Výsledky 36 vs 38 hodinových intervalů od spouštění ovulace po odběr oocytů: multicentrická randomizovaná kontrolovaná studie

1.0 STUDOVANÁ POPULACE A VÝBĚR PACIENTŮ Ženy podstupující ART léčbu v zúčastněných centrech budou vyzvány, aby se zapsaly do studie. Každá pacientka se bude moci zúčastnit pouze jednou cyklu odběru oocytů (OPU) a embryí získaných z tohoto cyklu. Podrobnosti kritérií pro zařazení a vyloučení jsou popsány v části ''Způsobilost''.

2.0 ZPŮSOB RANDOMIZACE A ZAKRÝVÁNÍ PŘIDĚLENÍ Páry, které splňují kritéria studie, budou o studii informovány, když zahájí léčbu, a bude jim poskytnut čas na rozhodnutí. V den podání spouštěče ovulace budou pacientky, které dají písemný informovaný souhlas, zařazeny a odpovědnou sestrou náhodně rozděleny do jedné ze studijních skupin (36 nebo 38 hodin). O době podávání bude pacient poučen sestrou. Informace o náhodnosti nebudou v průběhu studie sdíleny s klinickými lékaři, laboratorním týmem ani jinými zaměstnanci na klinice. Pacient bude také požádán, aby tyto informace nesděloval nikomu z personálu.

Randomizace bude prováděna online v reálném čase profesionální třetí stranou, jejíž služby splňují mezinárodní regulační směrnice. Randomizační sekvence bude stratifikována podle léčebného centra, věkové skupiny žen (18-27, 28-34, 35-37, 38-40, 41-42), předpokládaného dne přenosu embryí (den 3 a den 5) a plánu využívat preimplantační genetické testování embryí. Budou vytvořeny náhodné bloky různé velikosti (4, 6 nebo 8), aby se zajistil podobný počet pacientů mezi studijními skupinami v každé vrstvě během a na konci studie.

3.0. LÉČEBNÉ PROTOKOLY Intervencí v této studii je doba mezi spuštěním ovulace a procedurou OPU. Každá klinika proto bude aplikovat svou vlastní rutinní léčbu a bude si sama vybírat protokoly/léky/materiály a/nebo postupy, které budou použity.

3.1. Řízená ovariální hyperstimulace a spouštění zrání oocytů Podle preferencí lékaře lze použít jeden ze tří protokolů pro řízenou ovariální hyperstimulaci (COH): Antagonistický protokol, progestinem aktivovaná ovariální stimulace nebo agonistický protokol.

Jakmile je učiněno rozhodnutí o spuštění zrání oocytů, odpovědná sestra náhodně vybere pacientku.

3.2. Postup odběru oocytů (OPU) V den OPU vrchní sestra potvrdí a zaznamená čas, kdy pacientka léky podávala. Poté zaznamená čas zahájení OPU a posoudí dodržování protokolu. Čas OPU bude založen na hodině a minutě, kdy byl odsát a zaznamenán první folikul.

Zaznamená se celkový počet folikulů větších než 10 mm na ultrasonografii provedené před OPU a přítomnost známek předčasné ovulace. Jehla a roztok běžně používané klinikou budou použity pro OPU. Všechny folikuly větší než deset milimetrů v průměru budou aspirovány.

3.3. Fertilizace, kultivace embryí a přenos embryí Všechny zralé oocyty získané pomocí OPU budou oplodněny intracytoplazmatickou injekcí spermie (ICSI). Po oplodnění budou oocyty/embrya kultivovány podle standardních protokolů centra.

Embryo (embrya) bude přeneseno čerstvé nebo zmrazené a rozmražené podle uvážení lékaře. Příprava na přenos zmrazených a rozmražených embryí bude provedena jako přirozený, modifikovaný přirozený nebo umělý cyklus, opět podle uvážení lékaře.

Přenosy embryí budou prováděny pod vedením transabdominální ultrasonografie ve fázi štěpení nebo blastocysty (den 3 nebo den 5) podle preferencí lékaře a klinického protokolu. Jedno nebo dvě embrya budou přenesena v souladu s předpisy Ministerstva zdravotnictví. Podpora luteální fáze bude poskytována v souladu s běžnou léčbou každé kliniky.

4. HODNOCENÍ VÝSLEDKŮ Primární a sekundární ukazatele výsledků jsou popsány v části „Opatření výsledků“.

5. SBĚR A SPRÁVA DAT 5.1. Sběr dat Data studie budou denně zadávána do formuláře pro elektronický sběr dat (EDC) studie. Formuláře EDC jsou vyplněny online v reálném čase a uloženy profesionální třetí stranou, jejíž služby budou splňovat certifikace shody po celém světě, jako je FDA CFR Part 11, GDPR (EU), ICH GCP (HIPAA, USA), ISO 27001 a ISO 9001 a bude v souladu s GCP, HL7 FHIR a dalšími regulačními pokyny.

Každé čtvrtletí bude člen studijního týmu porovnávat konzistenci mezi údaji zapsanými v klinických záznamech a formulářem EDC. Přednostně a pokud je to možné, budou porovnány všechny skutečné soubory v centru a formulář EDC; není-li to možné, bude náhodně vybrána a porovnána část souborů (alespoň 50 %).

5.2. Doba sběru dat Výsledky budou vyhodnoceny po vyplnění informací o posledním zahrnutém pacientovi. V tomto okamžiku budou všechny záznamy v databázi potvrzeny jako úplné a teprve poté bude rozbit randomizační kód a začne proces analýzy dat.

5.3. Elektronická databáze, zadávání dat a kontrola kvality Pro evidenci studijních dat bude vytvořena elektronická databáze. Tato databáze bude udržována externí organizací schopnou splnit definované standardy bezpečnosti, důvěrnosti, zálohování a kvality. Studijní data budou do formuláře EDC denně zadávat pověření studijní koordinátoři a databáze bude aktualizována a zálohována v reálném čase. Do databáze budou mít přístup pouze oprávněné osoby a každá osoba bude oprávněna vidět, vidět/zapisovat nebo vidět/zapisovat/upravovat data podle své role. Úprava nebo vymazání údajů bude vyžadovat souhlas minimálně dvou oprávněných osob a tyto změny budou sledovány a odůvodněny.

Kontrola kvality bude během studijního období prováděna čtvrtletně. V každém období budou původní soubory sledování pacientů nejlépe všech (nebo pokud to není možné, náhodně vybrané poloviny) účastníků nashromážděných v každém centru porovnány s údaji v databázi. Přijatelná míra chyb je nula pro primární měření výsledku a méně než 5 % pro ostatní proměnné. Při jakékoli kontrole, kdy nesrovnalost mezi původními formuláři a databází ve středisku přesáhne 5 %, budou původní záznamy tohoto střediska porovnány se všemi záznamy tohoto střediska v databázi a provede se čištění dat. Aby se minimalizovaly chyby a opomenutí při zadávání údajů, budou stanovena povinná pole ve formuláři pro elektronický sběr dat a bez vyplnění těchto polí nebude formulář uložen do systému; podobně software nedovolí zadat pro každý parametr jinou hodnotu, než jsou očekávané hodnoty.

6. STATISTICKÉ HODNOCENÍ 6.1. Výpočet velikosti vzorku Vzhledem k tomu, že podíl oocytů v metafázi 2 získaných na jeden aspirovaný folikul během OPU na naší klinice je 57 %, výpočty založené na hypotéze, že při zkoušené intervenci bude dosaženo absolutního 10% zvýšení této frekvence, bylo zjištěno, že celkem 770 pacientů by mělo být randomizováno s 80% silou a 5% hladinou alfa chyby. Za předpokladu, že přibližně 10 % pacientů během sledování vypadne ze studie, bude randomizováno 850 pacientů. Studie se zúčastní šest center a předpokládá se, že tohoto počtu bude dosaženo za 1 rok s předpokládaným tempem studie.

V prvních dvou průběžných analýzách může být tato velikost vzorku revidována podle dosud získaných údajů o účinnosti ve studii za předpokladu, že budou zachovány stejné hodnoty alfa chyby a statistické míry síly.

6.2. Nakládání s chybějícími údaji Bude vynaloženo veškeré úsilí k úplnému shromáždění všech plánovaných údajů. Pacienti s chybějícími údaji však nebudou z analýz vyloučeni, ale budou zahrnuti do analýzy záměru léčby. Vzhledem k tomu, že někteří pacienti nemusí dokončit protokol studie nebo mohou přerušit svůj vztah před koncem období sledování, bude do studie zahrnuto o něco více pacientů, než je vypočtená velikost vzorku. Pokud existují pacienti s chybějícími daty měření výsledků, bude provedena analýza citlivosti, aby se vypočítalo, jak se mohou výsledky změnit v různých scénářích.

6.3. Plán statistické analýzy Vzhledem k tomu, že hodnocení výsledků bude prováděno primárně podle principu intence-to-treat, nebude vynechání sledování znamenat vyřazení ze studie. Doba mezi podáním léku použitého pro zrání oocytů a OPU bude zaznamenána jako nenastávající v souladu se skupinou, do které byla pacientka randomizována. Třicet minut před a po cíli (36 hodin ± 30 minut nebo 38 hodin ± 30 minut) bude považováno za spadajících do protokolu.

Na druhou stranu, pokud z nějakého důvodu doba mezi podáním léku-OPU nebude v souladu s protokolem, do kterého byl pacient zařazen podle výše uvedených kritérií, nebude pacient ze studie vyloučen; dotyčný čas bude zaznamenán v hodinách a minutách a zahrnut do analýzy podle protokolu, která bude provedena podle tohoto času. Analýza podle protokolu bude provedena v hodinových intervalech.

Obecně bude srovnání spojitých proměnných mezi skupinami provedeno t-testem nebo Mann-Whitney U testem podle distribučních charakteristik každé proměnné a srovnání kategoriálních proměnných bude provedeno pomocí chí-kvadrát a jejích derivátů.

Hodnoty spojitých proměnných ve skupinách budou shrnuty s vhodnými mírami centrální agregace a disperze, zatímco hodnoty kategoriálních proměnných budou vyjádřeny v absolutních hodnotách a procentech.

Bude provedena multivariabilní regresní analýza pro vliv spouštěcího času OPU, věku ženy, počtu mikroinjikovaných oocytů v metafázi 2, celkového počtu embryí přenesených na kumulativní živě narozené děti.

6.3.1. Průběžné analýzy

Data pro primární a sekundární výstupní měření budou vyhodnocována v 6měsíčních intervalech v průběhu celého období studie. V průběžných analýzách bude použito Peto-Haybittle pravidlo zastavení a pro předčasné ukončení studie bude vyžadováno p < 0,01 pro srovnání primárního měření výsledku. První průběžná analýza se plánuje provést při zařazení prvních 80 pacientů nebo o 3 měsíce později, podle toho, co nastane dříve.

7. BEZPEČNOST, NEŽÁDOUCÍ ÚČINKY A RIZIKA Účastníci budou informováni o rizicích léčby a očekávání úspěchu poskytnutím formuláře informovaného souhlasu se studií a formuláře informovaného souhlasu ART.

Celkový průběh studie bude v pravidelných intervalech monitorován Radou pro monitorování dat a bezpečnosti, včetně míry zařazování pacientů, dodržování protokolu studie a nashromážděných výsledků. Tato bezpečnostní komise může doporučit předčasné ukončení studie.

Studijní postupy jsou standardní praxí ART a žádná farmaceutická činidla ani zdravotnické prostředky nebudou používány mimo rutinní praxi. Kromě rizik spojených se samotnou ART se neočekává, že by se studií bylo spojeno žádné další zdravotní riziko nebo finanční zátěž.

Závažná nežádoucí příhoda (SAE) je definována jako událost, která způsobí smrt, ohrožuje život, vyžaduje hospitalizaci nebo prodlužuje dobu hospitalizace nebo způsobuje trvalou/významnou neschopnost/invaliditu. Neočekává se, že k jedné z nich dojde.

Podezření na neočekávanou závažnou nežádoucí reakci (SUSAR) je definováno jako neočekávaná i závažná nežádoucí příhoda.

SAE a SUSAR budou zaznamenány a hlášeny pomocí formulářů SAE. Pokud se objeví SUSAR, výzkumník okamžitě vyplní formulář a okamžitě o tom bude informován Etický výbor Koç University a předseda Rady pro monitorování dat a bezpečnosti. Ministerstvo zdravotnictví bude informováno do 7 dnů, jde-li o život ohrožující událost, a do 15 dnů, nejde-li o život ohrožující událost.