panoramica generale del protocollo di studio è mostrata nella Figura 1. Alle 7:45, dopo un digiuno notturno, i soggetti arriveranno al laboratorio in auto o con i mezzi pubblici. I soggetti riposeranno in posizione supina e un catetere in teflon verrà inserito in una vena dorsale della mano riscaldata e posto in una scatola calda (60°C) per il prelievo di sangue arterializzato. Nel braccio controlaterale verrà inserito un altro catetere in teflon per l'infusione di isotopi stabili. Verrà prelevato un campione di sangue venoso arterializzato basale (t = -210 min), dopodiché verrà somministrata una singola dose endovenosa di L-[ring-13C6] fenilalanina (Cambridge Isotopes, Andover, MA). Successivamente, verrà avviata un'infusione continua di L-[ring-13C6] fenilalanina (t = -210 min) utilizzando una pompa calibrata space plus infusomat (Braun, Melsungen, Germania), in funzione per 510 min. Una biopsia muscolare dalla parte superiore della gamba che non eseguirà la sessione di esercizio unilaterale sarà raccolta a t = -180 min come riferimento per valutare i tassi di sintesi proteica muscolare post-assorbimento. Dopo che è stata eseguita la prima biopsia muscolare, lo spessore muscolare del muscolo retto femorale sarà misurato tramite ultrasuoni. I campioni di sangue venoso arterializzato saranno raccolti a t = -210, -180, -120, -60 e 0 min. A t = -45 min, verrà eseguito un esercizio unilaterale, che consiste in 4 serie da 8 ripetizioni sulla macchina leg press e leg extension all'80% 1RM 8 ripetizioni e l'ultima serie fino al cedimento. A t = 0 min verranno prelevate biopsie muscolari dal muscolo vasto laterale sia della gamba a riposo che di quella in esercizio. Immediatamente dopo la raccolta del sangue (t = 0 min), i soggetti ingeriranno una bevanda di prova contenente una miscela di 25 g di siero di latte e 5 g di proteine ​​del collagene (PRO) o un placebo non calorico (CON). Dopo l'ingestione della bevanda di prova, i campioni di sangue venoso arterializzato saranno raccolti a t = 30, 60, 90, 120, 180, 240 e 300 min. Inoltre, un ulteriore campione muscolare sarà prelevato dalla gamba riposata ed esercitata a t = 300 min.