Hodnocení endoteliálních a vaskulárních funkcí u obézních pacientů (FUENVASOB) (FUENVASOB)

Materiály a metody:

Studie se zúčastní 15 mladých obézních mužů ve věku od 15 do 40 let přijatých do divize Auxologie (nezletilí) a Divize metabolických chorob (dospělí), Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Piancavallo, Itálie.

Kritéria pro zařazení do studijní skupiny budou:

1. BMI > 97. percentil pro věk a pohlaví (nezletilí) a > 35 (dospělí).
2. neprováděli strukturované programy fyzické aktivity (pravidelná aktivita delší než 120 minut/týden) během 6 měsíců před studií.
3. nepřítomnost patologií, jako je diabetes nebo inzulínová rezistence.
4. nepřítomnost příznaků/příznaků souvisejících s kardiovaskulárními, respiračními, gastrointestinálními nebo muskuloskeletálními patologiemi, které jsou pro provádění testů kontraindikovány.

Kromě toho bude mezi přáteli a kolegy z Department of Medical Area Univerzity v Udine přijato 15 kontrolních subjektů mužského pohlaví podobného věku s normálním BMI, kteří budou muset splnit kritéria pro zařazení 2-4 uvedená výše.

Antropometrické charakteristiky a tělesné složení pacientů budou stanoveny pomocí tetrapolární impedanční analýzy (Human-IM Scan, DS-Medigroup, Milán, Itálie).

Experimentální protokoly Testy budou prováděny pod přísným lékařským dohledem podle standardních bezpečnostních protokolů. Navrhovaná opatření jsou neinvazivní s výjimkou odběru žilní krve.

Na začátku a na konci standardní doby pobytu pacienta v nemocnici (hospitalizační/rehabilitační období v délce 3 týdnů včetně kombinované intervence aerobní pohybové aktivity, kalorické restrikce a psychologického poradenství) podstoupí každý subjekt dne dva různé dny podle následujících protokolů:

1. První den bude průběžně určován průtok krve v a. femoralis communis, metodou Echo-Doppler (duplexní režim) při pasivních pohybech flexe-extenze kolena (pasivní pohyb nohou, PLM). K provedení tohoto měření zaujme subjekt vsedě na speciálním sedadle. Po dostatečném seznámení provede subjekt dvě opakování, každé po dobu asi jedné minuty, oddělené několikaminutovými intervaly, série pasivních pohybů (končetina vedená operátorem) flexe a extenze dolní končetiny (šířka pohybu 90°; úhel kolena 180°-90°-180°), s frekvencí 1 Hz. Při pasivních pohybech bude průtok krve ve společné stehenní tepně určován Echo-Dopplerem (duplexní režim). Průtok krve bude vypočítán podle standardizovaných postupů a se synchronizací se záznamem EKG na základě naměřených hodnot průměru femorální tepny (B-mód) a rychlosti průtoku krve (pulzně-vawe mód). Data získaná během dvou opakování experimentu budou pro analýzu vzájemně superponována. Ze sledování průtoku krve jako funkce času budou vypočteny následující parametry hodnocení periferní vaskulárně-mikrovaskulární funkce: vrchol průtoku krve; rozdíl mezi špičkovým průtokem a klidovým průtokem; plocha pod křivkou průtoku krve v závislosti na čase.

2. Druhý den bude pacient provádět cvičení na ergometru s přírůstkovým cyklem (3 minuty odpočinek, 20 wattů po 2 minuty a poté přírůstky 20 wattů/min) prováděné až do dobrovolného vyčerpání, za účelem stanovení „špičkové“ spotřeby O2 (vrchol V̇O2) a „ventilační prahy“.

   Plicní ventilace, emise V02 a oxidu uhličitého (VCO2) budou stanoveny dech po dechu expresním metabolizátorem CPX (Medical Graphics Corporation, St Paul, MN, USA). Arteriální saturace kyslíkem (SaO2) bude stanovena pulzní oxymetrií ušního lalůčku. Srdeční frekvence (tepová frekvence [HR]) bude zjišťována na základě elektrokardiografického (EKG) signálu, arteriální tlak bude zjišťován tlakoměrem. Vnímání únavy bude stanoveno pomocí Borgovy stupnice 6-20.

3. Vzorky žilní krve budou odebrány z předlokální žíly paže před protokolem popsaným v bodě 1) a bezprostředně po postupném cvičení popsaném v bodě 2). Na krevních vzorcích budou stanoveny hodnotící proměnné funkce endotelu a markery zánětu.

Část vzorku bude doručena podle specifických protokolů do analytické laboratoře nemocnice Piancavallo, kde budou stanoveny následující proměnné:

Celkový a HDL cholesterol, HOMA-IR (inzulinémie, krevní glukóza), alfa-1 glykoprotein, CRP, IL-6, TNF-alfa, ICAM-1, VCAM-1, testosteron, kortizol, inzulín, irisin, pankreatický peptid, GH plazmatický laktát; dusitany, nitráty, prostacyklin (6-keto), von Willebrandův faktor, endotelin, kyselina hyaluronová, syndekan, heparansulfát; Plazmatický a sérový BDNF, plazmatický TrkB receptor; Metabolity BCAA (leucin, isoleucin, valin) a BCAA (3 hydroxy-isobutyrát) (valinový meziprodukt).