Detección molecular de genes de factores de virulencia y bomba de eflujo en Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas)
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Descripción detallada
La patogenia de las infecciones por PA es multifactorial y con frecuencia se complica por la resistencia intrínseca de la bacteria a algunos agentes antimicrobianos como las sulfonamidas, las tetraciclinas y la trimetoprima, así como por su capacidad para adquirir o desarrollar rápidamente resistencia a las principales clases de antibióticos como los aminoglucósidos. , quinolonas, betalactámicos y polimixinas (Bassetti et al., 2018).
Los sistemas de eflujo, que median la expulsión de los antibióticos fuera de la célula poco después de su entrada, la producción de enzimas para inactivar los antibióticos y la disminución de la permeabilidad a través de la pared celular son algunos de los mecanismos utilizados por la AP para desarrollar resistencia a los antimicrobianos (Meletis & Bagkeri, 2013).
PA posee una gran cantidad de factores de virulencia que juegan un papel importante en la patogénesis y la determinación de la gravedad de la infección. Estos factores de virulencia actúan solos o en sinergia entre sí para causar daño tisular, necrosis y muerte celular. Entre los factores de virulencia de PA, los principales determinantes de la virulencia son el sistema de secreción de tipo III (T3SS) y la detección de quórum (sistema de señalización de célula a célula). El T3SS es un complejo similar a una aguja, también conocido como inyectosoma, que permite que una bacteria entregue diferentes proteínas efectoras como ExoS, ExoT, ExoU y ExoY a través de la membrana en una célula huésped, alterando las funciones de la célula huésped y aumentando la supervivencia bacteriana. tasas (Horna G y, Ruiz J, 2021). En este estudio, nuestro objetivo fue evaluar la prevalencia de la resistencia a los antibióticos causada por la presencia de genes Efflux y algunos factores de virulencia en Pseudomonas aeruginosa de aislamientos clínicos.
Tipo de estudio
Inscripción (Anticipado)
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Noha S Shafik, lecturer
- Número de teléfono: +20 01067261504
- Correo electrónico: Nohasaber@med.sohag.edu.eg
Copia de seguridad de contactos de estudio
- Nombre: Nesma A Mohammed, lecturer
- Número de teléfono: +20 01006780725
- Correo electrónico: Nesmaaateef@med.sohag.edu.eg
Ubicaciones de estudio
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Sohag, Egipto
- Reclutamiento
- Sohag University
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Contacto:
- Noha S Shafik, Lecturer
- Número de teléfono: 01067261504
- Correo electrónico: nohasaber@med.sohag.edu.eg
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Contacto:
- Nesma A Mohamed, Lecturer
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Método de muestreo
Población de estudio
Este estudio se realizará a todos los pacientes que padezcan infecciones que puedan ser causadas por pseudomonas aeruginosa.
Se recogerán muestras (pus, orina, sangre, esputo, secreción del oído) de diferentes departamentos del hospital universitario de sohag.
Los Datos Clínicos se obtendrán como:
- Datos sobre manifestaciones clínicas que incluyen fiebre, expectoración, pus de heridas, síntomas urinarios, síntomas de infecciones del tracto respiratorio superior y síntomas de otitis externa.
Descripción
Criterios de inclusión:
- Todos los pacientes que padezcan infecciones que puedan ser causadas por pseudomonas aeruginosa
Criterio de exclusión:
- Muestras diagnosticadas con organismos distintos de pseudomonas aeruginosa.
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Modelos observacionales: Control de caso
- Perspectivas temporales: Transversal
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
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Pacientes con infecciones por pseudomonas aeruginosa
Todos los pacientes padecen infecciones que pueden ser causadas por pseudomonas aeruginosa. Los Datos Clínicos se obtendrán como:
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Las muestras se inocularán en agar cetrimida mediante la técnica de cultivo en placa.
las colonias en agar cetrimida se extenderán sobre un portaobjetos de vidrio y se teñirán con tinción de Gram
Las pruebas de sensibilidad a los antibióticos se realizarán mediante el método de difusión en disco según CLSI
Detección molecular de genes de eflujo y algunos genes de virulencia mediante PCR convencional
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Pacientes con infecciones distintas de pseudomonas aeruginosa
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Las muestras se inocularán en agar cetrimida mediante la técnica de cultivo en placa.
las colonias en agar cetrimida se extenderán sobre un portaobjetos de vidrio y se teñirán con tinción de Gram
Las pruebas de sensibilidad a los antibióticos se realizarán mediante el método de difusión en disco según CLSI
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Aislamiento e identificación de pseudomonas aeruginosa mediante cultivo y técnicas de sistemas automatizados
Periodo de tiempo: 1 diciembre 2022 a 1 febrero 2023
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identificación de pseudomonas aeruginosa en diferentes muestras clínicas recolectadas del hospital de la Universidad de Sohag usando diferentes técnicas de laboratorio como cultivo en agar citramida, tinción con Gram, reacciones bioquímicas como la prueba de oxidasa, prueba de fermentación de azúcar e identificación automatizada usando el sistema vitek2
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1 diciembre 2022 a 1 febrero 2023
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Identificación de un patrón reciente de sensibilidad a los antibióticos mediante el método de difusión en disco de Kerby modificado
Periodo de tiempo: 1 diciembre 2022 a 1 febrero 2023
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Determinación del patrón reciente de sensibilidad antibiótica utilizando diferentes antibióticos por el método de difusión en disco esparciendo el inóculo en placa de pitry que contiene Muller Hinton Agar, luego se colocan diferentes discos que contienen antibióticos a una distancia de 1.5 cm, luego se incuban a 37 co por 24 hrs.
Se mide el diámetro de la zona de inhibición para determinar la CIM de cada antibiótico según las directrices de CSLI 2022.
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1 diciembre 2022 a 1 febrero 2023
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Identificación molecular de algunos factores de virulencia y genes de eflujo mediante PCR
Periodo de tiempo: 1 de febrero de 2023 al 30 de marzo de 2023
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Detección molecular de algunos factores de virulencia y genes de eflujo utilizando cebadores específicos mediante PCR convencional.
Se usarán cebadores de los siguientes genes como exoS,exoU, toxA, mex A, mex B. Primero se realizará la extracción de ADN, seguida de la técnica de amplificación usando el termociclador.
La detección del ADN amplificado se realizará mediante electroforesis en gel Agrose teñido con bromuro de etidio.
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1 de febrero de 2023 al 30 de marzo de 2023
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Silla de estudio: Mohamed H Alrawy, Faculty of medicine, Sohag university
- Silla de estudio: Ebtisam M Gad, Faculty of medicine, Sohag university
Publicaciones y enlaces útiles
Enlaces Útiles
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Anticipado)
Fechas de registro del estudio
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Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
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Otros números de identificación del estudio
- Soh-Med-22-11-18
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Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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