Risultati degli intervalli di 36 o 38 ore dall'innesco dell'ovulazione al prelievo degli ovociti: uno studio controllato randomizzato multicentrico

1.0 POPOLAZIONE DELLO STUDIO E SELEZIONE DEI PAZIENTI Le donne sottoposte a trattamento ART presso i centri partecipanti saranno invitate ad iscriversi allo studio. Ogni paziente potrà partecipare una sola volta con un singolo ciclo di prelievo di ovociti (OPU) ed embrioni ottenuti da questo ciclo. I dettagli sui criteri di inclusione ed esclusione sono descritti nella sezione ''Idoneità''.

2.0 METODO DI RANDOMIZZAZIONE E NASCONDIMENTO DELL'ALLOCAZIONE Le coppie che soddisfano i criteri dello studio saranno informate sullo studio quando inizieranno il trattamento e avranno il tempo di decidere. Il giorno della somministrazione del trigger di ovulazione, le pazienti che danno il consenso informato scritto saranno arruolate e randomizzate in uno dei gruppi di studio (36 o 38 ore) dall'infermiere responsabile. Il paziente verrà istruito sull'orario di somministrazione dall'infermiere. Le informazioni sulla randomizzazione non saranno condivise con medici, team di laboratorio o altri dipendenti della clinica durante lo studio. Al paziente verrà inoltre chiesto di non condividere queste informazioni con nessuno del personale.

La randomizzazione verrà eseguita online in tempo reale da una società di terze parti professionale i cui servizi soddisfano le linee guida normative internazionali. La sequenza di randomizzazione sarà stratificata per centro di trattamento, gruppo di età femminile (18-27, 28-34, 35-37, 38-40, 41-42), giorno previsto del trasferimento dell'embrione (giorno 3 e giorno 5) e piano per utilizzare test genetici preimpianto per gli embrioni. Verranno creati blocchi randomizzati di dimensioni variabili (4,6 o 8) per garantire un numero simile di pazienti tra i gruppi di studio in ogni strato durante e alla fine dello studio.

3.0. PROTOCOLLI DI TRATTAMENTO L'intervento in questo studio è il tempo che intercorre tra il trigger dell'ovulazione e la procedura OPU. Pertanto, ogni clinica applicherà i propri trattamenti di routine e farà le proprie scelte in merito ai protocolli/farmaci/materiali e/o procedure da utilizzare.

3.1. Iperstimolazione ovarica controllata e attivazione della maturazione degli ovociti È possibile applicare uno dei tre protocolli per l'iperstimolazione ovarica controllata (COH) in base alle preferenze del medico: protocollo antagonista, stimolazione ovarica innescata da progestinico o protocollo agonista.

Una volta presa la decisione di innescare la maturazione degli ovociti, l'infermiere responsabile randomizzerà il paziente.

3.2. Procedura di prelievo degli ovociti (OPU) Il giorno dell'OPU, l'infermiere responsabile confermerà e annoterà l'ora in cui la paziente ha somministrato il farmaco. Quindi registrerà l'ora di inizio dell'OPU e valuterà l'aderenza al protocollo. Il tempo di OPU sarà basato sull'ora e sul minuto in cui il primo follicolo è stato aspirato e registrato.

Verrà registrato il numero totale di follicoli superiori a 10 mm all'ecografia eseguita prima dell'OPU e la presenza di segni di ovulazione precoce. L'ago e la soluzione abitualmente utilizzati dalla clinica verranno utilizzati per l'OPU. Verranno aspirati tutti i follicoli di diametro superiore a dieci millimetri.

3.3. Fecondazione, coltura embrionale e trasferimento embrionale Tutti gli ovociti maturi ottenuti mediante OPU saranno fecondati mediante iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI). Dopo la fecondazione, gli ovociti/embrioni saranno coltivati ​​secondo i protocolli standard del centro.

Gli embrioni saranno trasferiti freschi o congelati-scongelati a discrezione del medico. La preparazione per i trasferimenti di embrioni congelati-scongelati verrà eseguita come ciclo naturale, naturale modificato o artificiale, sempre a discrezione del medico.

I trasferimenti di embrioni saranno eseguiti sotto guida ecografica transaddominale allo stadio di scissione o blastocisti (giorno 3 o giorno 5) in base alle preferenze del medico e al protocollo clinico. Uno o due embrioni saranno trasferiti secondo le disposizioni del Ministero della Salute. Il supporto della fase luteale sarà fornito in conformità con il trattamento di routine di ciascuna clinica.

4. VALUTAZIONE DEI RISULTATI Le misure di esito primarie e secondarie sono descritte nella sezione ''Misure di esito''.

5. RACCOLTA E GESTIONE DEI DATI 5.1. Raccolta dati I dati dello studio verranno inseriti giornalmente nel modulo di raccolta dati elettronica (EDC) dello studio. I moduli EDC vengono compilati online in tempo reale e archiviati da una società di terze parti professionale i cui servizi soddisferanno le certificazioni di conformità in tutto il mondo come FDA CFR Part 11, GDPR (UE), ICH GCP (HIPAA, USA), ISO 27001 e ISO 9001 e si allineerà con GCP, HL7 FHIR e altre linee guida normative.

Ogni trimestre, un membro del team di studio confronterà la coerenza tra i dati inseriti nelle cartelle cliniche e il modulo EDC. Preferibilmente e se fattibile, verranno confrontati tutti i file effettivi nel centro e il modulo EDC; se ciò non fosse possibile, una parte dei file (almeno il 50%) verrà selezionata e confrontata in modo casuale.

5.2. Periodo di raccolta dei dati I risultati saranno valutati dopo che le informazioni dell'ultimo paziente incluso sono state completate. A questo punto, tutte le voci nel database saranno confermate come complete e solo allora il codice di randomizzazione verrà decifrato e inizierà il processo di analisi dei dati.

5.3. Database elettronico, inserimento dati e controllo di qualità Verrà istituito un database elettronico per registrare i dati dello studio. Questo database sarà gestito da un'organizzazione esterna in grado di soddisfare gli standard di sicurezza, riservatezza, backup e qualità da definire. I dati dello studio verranno inseriti quotidianamente nel modulo EDC dello studio dai coordinatori dello studio autorizzati e il database verrà aggiornato e sottoposto a backup in tempo reale. Solo le persone autorizzate avranno accesso al database e ogni persona sarà autorizzata a vedere, vedere/scrivere o vedere/scrivere/modificare i dati in base al proprio ruolo. La modifica o la cancellazione dei dati richiederà l'approvazione di almeno due persone autorizzate e tali modifiche saranno tracciate e giustificate.

Il controllo di qualità verrà eseguito trimestralmente durante il periodo di studio. In ogni periodo, i file originali di follow-up dei pazienti di preferibilmente tutti (o se ciò non è fattibile, metà selezionata casualmente) dei partecipanti accumulati in ciascun centro verranno confrontati con i dati nel database. Il tasso di errore accettabile è pari a zero per la misura dell'esito primario e inferiore al 5% per le altre variabili. In qualsiasi controllo, quando la discrepanza tra i moduli originali e il database in un centro supera il 5%, i record originali di quel centro verranno confrontati con tutte le voci di quel centro nel database e verrà eseguita la pulizia dei dati. Al fine di ridurre al minimo gli errori e le omissioni di inserimento dei dati, saranno determinati i campi obbligatori da compilare nel modulo elettronico di raccolta dati e il modulo non verrà salvato nel sistema senza la compilazione di tali campi; analogamente il software non consentirà l'inserimento di un valore diverso da quello previsto per ogni parametro.

6. VALUTAZIONE STATISTICA 6.1. Calcolo della dimensione del campione Considerando che il tasso di ovociti in metafase-2 ottenuti per follicolo aspirato durante l'OPU nella nostra clinica è del 57%, i calcoli basati sull'ipotesi che un aumento assoluto di questo tasso del 10% sarà raggiunto con l'intervento da provare, è è stato rivelato che un totale di 770 pazienti dovrebbe essere randomizzato all'80% di potenza e al 5% di errore alfa. Supponendo che circa il 10% dei pazienti abbandoni lo studio durante il follow-up, 850 pazienti sarebbero stati randomizzati. Sei centri parteciperanno allo studio e si pensa che questo numero sarà raggiunto in 1 anno con il tempo di studio previsto.

Nelle prime due analisi intermedie, questa dimensione del campione può essere rivista in base ai dati di efficacia ottenuti finora nello studio, a condizione che vengano mantenuti gli stessi tassi di errore alfa e potenza statistica.

6.2. Gestione dei dati mancanti Verrà fatto ogni sforzo per raccogliere tutti i dati pianificati per intero. Tuttavia, i pazienti con dati mancanti non saranno esclusi dalle analisi, ma saranno inclusi nell'analisi intent-to-treat. Considerando che alcuni pazienti potrebbero non completare il protocollo dello studio o interrompere la loro relazione prima della fine del periodo di follow-up, nello studio saranno inclusi un numero leggermente superiore di pazienti rispetto alla dimensione del campione calcolata. Quando ci sono pazienti con dati di misurazione dell'esito mancanti, verrà eseguita un'analisi di sensibilità per calcolare come i risultati possono cambiare in diversi scenari.

6.3. Piano di analisi statistica Poiché la valutazione dei risultati sarà effettuata principalmente secondo il principio dell'intenzione di trattare, l'abbandono del follow-up non significherà l'abbandono dello studio. Il tempo tra il momento della somministrazione del farmaco utilizzato per la maturazione degli ovociti e l'OPU verrà registrato come non verificatosi in accordo con il gruppo a cui il paziente è stato randomizzato. Trenta minuti prima e dopo l'obiettivo (36 ore ± 30 minuti o 38 ore ± 30 minuti) saranno considerati all'interno del protocollo.

Se invece, per qualsiasi ragione, il tempo intercorrente tra somministrazione del farmaco e OPU non rispetta il protocollo a cui il paziente è stato assegnato secondo i criteri di cui sopra, il paziente non sarà escluso dallo studio; il tempo in questione verrà registrato in ore e minuti e inserito nell'analisi per protocollo da eseguire in base a tale tempo. L'analisi per protocollo verrà eseguita secondo intervalli di tempo di un'ora.

In generale, i confronti di variabili continue tra gruppi saranno effettuati mediante test t o test U di Mann-Whitney in base alle caratteristiche di distribuzione di ciascuna variabile, mentre i confronti di variabili categoriali verranno effettuati mediante chi-quadro e sue derivate.

I valori delle variabili continue nei gruppi saranno riassunti con opportune misure di aggregazione centrale e dispersione, mentre i valori delle variabili categoriali saranno espressi in valori assoluti e percentuali.

Verrà eseguita un'analisi di regressione multivariata per l'effetto del tempo trigger-OPU, l'età della femmina, il numero di ovociti in metafase-2 microiniettati, il numero totale di embrioni trasferiti su nati vivi cumulativi.

6.3.1. Analisi provvisorie

I dati per le misure di esito primarie e secondarie saranno valutati a intervalli di 6 mesi durante il periodo di studio. La regola di arresto Peto-Haybittle verrà utilizzata nelle analisi ad interim e sarà richiesto un p <0,01 per il confronto della misura dell'esito primario per interrompere lo studio in anticipo. La prima analisi ad interim dovrebbe essere eseguita quando vengono arruolati i primi 80 pazienti o 3 mesi dopo, a seconda di quale evento si verifichi per primo.

7. SICUREZZA, EFFETTI AVVERSI E RISCHI I partecipanti saranno informati sui rischi del trattamento e l'aspettativa di successo fornendo un modulo di consenso informato per lo studio e un modulo di consenso informato ART.

Il corso complessivo dello studio sarà monitorato a intervalli regolari da un Comitato di monitoraggio dei dati e della sicurezza, compreso il tasso di arruolamento dei pazienti, il rispetto del protocollo dello studio e i risultati accumulati. Questo comitato di sicurezza potrebbe raccomandare di interrompere anticipatamente lo studio.

Le procedure di studio sono pratiche ART standard e nessun agente farmaceutico o dispositivo medico verrà utilizzato al di fuori della pratica di routine. A parte i rischi associati all'ART stessa, non si prevede che lo studio sia associato a ulteriori rischi medici o oneri finanziari.

L'evento avverso grave (SAE) è definito come un evento che provoca la morte, minaccia la vita, richiede il ricovero in ospedale o prolunga la durata del ricovero o causa un'incapacità/disabilità permanente/significativa. Uno di questi non dovrebbe verificarsi.

Una sospetta reazione avversa grave inaspettata (SUSAR) è definita come un evento avverso sia inaspettato che grave.

SAE e SUSAR saranno registrati e segnalati utilizzando i moduli SAE. Se si verifica una SUSAR, il modulo sarà compilato immediatamente dal ricercatore e il Comitato Etico dell'Università di Koç e il Presidente del Data and Safety Monitoring Board saranno informati immediatamente. Il Ministero della Salute sarà informato entro 7 giorni se l'evento è in pericolo di vita ed entro 15 giorni se l'evento non è in pericolo di vita.