Detecção Molecular de Genes de Bomba de Efluxo e Fatores de Virulência em Pseudomonas Aeruginosa (Pseudomonas)
Visão geral do estudo
Status
Condições
Descrição detalhada
A patogênese das infecções por AP é multifatorial e frequentemente complicada pela resistência intrínseca da bactéria a alguns agentes antimicrobianos, como sulfonamidas, tetraciclinas e trimetoprim, bem como sua capacidade de adquirir ou desenvolver rapidamente resistência às principais classes de antibióticos, como os aminoglicosídeos , quinolonas, B-lactâmicos e polimixinas (Bassetti et al., 2018).
Os sistemas de efluxo, que medeiam a expulsão de antibióticos para fora da célula logo após a entrada, a produção de enzimas para inativar antibióticos e a diminuição da permeabilidade através da parede celular são alguns mecanismos usados pelo AP para desenvolver resistência antimicrobiana (Meletis & Bagkeri, 2013).
PA possui um grande número de fatores de virulência que desempenham um papel significativo na patogênese e na determinação da gravidade da infecção. Esses fatores de virulência agem sozinhos ou em sinergia uns com os outros para causar dano tecidual, necrose e morte celular. Dentre os fatores de virulência do PA, os principais determinantes de virulência são o sistema de secreção tipo III (T3SS) e o quorum sensing (sistema de sinalização célula a célula). O T3SS é um complexo semelhante a uma agulha, também conhecido como injetável, que permite que uma bactéria forneça diferentes proteínas efetoras, como ExoS, ExoT, ExoU e ExoY, através da membrana para uma célula hospedeira, alterando as funções da célula hospedeira e aumentando a sobrevivência bacteriana taxas (Horna G e, Ruiz J, 2021). Neste estudo, objetivamos avaliar a prevalência de resistência a antibióticos causada pela presença de genes Eflux e alguns fatores de virulência em Pseudomonas aeruginosa de isolados clínicos.
Tipo de estudo
Inscrição (Antecipado)
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Noha S Shafik, lecturer
- Número de telefone: +20 01067261504
- E-mail: Nohasaber@med.sohag.edu.eg
Estude backup de contato
- Nome: Nesma A Mohammed, lecturer
- Número de telefone: +20 01006780725
- E-mail: Nesmaaateef@med.sohag.edu.eg
Locais de estudo
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Sohag, Egito
- Recrutamento
- Sohag University
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Contato:
- Noha S Shafik, Lecturer
- Número de telefone: 01067261504
- E-mail: nohasaber@med.sohag.edu.eg
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Contato:
- Nesma A Mohamed, Lecturer
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Método de amostragem
População do estudo
Este estudo será realizado em todos os pacientes que sofrem de infecções que podem ser causadas por pseudomonas aeruginosa.
Amostras (pus, urina, sangue, escarro, secreção do ouvido) serão coletadas de diferentes departamentos do hospital universitário sohag.
Dados Clínicos serão obtidos como:
- Dados sobre manifestações clínicas, incluindo febre, expectoração, pus de feridas, sintomas urinários, sintomas de infecções do trato respiratório superior e sintomas de otite externa.
Descrição
Critério de inclusão:
- Todos os pacientes que sofrem de infecções que podem ser causadas por pseudomonas aeruginosa
Critério de exclusão:
- Amostras com diagnóstico de organismos diferentes de pseudomonas aeruginosa.
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Modelos de observação: Controle de caso
- Perspectivas de Tempo: Transversal
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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Pacientes com infecções por pseudomonas aeruginosa
Todos os pacientes sofrem de infecções que podem ser causadas por pseudomonas aeruginosa. Dados Clínicos serão obtidos como:
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As amostras serão inoculadas em ágar cetrimida pela técnica de plaqueamento.
colônias em ágar cetrimida serão espalhadas em lâmina de vidro e coradas por coloração de gram
O teste de sensibilidade a antibióticos será feito pelo método de difusão em disco de acordo com o CLSI
Detecção molecular de genes de efluxo e alguns genes de virulência por PCR convencional
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Pacientes com outras infecções além de pseudomonas aeruginosa
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As amostras serão inoculadas em ágar cetrimida pela técnica de plaqueamento.
colônias em ágar cetrimida serão espalhadas em lâmina de vidro e coradas por coloração de gram
O teste de sensibilidade a antibióticos será feito pelo método de difusão em disco de acordo com o CLSI
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Isolamento e identificação de pseudomonas aeruginosa usando técnicas de cultura e sistemas automatizados
Prazo: 1 de dezembro de 2022 a 1 de fevereiro de 2023
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identificação de pseudomonas aeruginosa em diferentes amostras clínicas coletadas no hospital Sohag University usando diferentes técnicas laboratoriais como cultura em ágar citramida, coloração com Gram, reações bioquímicas como teste de oxidação, teste de fermentação de açúcar e identificação automatizada usando o sistema vitek2
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1 de dezembro de 2022 a 1 de fevereiro de 2023
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Identificação do padrão recente de sensibilidade a antibióticos usando o método Kerby-Disc Diffusion modificado
Prazo: 1 de dezembro de 2022 a 1 de fevereiro de 2023
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Determinação do padrão recente de sensibilidade a antibióticos usando diferentes antibióticos pelo método de difusão em disco, espalhando o inóculo em placa pitry contendo Muller Hinton Agar, em seguida, discos diferentes contendo antibióticos são colocados a uma distância de 1,5 cm e incubados a 37 co por 24 horas.
O diâmetro da zona de inibição é medido para determinar o MIC para cada antibiótico de acordo com as diretrizes do CSLI 2022.
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1 de dezembro de 2022 a 1 de fevereiro de 2023
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Identificação molecular de alguns fatores de virulência e genes de efluxo usando PCR
Prazo: 1 de fevereiro de 2023 a 30 de março de 2023
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Detecção molecular de alguns fatores de virulência e genes de efluxo usando primers específicos por PCR convencional.
Os primers dos seguintes genes serão usados como exoS,exoU, toxA, mex A, mex B. A extração de DNA será feita primeiro, seguida pela técnica de amplificação usando o termociclador.
A detecção do DNA amplificado será feita por eletroforese em gel Agrose corado com brometo de etídio.
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1 de fevereiro de 2023 a 30 de março de 2023
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Cadeira de estudo: Mohamed H Alrawy, Faculty of medicine, Sohag university
- Cadeira de estudo: Ebtisam M Gad, Faculty of medicine, Sohag university
Publicações e links úteis
Links úteis
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Real)
Conclusão do estudo (Antecipado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- Soh-Med-22-11-18
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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