Ergebnisse von 36- vs. 38-Stunden-Intervallen vom Ovulationsauslöser bis zur Eizellenentnahme: Eine multizentrische randomisierte kontrollierte Studie

1.0 STUDIENPOPULATION UND PATIENTENAUSWAHL Frauen, die sich einer ART-Behandlung in den teilnehmenden Zentren unterziehen, werden zur Teilnahme an der Studie eingeladen. Jede Patientin kann nur einmal mit einem einzelnen Zyklus zur Entnahme von Eizellen (OPU) und aus diesem Zyklus gewonnenen Embryonen teilnehmen. Einzelheiten zu Einschluss- und Ausschlusskriterien sind im Abschnitt „Berechtigung“ beschrieben.

2.0 RANDOMISIERUNGSMETHODE UND VERSTECKUNG DER ZUORDNUNG Paare, die die Studienkriterien erfüllen, werden zu Beginn der Behandlung über die Studie informiert und erhalten Zeit, sich zu entscheiden. Am Tag der Verabreichung des Ovulationsauslösers werden Patientinnen, die ihre schriftliche Einverständniserklärung abgeben, von der verantwortlichen Pflegekraft aufgenommen und randomisiert einer der Studiengruppen (36 oder 38 Stunden) zugeteilt. Der Patient wird von der Pflegekraft über den Verabreichungszeitpunkt informiert. Randomisierungsinformationen werden während der gesamten Studie nicht an Kliniker, das Laborteam oder andere Mitarbeiter in der Klinik weitergegeben. Der Patient wird auch gebeten, diese Informationen mit niemandem aus dem Personal zu teilen.

Die Randomisierung wird online in Echtzeit von einem professionellen Drittunternehmen durchgeführt, dessen Dienstleistungen den internationalen Regulierungsrichtlinien entsprechen. Die Randomisierungssequenz wird nach Behandlungszentrum, weiblicher Altersgruppe (18–27, 28–34, 35–37, 38–40, 41–42), voraussichtlichem Embryotransfertag (Tag 3 und Tag 5) und Plan geschichtet Nutzen Sie genetische Präimplantationstests für die Embryonen. Es werden randomisierte Blöcke unterschiedlicher Größe (4, 6 oder 8) erstellt, um während und am Ende der Studie eine ähnliche Anzahl von Patienten in den Studiengruppen in jeder Schicht sicherzustellen.

3.0. BEHANDLUNGSPROTOKOLLE Die Intervention in dieser Studie ist die Zeit zwischen dem Ovulationsauslöser und dem OPU-Verfahren. Daher wendet jede Klinik ihre eigenen Routinebehandlungen an und trifft ihre eigenen Entscheidungen hinsichtlich der zu verwendenden Protokolle/Medikamente/Materialien und/oder Verfahren.

3.1. Kontrollierte ovarielle Hyperstimulation und Auslösen der Oozytenreifung Eines von drei Protokollen für die kontrollierte ovarielle Hyperstimulation (COH) kann je nach Präferenz des Arztes angewendet werden: Antagonistenprotokoll, Progestin-stimulierte Ovarialstimulation oder Agonistenprotokoll.

Sobald die Entscheidung getroffen wurde, die Oozytenreifung auszulösen, wird die verantwortliche Pflegekraft die Patientin randomisieren.

3.2. Verfahren zur Oozytenentnahme (OPU) Am Tag der OPU bestätigt und notiert die zuständige Pflegekraft die Zeit, zu der die Patientin das Medikament verabreicht hat. Sie wird dann die OPU-Startzeit aufzeichnen und die Einhaltung des Protokolls beurteilen. Die OPU-Zeit basiert auf der Stunde und Minute, zu der der erste Follikel aspiriert und aufgezeichnet wurde.

Die Gesamtzahl der Follikel, die größer als 10 mm sind, bei einer Ultraschalluntersuchung, die vor der OPU durchgeführt wurde, und das Vorhandensein von Anzeichen eines vorzeitigen Eisprungs werden aufgezeichnet. Für die OPU werden die von der Klinik routinemäßig verwendete Nadel und Lösung verwendet. Alle Follikel mit einem Durchmesser von mehr als zehn Millimetern werden abgesaugt.

3.3. Befruchtung, Embryokultur und Embryotransfer Alle von OPU gewonnenen reifen Oozyten werden durch intrazytoplasmatische Spermieninjektion (ICSI) befruchtet. Nach der Befruchtung werden Eizellen/Embryonen gemäß den Standardprotokollen des Zentrums kultiviert.

Embryonen werden nach Ermessen des Arztes frisch oder gefroren-aufgetaut übertragen. Die Vorbereitung für den Transfer von gefrorenen und aufgetauten Embryonen erfolgt nach Ermessen des Arztes als natürlicher, modifizierter natürlicher oder künstlicher Zyklus.

Embryotransfers werden unter transabdomineller Ultraschallkontrolle im Spaltungs- oder Blastozystenstadium (Tag 3 oder Tag 5) gemäß den Vorlieben des Arztes und dem klinischen Protokoll durchgeführt. Ein oder zwei Embryonen werden gemäß den Vorschriften des Gesundheitsministeriums übertragen. Die Unterstützung der Lutealphase wird gemäß der Routinebehandlung jeder Klinik bereitgestellt.

4. BEWERTUNG DER ERGEBNISSE Primäre und sekundäre Ergebnismaße werden im Abschnitt „Ergebnismaße“ beschrieben.

5. DATENERHEBUNG UND -VERWALTUNG 5.1. Datenerfassung Studiendaten werden täglich in das elektronische Datenerfassungsformular (EDC) der Studie eingegeben. EDC-Formulare werden online in Echtzeit ausgefüllt und von einem professionellen Drittunternehmen gespeichert, dessen Dienstleistungen weltweite Compliance-Zertifizierungen wie FDA CFR Part 11, GDPR (EU), ICH GCP (HIPAA, US), ISO 27001 und ISO 9001 erfüllen , und wird an GCP, HL7 FHIR und anderen behördlichen Richtlinien ausgerichtet.

Jedes Quartal vergleicht ein Mitglied des Studienteams die Übereinstimmung zwischen den in die Klinikaufzeichnungen eingegebenen Daten und dem EDC-Formular. Vorzugsweise und wenn möglich werden alle aktuellen Dateien in der Zentrale und im EDZ-Formular verglichen; falls dies nicht möglich ist, wird ein Teil der Dateien (mindestens 50 %) zufällig ausgewählt und verglichen.

5.2. Datenerhebungszeitraum Die Auswertung der Ergebnisse erfolgt nach Vervollständigung der Angaben des letzten eingeschlossenen Patienten. An diesem Punkt werden alle Einträge in die Datenbank als vollständig bestätigt und erst dann wird der Randomisierungscode gebrochen und der Datenanalyseprozess beginnt.

5.3. Elektronische Datenbank, Dateneingabe und Qualitätskontrolle Zur Erfassung der Studiendaten wird eine elektronische Datenbank eingerichtet. Diese Datenbank wird von einer externen Organisation verwaltet, die in der Lage ist, die zu definierenden Sicherheits-, Vertraulichkeits-, Backup- und Qualitätsstandards zu erfüllen. Studiendaten werden täglich von autorisierten Studienkoordinatoren in das Studien-EDC-Formular eingegeben, und die Datenbank wird in Echtzeit aktualisiert und gesichert. Nur autorisierte Personen haben Zugriff auf die Datenbank, und jede Person ist entsprechend ihrer Rolle berechtigt, Daten zu sehen, zu sehen/zu schreiben oder Daten zu sehen/zu schreiben/zu ändern. Die Änderung oder Löschung von Daten erfordert die Zustimmung von mindestens zwei autorisierten Personen, und diese Änderungen werden nachverfolgt und begründet.

Während des Studienzeitraums wird vierteljährlich eine Qualitätskontrolle durchgeführt. In jedem Zeitraum werden die originalen Patienten-Follow-up-Dateien von vorzugsweise allen (oder, wenn dies nicht möglich ist, zufällig ausgewählten der Hälfte) der Teilnehmer, die sich in jedem Zentrum angesammelt haben, mit den Daten in der Datenbank verglichen. Die akzeptable Fehlerquote ist null für das primäre Ergebnismaß und weniger als 5 % für andere Variablen. Bei jeder Kontrolle werden, wenn die Diskrepanz zwischen den Originalformularen und der Datenbank in einem Zentrum 5 % übersteigt, die Originalaufzeichnungen dieses Zentrums mit allen Einträgen dieses Zentrums in der Datenbank verglichen und eine Datenbereinigung durchgeführt. Um Dateneingabefehler und Auslassungen zu minimieren, werden im elektronischen Datenerfassungsformular auszufüllende Pflichtfelder festgelegt und das Formular wird nicht im System gespeichert, ohne diese Felder auszufüllen; Ebenso lässt die Software keine Eingabe eines anderen Werts als der erwarteten Werte für jeden Parameter zu.

6. STATISTISCHE AUSWERTUNG 6.1. Berechnung der Stichprobengröße In Anbetracht der Tatsache, dass die Rate an Metaphase-2-Oozyten, die pro aspiriertem Follikel während der OPU in unserer Klinik gewonnen werden, 57 % beträgt, basieren die Berechnungen auf der Hypothese, dass eine absolute Steigerung dieser Rate um 10 % mit dem zu versuchenden Eingriff erreicht wird Es zeigte sich, dass insgesamt 770 Patienten bei 80 % Power und 5 % Alpha-Error-Level randomisiert werden sollten. Unter der Annahme, dass etwa 10 % der Patienten die Studie während der Nachbeobachtung abbrechen würden, würden 850 Patienten randomisiert. Sechs Zentren werden an der Studie teilnehmen, und es wird angenommen, dass diese Zahl bei dem erwarteten Studientempo in einem Jahr erreicht wird.

In den ersten beiden Zwischenanalysen kann dieser Stichprobenumfang gemäß den bisher in der Studie gewonnenen Wirksamkeitsdaten revidiert werden, sofern der gleiche Alpha-Fehler und die gleichen statistischen Trennschärfen beibehalten werden.

6.2. Umgang mit fehlenden Daten Es wird versucht, alle geplanten Daten vollständig zu erheben. Dennoch werden Patienten mit fehlenden Daten nicht aus den Analysen ausgeschlossen, sondern in die Intention-to-treat-Analyse aufgenommen. In Anbetracht der Tatsache, dass einige Patienten das Studienprotokoll möglicherweise nicht abschließen oder ihre Beziehung vor dem Ende des Nachbeobachtungszeitraums beenden, werden etwas mehr Patienten als die berechnete Stichprobengröße in die Studie aufgenommen. Wenn es Patienten mit fehlenden Ergebnismessdaten gibt, wird eine Sensitivitätsanalyse durchgeführt, um zu berechnen, wie sich die Ergebnisse unter verschiedenen Szenarien ändern können.

6.3. Statistischer Analyseplan Da die Auswertung der Ergebnisse primär nach dem Intention-to-treat-Prinzip erfolgt, bedeutet ein Abbruch der Nachsorge nicht einen Abbruch der Studie. Die Zeit zwischen dem Zeitpunkt der Verabreichung des für die Oozytenreifung verwendeten Arzneimittels und der OPU wird gemäß der Gruppe, in die die Patientin randomisiert wurde, als nicht auftretend aufgezeichnet. Dreißig Minuten vor und nach dem Ziel (36 Stunden ± 30 Minuten oder 38 Stunden ± 30 Minuten) gelten als innerhalb des Protokolls.

Wenn andererseits aus irgendeinem Grund die Zeit zwischen der Arzneimittelverabreichung und der OPU nicht dem Protokoll entspricht, dem der Patient gemäß den oben genannten Kriterien zugewiesen wurde, wird der Patient nicht von der Studie ausgeschlossen; die betreffende Zeit wird in Stunden und Minuten erfasst und in die nach dieser Zeit durchzuführende Per-Protocol-Analyse einbezogen. Die Per-Protocol-Analyse wird in einstündigen Zeitintervallen durchgeführt.

Im Allgemeinen werden Vergleiche kontinuierlicher Variablen zwischen Gruppen durch den t-Test oder den Mann-Whitney-U-Test gemäß den Verteilungsmerkmalen jeder Variablen durchgeführt, und Vergleiche kategorialer Variablen werden durch Chi-Quadrat und seine Ableitungen durchgeführt.

Die Werte kontinuierlicher Variablen in Gruppen werden mit geeigneten Maßen der zentralen Aggregation und Streuung zusammengefasst, während die Werte kategorialer Variablen in absoluten Werten und Prozentsätzen ausgedrückt werden.

Es wird eine multivariable Regressionsanalyse für die Auswirkung der Trigger-OPU-Zeit, des weiblichen Alters, der Anzahl der mikroinjizierten Metaphase-2-Oozyten und der Gesamtzahl der übertragenen Embryonen bei der kumulativen Lebendgeburt durchgeführt.

6.3.1. Zwischenanalysen

Die Daten für die primären und sekundären Endpunkte werden während des gesamten Studienzeitraums in 6-Monats-Intervallen ausgewertet. Die Peto-Haybittle-Stoppregel wird in den Zwischenanalysen verwendet und ein p < 0,01 für den Vergleich der primären Ergebnismessung ist erforderlich, um die Studie vorzeitig zu beenden. Die erste Zwischenanalyse soll durchgeführt werden, wenn die ersten 80 Patienten aufgenommen werden oder 3 Monate später, je nachdem, was zuerst eintritt.

7. SICHERHEIT, NEBENWIRKUNGEN UND RISIKEN Die Teilnehmer werden über die Risiken der Behandlung und die Erfolgsaussichten informiert, indem sie eine Einwilligungserklärung für die Studie und eine Einwilligungserklärung für ART vorlegen.

Der Gesamtverlauf der Studie wird in regelmäßigen Abständen von einem Data and Safety Monitoring Board überwacht, einschließlich der Rate der Patientenrekrutierung, der Einhaltung des Studienprotokolls und der gesammelten Ergebnisse. Dieses Sicherheitsgremium kann empfehlen, die Studie vorzeitig abzubrechen.

Studienverfahren sind ART-Standardpraxis und es werden keine pharmazeutischen Wirkstoffe oder medizinischen Geräte außerhalb der Routinepraxis verwendet. Abgesehen von den Risiken, die mit der ART selbst verbunden sind, ist mit der Studie kein zusätzliches medizinisches Risiko oder eine finanzielle Belastung zu erwarten.

Ein schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis (SAE) ist definiert als ein Ereignis, das zum Tod führt, Leben bedroht, einen Krankenhausaufenthalt erfordert oder die Dauer des Krankenhausaufenthalts verlängert oder eine dauerhafte/erhebliche Arbeitsunfähigkeit/Behinderung verursacht. Eines davon ist nicht zu erwarten.

Ein Verdacht auf eine unerwartete schwerwiegende Nebenwirkung (SUSAR) ist sowohl als unerwartetes als auch als schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis definiert.

SAE und SUSARs werden aufgezeichnet und unter Verwendung von SAE-Formularen gemeldet. Wenn ein SUSAR auftritt, wird das Formular sofort vom Forscher ausgefüllt und die Ethikkommission der Universität Koç sowie der Vorsitzende des Data and Safety Monitoring Board werden unverzüglich informiert. Das Gesundheitsministerium wird innerhalb von 7 Tagen benachrichtigt, wenn das Ereignis lebensbedrohlich ist, und innerhalb von 15 Tagen, wenn das Ereignis nicht lebensbedrohlich ist.