Tato stránka byla automaticky přeložena a přesnost překladu není zaručena. Podívejte se prosím na anglická verze pro zdrojový text.

Molekulární detekce efluxní pumpy a genů faktorů virulence u Pseudomonas Aeruginosa (Pseudomonas)

11. dubna 2023 aktualizováno: Noha Saber Shafik, Sohag University
Pseudomonas aeruginosa (PA) je všudypřítomná aerobní, nefermentativní gramnegativní tyčinka, která je široce spojována s nozokomiální pneumonií a může vést k závažnému onemocnění se špatnými výsledky, zejména u kriticky nemocných lidí kvůli schopnosti některých kmenů způsobit plicní epitel. poranění a šíření do oběhu. 2 Na jednotce intenzivní péče je PA infekce zařazena mezi pět hlavních příčin infekcí krevního řečiště, plic, místa chirurgického zákroku, močových cest a měkkých tkání.

Přehled studie

Detailní popis

Patogeneze infekcí PA je multifaktoriální a je často komplikována vlastní rezistencí bakterií vůči některým antimikrobiálním látkám, jako jsou sulfonamidy, tetracykliny a trimethoprim, a také její schopností získat nebo rychle vyvinout rezistenci vůči hlavním třídám antibiotik, jako jsou aminoglykosidy. chinolony, B-laktamy a polymyxiny (Bassetti et al., 2018).

Effluxní systémy, které zprostředkovávají vypuzení antibiotik z buňky krátce po vstupu, produkce enzymů k inaktivaci antibiotik a snížení permeability přes buněčnou stěnu jsou některé mechanismy, které PA používá k rozvoji antimikrobiální rezistence (Meletis & Bagkeri, 2013).

PA má velké množství faktorů virulence, které hrají významnou roli v patogenezi a určování závažnosti infekce. Tyto faktory virulence působí samostatně nebo ve vzájemné synergii a způsobují poškození tkáně, nekrózu a buněčnou smrt. Mezi faktory virulence PA jsou hlavními determinanty virulence sekreční systém typu III (T3SS) a quorum sensing (signalizační systém buňka-buňka). T3SS je jehlovitý komplex, také známý jako injektisome, který umožňuje bakterii dodávat různé efektorové proteiny, jako jsou ExoS, ExoT, ExoU a ExoY, přes membránu do hostitelské buňky, čímž mění funkce hostitelské buňky a zvyšuje přežití bakterií. sazby (Horna G and, Ruiz J, 2021). V této studii jsme se zaměřili na zhodnocení prevalence antibiotické rezistence způsobené přítomností genů Efflux a některých faktorů virulence u Pseudomonas aeruginosa z klinických izolátů.

Typ studie

Pozorovací

Zápis (Očekávaný)

75

Kontakty a umístění

Tato část poskytuje kontaktní údaje pro ty, kteří studii provádějí, a informace o tom, kde se tato studie provádí.

Studijní kontakt

Studijní záloha kontaktů

Studijní místa

      • Sohag, Egypt
        • Nábor
        • Sohag University
        • Kontakt:
        • Kontakt:
          • Nesma A Mohamed, Lecturer

Kritéria účasti

Výzkumníci hledají lidi, kteří odpovídají určitému popisu, kterému se říká kritéria způsobilosti. Některé příklady těchto kritérií jsou celkový zdravotní stav osoby nebo předchozí léčba.

Kritéria způsobilosti

Věk způsobilý ke studiu

4 týdny až 80 let (Dítě, Dospělý, Starší dospělý)

Přijímá zdravé dobrovolníky

Ne

Metoda odběru vzorků

Vzorek nepravděpodobnosti

Studijní populace

Tato studie bude provedena na všech pacientech trpících infekcemi, které může způsobit pseudomonas aeruginosa.

Vzorky (hnis, moč, krev, sputum, výtok z ucha) budou odebírány z různých oddělení fakultní nemocnice sohag.

Klinická data budou získána jako:

- Údaje o klinických projevech včetně horečky, vykašlávání, hnisu z ran, močových příznaků, příznaků infekcí horních cest dýchacích a příznaků otitis externa.

Popis

Kritéria pro zařazení:

  • Všichni pacienti trpící infekcemi, které může způsobit pseudomonas aeruginosa

Kritéria vyloučení:

  • U vzorků bylo diagnostikováno, že mají jiné organismy než pseudomonas aeruginosa.

Studijní plán

Tato část poskytuje podrobnosti o studijním plánu, včetně toho, jak je studie navržena a co studie měří.

Jak je studie koncipována?

Detaily designu

  • Observační modely: Case-Control
  • Časové perspektivy: Průřezový

Kohorty a intervence

Skupina / kohorta
Intervence / Léčba
Pacienti s infekcemi pseudomonas aeruginosa

Všichni pacienti trpí infekcemi, které může způsobit pseudomonas aeruginosa.

Klinická data budou získána jako:

  • Údaje o klinických projevech včetně horečky, vykašlávání, hnisu z ran, močových příznaků, příznaků infekcí horních cest dýchacích a příznaků otitis externa.
  • Vzorky budou kultivovány na cetrimidovém agaru.
  • Testování citlivosti na antibiotika bude provedeno diskovou difúzní metodou podle CLSI.
  • Molekulární detekce na efluxní geny a některé geny virulence pomocí PCR.
Vzorky budou naočkovány na cetrimidový agar s použitím techniky vysávání.
kolonie na cetrimidovém agaru se rozprostře na podložní sklíčko a obarví se gramovým barvivem
Testování citlivosti na antibiotika bude provedeno diskovou difúzní metodou podle CLSI
Molekulární detekce efluxních genů a některých genů virulence konvenční PCR
Pacienti s jinými infekcemi než pseudomonas aeruginosa
  • Údaje o klinických projevech včetně horečky, vykašlávání, hnisu z ran, močových příznaků, příznaků infekcí horních cest dýchacích a příznaků otitis externa.
  • Vzorky budou kultivovány na různých kultivačních médiích a automatizovaná identifikace systémem Vitek.
Vzorky budou naočkovány na cetrimidový agar s použitím techniky vysávání.
kolonie na cetrimidovém agaru se rozprostře na podložní sklíčko a obarví se gramovým barvivem
Testování citlivosti na antibiotika bude provedeno diskovou difúzní metodou podle CLSI

Co je měření studie?

Primární výstupní opatření

Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Izolace a identifikace pseudomonas aeruginosa pomocí kultivačních a automatizovaných systémových technik
Časové okno: 1. prosince 2022 až 1. února 2023
identifikace pseudomonas aeruginosa v různých klinických vzorcích odebraných z univerzitní nemocnice Sohag pomocí různých laboratorních technik, jako je kultivace na citramidovém agaru, barvení pomocí Grama, biochemické reakce, jako je oxidázový test, test fermentace cukru a automatizovaná identifikace pomocí systému vitek2
1. prosince 2022 až 1. února 2023
Identifikace nedávného vzorce citlivosti na antibiotika pomocí metody Modified Kerby -Disc Diffusion
Časové okno: 1. prosince 2022 až 1. února 2023
Stanovení nedávného vzorce citlivosti na antibiotika s použitím různých antibiotik metodou diskové difúze rozprostřením inokula v pitryho misce obsahující Muller Hinton Agar, poté jsou různé disky obsahující antibiotika umístěny ve vzdálenosti 1,5 cm a poté inkubovány při 37 °C po dobu 24 hodin. Měří se průměr inhibiční zóny pro stanovení MIC pro každé antibiotikum podle pokynů CSLI 2022.
1. prosince 2022 až 1. února 2023
Molekulární identifikace některých faktorů virulence a efluxních genů pomocí PCR
Časové okno: 1. února 2023 do 30. března 2023
Molekulární detekce některých faktorů virulence a efluxních genů pomocí specifických primerů konvenční PCR. budou použity primery následujících genů jako exoS,exoU, toxA, mex A, mex B. Nejprve bude provedena extrakce DNA a následně amplifikační technika pomocí tepelného cykléru. Detekce amplifikované DNA bude provedena pomocí gelové elektroforézy Agrose barvené ethidium bromidem.
1. února 2023 do 30. března 2023

Spolupracovníci a vyšetřovatelé

Zde najdete lidi a organizace zapojené do této studie.

Vyšetřovatelé

  • Studijní židle: Mohamed H Alrawy, Faculty of Medicine, Sohag University
  • Studijní židle: Ebtisam M Gad, Faculty of Medicine, Sohag University

Publikace a užitečné odkazy

Osoba odpovědná za zadávání informací o studiu tyto publikace poskytuje dobrovolně. Mohou se týkat čehokoli, co souvisí se studiem.

Užitečné odkazy

Termíny studijních záznamů

Tato data sledují průběh záznamů studie a předkládání souhrnných výsledků na ClinicalTrials.gov. Záznamy ze studií a hlášené výsledky jsou před zveřejněním na veřejné webové stránce přezkoumány Národní lékařskou knihovnou (NLM), aby se ujistily, že splňují specifické standardy kontroly kvality.

Hlavní termíny studia

Začátek studia (Aktuální)

1. prosince 2022

Primární dokončení (Aktuální)

30. března 2023

Dokončení studie (Očekávaný)

1. května 2023

Termíny zápisu do studia

První předloženo

19. listopadu 2022

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

29. listopadu 2022

První zveřejněno (Aktuální)

8. prosince 2022

Aktualizace studijních záznamů

Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)

12. dubna 2023

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

11. dubna 2023

Naposledy ověřeno

1. dubna 2023

Více informací

Termíny související s touto studií

Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)

Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?

NE

Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty

Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA

Ne

Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA

Ne

Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .

Klinické studie na Pseudomonas Aeruginosa

Klinické studie na kultivace na cetrimidovém agaru

Předplatit